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2025-01-10 17:05:48質(zhì)譜 蛋白 細(xì)胞 冰箱 離心機(jī)
質(zhì)譜:一種分析技術(shù),通過(guò)測(cè)量樣品離子的質(zhì)荷比進(jìn)行成分分析,廣泛應(yīng)用于藥物研發(fā)、環(huán)境監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域。

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2025-04-18 17:45:16液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀如何使用?
液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀(LC-MS)是現(xiàn)代分析化學(xué)中廣泛應(yīng)用的一種儀器,它結(jié)合了液相色譜(HPLC)和質(zhì)譜(MS)技術(shù)的優(yōu)勢(shì),能夠高效地分離、鑒定和定量分析復(fù)雜樣品中的化合物。隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展,LC-MS已成為環(huán)境監(jiān)測(cè)、藥物分析、食品安全、臨床診斷等領(lǐng)域不可或缺的工具。本文將深入探討液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀的使用原理、應(yīng)用領(lǐng)域及其優(yōu)勢(shì),幫助讀者了解這一儀器的廣泛用途和重要性。 液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀的工作原理基于液相色譜與質(zhì)譜的結(jié)合。液相色譜用于分離復(fù)雜樣品中的各組分,質(zhì)譜則通過(guò)測(cè)量離子的質(zhì)量與電荷比(m/z)進(jìn)行分析,進(jìn)而確定分子的結(jié)構(gòu)和質(zhì)量。這種聯(lián)用方式使得LC-MS能夠提供比單一技術(shù)更為全面和精確的分析結(jié)果。在操作過(guò)程中,液相色譜首先將樣品中的各組分按照其化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行分離,分離后的組分被導(dǎo)入質(zhì)譜進(jìn)行進(jìn)一步的檢測(cè)和定量分析。 LC-MS儀器的主要優(yōu)勢(shì)之一是其的靈敏度和高分辨率。相比傳統(tǒng)的色譜分析方法,液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀在檢測(cè)低濃度樣品時(shí)具有明顯的優(yōu)勢(shì),能夠精確識(shí)別復(fù)雜矩陣中的微量物質(zhì)。由于質(zhì)譜具有極高的選擇性,LC-MS能夠有效避免樣品中干擾物質(zhì)的影響,確保分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。 在應(yīng)用方面,液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀廣泛用于多個(gè)領(lǐng)域。在藥物研發(fā)中,LC-MS能夠精確測(cè)定藥物的含量和代謝產(chǎn)物,為藥物的安全性和有效性評(píng)估提供數(shù)據(jù)支持。在環(huán)境監(jiān)測(cè)中,LC-MS可以檢測(cè)水質(zhì)、空氣和土壤中的有害物質(zhì),如農(nóng)藥殘留、重金屬和有機(jī)污染物。在食品安全領(lǐng)域,LC-MS被用來(lái)檢測(cè)食品中的有害物質(zhì)和添加劑,如激素、抗生素和食品染料等。LC-MS還在臨床診斷中應(yīng)用,幫助醫(yī)生分析患者體內(nèi)的代謝物,進(jìn)而診斷疾病。 液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀的使用不僅限于上述領(lǐng)域,還可以應(yīng)用于法醫(yī)分析、化學(xué)品鑒定等眾多研究方向。其高通量、高精度的特點(diǎn),使其成為化學(xué)分析中不可或缺的重要工具。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步,液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀在各行業(yè)中的應(yīng)用將越來(lái)越廣泛,未來(lái)將繼續(xù)為科學(xué)研究和工業(yè)應(yīng)用提供強(qiáng)大的支持。 液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀作為一種先進(jìn)的分析工具,憑借其獨(dú)特的分離與分析能力,在各個(gè)領(lǐng)域中發(fā)揮著不可替代的作用。隨著技術(shù)的不斷發(fā)展,液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀的應(yīng)用前景將更加廣闊,為科研人員和工程師提供更加高效、的分析手段,推動(dòng)各行各業(yè)的創(chuàng)新與發(fā)展。
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2025-04-18 17:45:16液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀的步驟有哪些?
