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2025-03-28 15:21:56浮游動(dòng)物圖像原位采集
浮游動(dòng)物圖像原位采集是一種利用專業(yè)設(shè)備,在水體中直接對浮游動(dòng)物進(jìn)行圖像捕捉和記錄的技術(shù)。該技術(shù)通過高分辨率攝像頭與采樣器的結(jié)合,能夠在不干擾浮游動(dòng)物自然狀態(tài)的情況下,實(shí)時(shí)捕捉其圖像信息。這有助于科研人員準(zhǔn)確識(shí)別浮游動(dòng)物種類、數(shù)量及分布特征,為水生態(tài)系統(tǒng)研究、水質(zhì)監(jiān)測及環(huán)境保護(hù)提供重要數(shù)據(jù)支持。該技術(shù)具有操作簡便、數(shù)據(jù)準(zhǔn)確、對生態(tài)環(huán)境影響小等優(yōu)點(diǎn)。

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2025-04-07 13:45:14淡水浮游生物怎么采集
淡水浮游生物的采集是水生生態(tài)學(xué)研究中的一個(gè)重要環(huán)節(jié),對于科學(xué)家們理解水體生態(tài)環(huán)境的健康狀況、物種多樣性以及水質(zhì)變化等方面至關(guān)重要。本篇文章將詳細(xì)介紹淡水浮游生物的采集方法,包括采集工具的選擇、具體操作步驟以及注意事項(xiàng)等內(nèi)容。通過這些專業(yè)的技術(shù)手段,可以確保所采集的浮游生物樣本具有代表性,為后續(xù)的分析和研究提供準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)支持。 1. 淡水浮游生物的定義與分類 浮游生物是指生活在水體中,隨水流漂浮的小型生物,主要分為植物浮游生物和動(dòng)物浮游生物。植物浮游生物通常為微小的藻類,而動(dòng)物浮游生物則包括各種微型水生動(dòng)物,如輪蟲、橈足類等。這些浮游生物在水體的物質(zhì)循環(huán)和能量流動(dòng)中扮演著至關(guān)重要的角色,研究它們對于水環(huán)境監(jiān)測和生物多樣性保護(hù)具有重要意義。 2. 采集工具的選擇 采集淡水浮游生物時(shí),首先需要選擇合適的工具。常見的采集工具有: 浮游生物網(wǎng):這是一種專門用于捕捉浮游生物的工具,通常由細(xì)密的網(wǎng)眼制成,可以有效過濾水中的微小生物。選擇合適孔徑的網(wǎng)眼至關(guān)重要,過大的網(wǎng)眼無法捕捉到足夠的浮游生物,而過小的網(wǎng)眼則可能導(dǎo)致水流阻力過大,影響采集效率。 水樣瓶:用于取水樣,瓶口應(yīng)盡量平行于水面,避免采集到過多底部沉積物。在采集過程中,注意避免外界污染,確保樣本的純凈性。 過濾裝置:在某些情況下,使用過濾裝置可以將水樣中的浮游生物與水分分離,便于后續(xù)的分析和研究。 3. 采集方法與步驟 采集淡水浮游生物時(shí),需要遵循一定的操作步驟,以確保樣本的代表性和準(zhǔn)確性。 選擇采集點(diǎn):選擇代表性的采集點(diǎn)。通??梢赃x擇水體中的多個(gè)區(qū)域,如水面、近岸、深水區(qū)等不同的水層,以全面了解浮游生物的種群結(jié)構(gòu)。 取樣過程:將浮游生物網(wǎng)或水樣瓶垂直于水面,緩慢而均勻地拖拽或取樣。在拖拽過程中,保持網(wǎng)或瓶的穩(wěn)定,避免造成樣本的污染。 樣本處理:采集完成后,應(yīng)立即將水樣倒入清潔的容器中,避免樣本暴露于空氣中時(shí)間過長,導(dǎo)致浮游生物死亡或形態(tài)變化。然后,通過過濾或離心等方法提取浮游生物。 4. 注意事項(xiàng) 在采集過程中,有幾個(gè)方面需要特別注意: 采樣時(shí)間:浮游生物的種類和數(shù)量受到時(shí)間和季節(jié)的影響,選擇合適的采樣時(shí)間非常重要。通常在清晨或傍晚進(jìn)行采樣效果更佳,因?yàn)檫@時(shí)浮游生物活躍度較高。 