液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀的步驟 液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀(LC-MS)是現(xiàn)代分析實(shí)驗(yàn)室中常見(jiàn)且重要的工具,廣泛應(yīng)用于化學(xué)分析、藥物研發(fā)、環(huán)境監(jiān)測(cè)等多個(gè)領(lǐng)域。它結(jié)合了液相色譜(LC)和質(zhì)譜(MS)兩種分析技術(shù),通過(guò)液相色譜分離樣品中的各個(gè)組分,再利用質(zhì)譜進(jìn)行檢測(cè)與定性分析,為復(fù)雜樣品的精確分析提供了有力的支持。本文將詳細(xì)介紹液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀的操作步驟,幫助研究人員更好地理解并掌握其應(yīng)用技巧。 1. 樣品準(zhǔn)備 液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用的步是樣品準(zhǔn)備,通常包括樣品的提取、溶解以及濾過(guò)等處理。根據(jù)樣品的性質(zhì),選擇合適的溶劑進(jìn)行溶解,并確保溶液的濃度適合進(jìn)行分析。對(duì)于復(fù)雜樣品,可能需要先進(jìn)行濃縮或分離,以去除干擾物質(zhì)。使用適當(dāng)?shù)倪^(guò)濾裝置(如0.22 μm濾膜)對(duì)樣品進(jìn)行濾過(guò),避免顆粒物進(jìn)入色譜系統(tǒng),影響分析結(jié)果。 2. 液相色譜系統(tǒng)的設(shè)置 液相色譜系統(tǒng)是LC-MS中的核心部分,主要用于樣品的分離。在開(kāi)始分析前,需要根據(jù)目標(biāo)化合物的性質(zhì)選擇合適的色譜柱、流動(dòng)相及流速。通常,選擇反相色譜柱用于大多數(shù)分析,其流動(dòng)相一般由水和有機(jī)溶劑(如甲醇或乙腈)組成。流速的設(shè)置應(yīng)根據(jù)柱子的尺寸和樣品的性質(zhì)來(lái)調(diào)節(jié),以確保佳的分離效果。色譜柱的溫度和壓力也需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行調(diào)整。 3. 質(zhì)譜系統(tǒng)的校準(zhǔn) 在進(jìn)行液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用分析之前,需要對(duì)質(zhì)譜系統(tǒng)進(jìn)行校準(zhǔn)。通過(guò)使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)或質(zhì)譜校準(zhǔn)液,檢查質(zhì)譜儀的靈敏度、分辨率及質(zhì)量準(zhǔn)確性。校準(zhǔn)不僅能夠確保數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,也有助于提高系統(tǒng)的重復(fù)性和穩(wěn)定性。質(zhì)譜的模式選擇(如正離子模式或負(fù)離子模式)需根據(jù)目標(biāo)分析物的特性進(jìn)行優(yōu)化。 4. 數(shù)據(jù)采集與分析 在LC-MS聯(lián)用儀的操作過(guò)程中,液相色譜系統(tǒng)將樣品中的各個(gè)組分按其物理化學(xué)性質(zhì)分離,而質(zhì)譜系統(tǒng)則對(duì)這些分離的組分進(jìn)行質(zhì)譜分析,生成質(zhì)量-電荷比(m/z)譜圖。在這個(gè)過(guò)程中,實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)密切關(guān)注色譜圖和質(zhì)譜圖的信號(hào)強(qiáng)度、峰形以及響應(yīng)時(shí)間。通過(guò)分析質(zhì)譜圖的峰位和強(qiáng)度,可以實(shí)現(xiàn)目標(biāo)化合物的定性與定量分析。LC-MS系統(tǒng)通常還具備串聯(lián)質(zhì)譜(MS/MS)功能,可以進(jìn)一步提高分析的特異性和靈敏度。 5. 數(shù)據(jù)處理與報(bào)告 數(shù)據(jù)采集后,分析人員應(yīng)利用專門(mén)的軟件對(duì)質(zhì)譜圖進(jìn)行處理,提取關(guān)鍵信息,如各個(gè)目標(biāo)物質(zhì)的保留時(shí)間、質(zhì)量峰和相應(yīng)的定量數(shù)據(jù)。在這一過(guò)程中,可以應(yīng)用峰面積、峰高等方法進(jìn)行定量計(jì)算。研究人員需要撰寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告,詳細(xì)記錄實(shí)驗(yàn)過(guò)程、分析結(jié)果和數(shù)據(jù)處理方法,確保結(jié)果的可靠性和可重復(fù)性。 6. 儀器維護(hù)與質(zhì)量控制 為了保持液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀的長(zhǎng)期穩(wěn)定性,定期的儀器維護(hù)和質(zhì)量控制是必要的。色譜柱和質(zhì)譜探測(cè)器的更換、流動(dòng)相的過(guò)濾、儀器內(nèi)部管路的清洗等操作,都需要定期進(jìn)行。建立標(biāo)準(zhǔn)化的操作流程和質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn),有助于提高實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可信度和可重復(fù)性。 結(jié)論 液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀是一種高效、的分析工具,在各類復(fù)雜樣品的分析中展現(xiàn)出其獨(dú)特優(yōu)勢(shì)。了解并掌握LC-MS的操作步驟,對(duì)于提升分析的效率和準(zhǔn)確性至關(guān)重要。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步,液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀將在更多領(lǐng)域中發(fā)揮更大的作用。
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2022-11-08 10:31:20【講座分享】智能質(zhì)譜與生物反應(yīng)器聯(lián)動(dòng),加速細(xì)胞基因治療工藝開(kāi)發(fā)
CQA數(shù)據(jù)在生物制品開(kāi)發(fā)過(guò)程中發(fā)揮著重要作用,但分析結(jié)果往往要在采樣數(shù)周后才能獲得。為了助力生物制藥行業(yè)的高速發(fā)展,賽多利斯與沃特世達(dá)成合作 — 作為新型生物工藝分析儀, Waters BioAccord LC-MS系統(tǒng)與賽多利斯Ambr多并行生物反應(yīng)器系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)數(shù)據(jù)聯(lián)通,提供有關(guān)生物原液、相關(guān)分析物和細(xì)胞培養(yǎng)基的質(zhì)譜信息。該組合可在提高準(zhǔn)確性的同時(shí)大幅提升從克隆篩選到生物工藝優(yōu)化等各項(xiàng)任務(wù)的完成速度。圖. Waters BioAccord LC-MS系統(tǒng)(左)、SartoriusAmbr 15系統(tǒng)(右)。常規(guī)的生物制藥工藝開(kāi)發(fā)流程在常規(guī)生物制藥工藝開(kāi)發(fā)過(guò)程中,需要經(jīng)過(guò)細(xì)胞系篩選/克隆篩選、上下游條件優(yōu)化、PQA參數(shù)監(jiān)測(cè)、生物工藝優(yōu)化和可比性研究等環(huán)節(jié),其分析步驟往往需要通過(guò)合作實(shí)驗(yàn)室或質(zhì)譜中心實(shí)驗(yàn)室執(zhí)行LC-MS檢測(cè),因此,通常需要4周時(shí)間才能收到培養(yǎng)運(yùn)行的PQA和培養(yǎng)基分析結(jié)果,且下一次迭代開(kāi)始時(shí)獲得的信息可能并不完全。因此,生物工藝科學(xué)家們對(duì)于自動(dòng)化前處理、LC-MS多屬性方法構(gòu)建以及高通量LC-MS工作流程的需求正日益增加。圖1. 