水質(zhì)的影響:水體的溫度、透明度以及流速等因素都會(huì)影響浮游生物的分布和密度。在不同水質(zhì)條件下,采集策略也應(yīng)有所調(diào)整。 采集設(shè)備的清潔:確保所有采集工具干凈無污染,避免交叉污染,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 5. 結(jié)語 淡水浮游生物的采集是水質(zhì)監(jiān)測和生態(tài)研究的重要環(huán)節(jié),掌握科學(xué)的采集方法不僅能提高研究的準(zhǔn)確性,還能為水體生態(tài)保護(hù)提供寶貴的數(shù)據(jù)支持。在實(shí)際操作中,選擇合適的工具和采樣技術(shù)、合理安排采樣時(shí)間與地點(diǎn)是成功采集的關(guān)鍵。
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2024-11-15 10:53:13顆粒圖像分析儀測什么的
顆粒圖像分析儀是一種先進(jìn)的檢測儀器,專門用于測量和分析顆粒的形狀、分布等特性,廣泛應(yīng)用于材料科學(xué)、化工等領(lǐng)域。本文將詳細(xì)探討顆粒圖像分析儀的測量功能、其在不同應(yīng)用場景中的實(shí)際用途,以及對行業(yè)生產(chǎn)和研發(fā)的重要性。通過深入分析各項(xiàng)指標(biāo)和技術(shù)原理,幫助讀者全面了解顆粒圖像分析儀如何實(shí)現(xiàn)測量,進(jìn)而提高工業(yè)生產(chǎn)效率、產(chǎn)品質(zhì)量和研發(fā)水平。一、顆粒圖像分析儀的主要測量功能顆粒圖像分析儀利用圖像處理技術(shù)對顆粒進(jìn)行精確測量,其主要功能包括以下幾個(gè)方面:顆粒形狀分析:該儀器能夠檢測顆粒的形狀,包括球形度、粗糙度等。形狀信息對于質(zhì)量控制和材料性能評(píng)估至關(guān)重要。例如,在制藥行業(yè),藥物顆粒的形狀會(huì)直接影響其溶解速度和吸收率。顆粒大小分布:通過顆粒圖像分析儀,可以測量不同尺寸顆粒的分布情況。顆粒大小分布決定了材料的均勻性和穩(wěn)定性,如化工領(lǐng)域中,催化劑顆粒的大小分布會(huì)影響其反應(yīng)效率和選擇性。顆粒表面特征分析:一些先進(jìn)的顆粒圖像分析儀還可以捕捉顆粒的表面特征。二、顆粒圖像分析儀在各行業(yè)的應(yīng)用顆粒圖像分析儀因其強(qiáng)大的分析功能,被廣泛應(yīng)用于多個(gè)行業(yè):制藥行業(yè):在藥物開發(fā)和生產(chǎn)中,顆粒圖像分析儀可用來評(píng)估顆粒的形態(tài)和大小,以確保藥品的一致性和生物利用度。通過精確控制顆粒特性,藥物可以在人體內(nèi)更穩(wěn)定、均勻地釋放。食品行業(yè):在食品生產(chǎn)中,顆粒的大小和形狀對質(zhì)地和口感有重要影響。顆粒圖像分析儀可幫助廠家精確控制配方中各成分的分布,以提升產(chǎn)品的質(zhì)量和一致性?;ば袠I(yè):在化學(xué)反應(yīng)和催化劑開發(fā)中,顆粒的尺寸和表面特性至關(guān)重要。顆粒圖像分析儀可以有效地分析催化劑顆粒的形態(tài),幫助優(yōu)化反應(yīng)條件,提高生產(chǎn)效率。材料科學(xué):在新材料開發(fā)中,顆粒的形狀和分布直接影響材料的強(qiáng)度和韌性。顆粒圖像分析儀被廣泛應(yīng)用于材料研發(fā)中,助力科學(xué)家設(shè)計(jì)出更高性能的材料。三、顆粒圖像分析儀測量的技術(shù)原理顆粒圖像分析儀的測量基于圖像處理和數(shù)據(jù)分析技術(shù),主要包含以下核心技術(shù)原理:光學(xué)成像系統(tǒng):高分辨率的光學(xué)鏡頭可清晰捕捉顆粒圖像,為后續(xù)的圖像處理提供精確數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。圖像處理算法:通過多種圖像處理算法,儀器能夠分辨和識(shí)別顆粒邊界,計(jì)算出顆粒的幾何參數(shù),如面積、周長等。數(shù)據(jù)分析模型:為了實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確的顆粒分析,現(xiàn)代顆粒圖像分析儀通常配有專門的數(shù)據(jù)分析模型,可以自動(dòng)生成顆粒的統(tǒng)計(jì)分布圖和特性參數(shù)表。