生物制藥工藝開(kāi)發(fā)流程。細(xì)胞與基因治 療 — 病毒載體的工藝開(kāi)發(fā)在基于病毒載體的基因治 療中,修飾的病毒被用作藥物遞送載體,將特定基因片段遞送到細(xì)胞中。HEK293常用于生產(chǎn)病毒載體,如腺病毒、腺相關(guān)病毒和逆轉(zhuǎn)錄病毒載體等?;贐ioAccord LC-MS系統(tǒng)開(kāi)發(fā)的細(xì)胞培養(yǎng)基方法已被用于HEK293病毒載體培養(yǎng)基的分析。圖2.基于BioAccord/waters_ .connect 平臺(tái)的培養(yǎng)分析工作流程示意圖。在HEK293培養(yǎng)基中檢測(cè)到三大類化合物,氨基酸、維生素以及幾種核酸和核苷。最豐富的化合物類別是氨基酸;其次是維生素;核酸和核苷是最不豐富的化合物??焖俅x的氨基酸谷氨酰胺以其穩(wěn)定的二肽形式被包括為丙氨酰谷氨酰胺。與基礎(chǔ)培養(yǎng)基DMEM和IMDM相比,HEK293病毒載體培養(yǎng)基通常具有更高濃度的氨基酸和維生素。核酸和核苷通常不存在于基礎(chǔ)培養(yǎng)基中。前35種化合物在1:200和1:500的稀釋比下觀察到了出色的LC-MS重現(xiàn)性,如表1所示。根據(jù)在多次稀釋時(shí)觀察到的響應(yīng),建議將1:500的稀釋比用于常規(guī)監(jiān)測(cè)病毒載體生產(chǎn)過(guò)程中的培養(yǎng)基成分。圖3. ESI+條件下,在HEK293介質(zhì)中觀察到的前34種化合物的覆蓋XIC圖。出于顯示目的,氨基酸是從1:2,000稀釋的樣品中提取的,維生素和其他化合物是從1:100稀釋的樣品中提取的。維生素肌醇在負(fù)離子模式下觀察到(數(shù)據(jù)未顯示)。圖4. HEK293培養(yǎng)基中檢測(cè)到三大類化合物響應(yīng)的代表性條形趨勢(shì)圖。(A)氨基酸-異亮氨酸為例,在進(jìn)樣開(kāi)始和結(jié)束時(shí)顯示標(biāo)準(zhǔn)校準(zhǔn)曲線,異亮氨酸存在于標(biāo)準(zhǔn)品和所有培養(yǎng)基樣品中。(B)維生素-吡哆醇為例,顯示該化合物存在于HEK293培養(yǎng)基和DMEM培養(yǎng)?;?,而不是像預(yù)期的那樣存在于IMDM培養(yǎng)基中;(C)核堿基-次黃嘌呤為例,顯示該化合物存在于HEK293中,而不是存在于DMEM和IMDM介質(zhì)中。表1. 基于三次重復(fù)進(jìn)樣的前35種化合物的響應(yīng)和重現(xiàn)性摘要分析結(jié)果顯示,HEK293含有超過(guò)35種化合物,其化合物類別包括氨基酸、維生素以及核酸和核苷,可以很容易地檢測(cè)和監(jiān)測(cè)。數(shù)據(jù)表明,除了蛋白質(zhì)生產(chǎn)中的細(xì)胞培養(yǎng)和微生物培養(yǎng)基監(jiān)測(cè)外,細(xì)胞培養(yǎng)基分析方法還適用于基因治療中的一般培養(yǎng)基監(jiān)測(cè)。講座回顧為幫助廣大用戶更好地了解生物工藝開(kāi)發(fā)過(guò)程中加速CQA和培養(yǎng)基分析過(guò)程,沃特世攜手賽多利斯舉辦了主題網(wǎng)絡(luò)研討會(huì),探討了如何將生物反應(yīng)器Ambr 15連接到BioAccord LC-MS系統(tǒng),并在24小時(shí)內(nèi)生成高質(zhì)量數(shù)據(jù)?,F(xiàn)在就掃描下方二維碼回顧吧,了解賽多利斯和沃特世合作帶來(lái)的優(yōu)勢(shì),以及如何簡(jiǎn)化您的分析測(cè)試。掃描上方二維碼回顧講座 研討會(huì)主題:如何通過(guò)連接Ambr 15和BioAccord系統(tǒng)縮短CQA分析周轉(zhuǎn)時(shí)間更頻繁地分析如何揭示CQA在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中的變化深入挖掘 — 從培養(yǎng)基分析中獲得對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程的進(jìn)一步洞察主講人:
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2023-08-16 10:54:34探秘賽默飛色譜質(zhì)譜“0” 元購(gòu)!