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2024-11-15 10:55:22圖像顆粒分析儀怎么用
圖像顆粒分析儀是一種利用圖像處理技術(shù)對顆粒進(jìn)行定量與定性分析的重要儀器,廣泛應(yīng)用于材料科學(xué)、環(huán)境監(jiān)測、食品工業(yè)等領(lǐng)域。本文將詳細(xì)介紹圖像顆粒分析儀的工作原理、使用方法及注意事項(xiàng),幫助用戶更好地理解其操作流程,并確保獲得準(zhǔn)確的分析結(jié)果。通過對圖像處理算法和設(shè)備調(diào)校的深入解析,您將全面掌握圖像顆粒分析儀的應(yīng)用技巧,從而提升實(shí)驗(yàn)效率與數(shù)據(jù)精度。圖像顆粒分析儀的工作原理圖像顆粒分析儀通過高分辨率相機(jī)或顯微鏡采集物質(zhì)顆粒的圖像,并利用圖像處理軟件進(jìn)行分析。這些軟件能夠識(shí)別圖像中的顆粒邊界,并根據(jù)顆粒的形狀、尺寸、數(shù)量等參數(shù)進(jìn)行定量分析。通過對顆粒分布、粒徑分布等數(shù)據(jù)的提取,用戶可以全面了解樣品的物理特性,并為后續(xù)的質(zhì)量控制或研究提供數(shù)據(jù)支持。圖像顆粒分析儀的使用步驟設(shè)備設(shè)置開啟圖像顆粒分析儀并進(jìn)行必要的設(shè)置。調(diào)整照明強(qiáng)度、焦距以及相機(jī)的分辨率,確保成像清晰。設(shè)備通常提供不同的放大倍率,用戶應(yīng)根據(jù)樣品顆粒的大小選擇合適的倍率,以便清晰觀察顆粒的細(xì)節(jié)。圖像采集與處理將樣品置于分析儀下方,開始圖像采集。分析儀會(huì)自動(dòng)捕捉多個(gè)圖像幀,并進(jìn)行實(shí)時(shí)處理。圖像處理軟件將通過邊緣檢測、濾波等技術(shù)識(shí)別顆粒的輪廓,并進(jìn)行顆粒分類、計(jì)數(shù)和測量。數(shù)據(jù)分析與結(jié)果導(dǎo)出采集到的圖像數(shù)據(jù)經(jīng)過軟件處理后,用戶可以查看顆粒的粒徑分布、形態(tài)分析等數(shù)據(jù)。許多圖像顆粒分析儀還支持將分析結(jié)果導(dǎo)出為Excel、PDF等格式,以便進(jìn)行進(jìn)一步的統(tǒng)計(jì)分析或報(bào)告制作。使用圖像顆粒分析儀的注意事項(xiàng)樣品準(zhǔn)備:樣品的均勻分散是確保測量準(zhǔn)確性的關(guān)鍵。對于液體樣品,適當(dāng)?shù)姆稚┖蛿嚢璨僮骺梢杂行П苊忸w粒沉淀或聚集。圖像分辨率:選擇合適的分辨率可以確保顆粒細(xì)節(jié)的清晰呈現(xiàn),避免因分辨率過低導(dǎo)致顆粒信息丟失。光源與對焦:穩(wěn)定的光源與精確的對焦是獲得高質(zhì)量圖像的基礎(chǔ)。在圖像采集過程中,應(yīng)保持圖像清晰無噪聲。軟件設(shè)置:根據(jù)不同的顆粒形態(tài)和分析目標(biāo),合理設(shè)置圖像處理軟件的參數(shù),確保數(shù)據(jù)分析的準(zhǔn)確性。總結(jié)圖像顆粒分析儀作為一種高效、的顆粒分析工具,能夠通過先進(jìn)的圖像處理技術(shù),為多個(gè)行業(yè)提供可靠的顆粒數(shù)據(jù)支持。在使用時(shí),用戶應(yīng)關(guān)注樣品準(zhǔn)備、設(shè)備設(shè)置、圖像采集與數(shù)據(jù)分析等環(huán)節(jié),確保每一步操作的規(guī)范性和精確性。只有在科學(xué)合理的操作下,圖像顆粒分析儀才能展現(xiàn)其大的應(yīng)用潛力,為用戶提供真實(shí)、有效的顆粒分析結(jié)果。