2023年秋天已來(lái),秋天的第 一臺(tái)儀器,就來(lái)賽默飛,今天帶您體驗(yàn)色譜質(zhì)譜的購(gòu)機(jī)新方式!賽默飛“0”元購(gòu)的真相!即依托賽默飛融資租賃功能,根據(jù)客戶的需求,按雙方的事先合同約定,為客戶提供融資租賃方式采購(gòu)設(shè)備。無(wú)需占用前期資金,滿足條件儀器即可為您送到家!大幅降低固定資產(chǎn)投入及提高流動(dòng)資金保障!“0”元購(gòu)想買什么買什么!賽默飛色譜質(zhì)譜全線產(chǎn)品均可參與“0”元購(gòu),機(jī)型覆蓋LC, GC, LCMS, GCMS, ICP, ICPMS, IC, AAS, 前處理設(shè)備等,打包不同的檢測(cè)解決方案,全方位一站式服務(wù),對(duì)標(biāo)國(guó)際先進(jìn)水平!“0”元購(gòu)也可以很簡(jiǎn)單!掃碼取得聯(lián)系僅需掃描二維碼并提交需求信息,會(huì)由賽默飛專員及時(shí)與您取得聯(lián)系。
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2023-07-03 11:13:01新技術(shù) | 開(kāi)創(chuàng)性靶向質(zhì)譜解決方案,還不快來(lái)了解一下!
近期,沃特世發(fā)布業(yè)內(nèi)開(kāi)創(chuàng)性的全新靶向成像解決方案:DESI XS - Xevo TQ Absolute系統(tǒng),開(kāi)啟靶向質(zhì)譜成像新紀(jì)元。擁有優(yōu)異靈敏度的Xevo TQ Absolute三重四極桿質(zhì)譜儀與沃特世獨(dú)有的增強(qiáng)型解吸電噴霧電離源DESI XS強(qiáng)強(qiáng)聯(lián)合,成為靶向質(zhì)譜成像新標(biāo)桿。具體有哪些特點(diǎn)?下面小編就一一羅列!01、優(yōu)秀的成像分辨率,可輕松達(dá)到20 μM ,專家級(jí)別科學(xué)家可通過(guò)調(diào)整參數(shù)顯示 5 μM 的空間分辨率;02、優(yōu)異的靈敏度,較非靶向質(zhì)譜成像提升至少5倍;03、更快的速度,較非靶向質(zhì)譜成像提升至少5倍;04、專配的軟件為質(zhì)譜成像定量實(shí)驗(yàn)提供完整的工作流程;05、全面的方案技術(shù)支持,沃特世目前是唯 一提供商用DESI/QQQ產(chǎn)品、解決方案和售后服務(wù)的供應(yīng)商;沃特世產(chǎn)品專家在前不久的質(zhì)譜大會(huì)上也詳細(xì)介紹了這款靶向成像質(zhì)譜的信息,掃描下方二維碼,即可觀看新鮮出爐的產(chǎn)品解析!掃描二維碼觀看掃描二維碼,您還將看到由沃特世應(yīng)用工程師帶來(lái)的全譜圖應(yīng)用案例和業(yè)界專家分享的質(zhì)譜成像在中藥研究中的應(yīng)用思路:靶向成像解決方案與非靶向成像解決方案相結(jié)合,可以提供卓 越的覆蓋靶向和非靶向的全譜圖質(zhì)譜成像解決方案。在文物研究、中藥研究、藥代動(dòng)力學(xué)研究、標(biāo)志物研究等空間分布研究方面帶來(lái)大量解決方案。沃特世的質(zhì)譜成像解決方案在用戶現(xiàn)場(chǎng)表現(xiàn)優(yōu)異,已成為用戶進(jìn)行科學(xué)研究的有力工具。掃碼觀看中科院上海藥物研究所高級(jí)工程師侯晉軍老師 “中藥質(zhì)譜成像及空間異質(zhì)性分析”的報(bào)告,學(xué)習(xí)質(zhì)譜成像技術(shù)在中藥研究的應(yīng)用思路。
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