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2025-04-25 14:45:17工業(yè)CT圖像如何評(píng)判
工業(yè)CT圖像如何評(píng)判 在現(xiàn)代工業(yè)生產(chǎn)和檢測中,工業(yè)CT(計(jì)算機(jī)斷層成像)技術(shù)已成為一種重要的無損檢測手段。它能夠通過對物體的內(nèi)部進(jìn)行精確掃描,生成三維圖像,從而幫助工程師評(píng)估產(chǎn)品的質(zhì)量和結(jié)構(gòu)。這項(xiàng)技術(shù)廣泛應(yīng)用于航空航天、汽車制造、電子設(shè)備等行業(yè)。在評(píng)判工業(yè)CT圖像時(shí),準(zhǔn)確性和可靠性是關(guān)鍵的標(biāo)準(zhǔn),本文將探討如何從不同的維度對工業(yè)CT圖像進(jìn)行評(píng)判,確保其在實(shí)際應(yīng)用中的效果。 1. 圖像分辨率與清晰度 工業(yè)CT圖像的分辨率是評(píng)判其質(zhì)量的首要標(biāo)準(zhǔn)。圖像的分辨率越高,細(xì)節(jié)呈現(xiàn)越清晰,對于一些高精度的檢測任務(wù),如電子元件的檢查、金屬鑄件的裂紋檢測等,分辨率的要求尤為嚴(yán)格。高分辨率圖像能夠有效地顯示微小缺陷和結(jié)構(gòu)問題。圖像的清晰度不僅依賴于分辨率,還與掃描過程中的技術(shù)設(shè)置有關(guān),包含X射線源強(qiáng)度、掃描角度、采樣頻率等因素。因此,在評(píng)判工業(yè)CT圖像時(shí),首先需要確認(rèn)其分辨率是否滿足應(yīng)用需求,圖像的細(xì)節(jié)是否能夠真實(shí)反映被檢測物體的結(jié)構(gòu)。 2. 圖像對比度和噪聲 圖像的對比度與噪聲是另一個(gè)重要的評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)。對比度過低會(huì)導(dǎo)致細(xì)節(jié)難以區(qū)分,而噪聲過高則可能影響圖像的清晰度和分析的精確性。通過合理的圖像處理技術(shù),可以優(yōu)化圖像的對比度,去除噪聲,從而提高圖像的可讀性。在評(píng)判工業(yè)CT圖像時(shí),需要考慮到噪聲的影響,確保圖像中的關(guān)鍵信息沒有被模糊化或丟失。 3. 數(shù)據(jù)重建與三維可視化效果 工業(yè)CT圖像不僅是二維的斷層圖像,三維重建是其強(qiáng)大功能之一。在評(píng)估圖像質(zhì)量時(shí),三維重建效果的好壞直接關(guān)系到圖像的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。重建過程中的算法精度以及數(shù)據(jù)處理能力決定了終圖像的準(zhǔn)確性和可視化效果。一個(gè)高質(zhì)量的三維圖像應(yīng)該能夠清晰顯示被檢測物體的內(nèi)部結(jié)構(gòu),包括復(fù)雜的幾何形狀和微小缺陷。在評(píng)判時(shí),三維重建圖像的質(zhì)量不僅僅依賴于硬件設(shè)備,還需要綜合考慮軟件算法的優(yōu)化程度。 4. 成像精度與標(biāo)定 成像精度是衡量工業(yè)CT圖像質(zhì)量的關(guān)鍵因素之一。它要求CT系統(tǒng)能夠準(zhǔn)確還原被檢測物體的幾何形狀和尺寸。在實(shí)際應(yīng)用中,CT系統(tǒng)需要進(jìn)行定期標(biāo)定,確保掃描結(jié)果的準(zhǔn)確性。如果CT圖像在標(biāo)定之后能夠精確反映物體的實(shí)際尺寸和位置,說明該圖像質(zhì)量是可靠的。在此基礎(chǔ)上,工程師可以通過測量CT圖像中的尺寸數(shù)據(jù)來對產(chǎn)品進(jìn)行進(jìn)一步分析和評(píng)估。 5. 缺陷檢測與分類能力 工業(yè)CT圖像的應(yīng)用之一是對物體內(nèi)部缺陷的檢測。CT圖像能夠檢測出氣孔、裂紋、夾雜物等微小缺陷,并通過不同的算法對缺陷進(jìn)行分類。在評(píng)判工業(yè)CT圖像時(shí),除了觀察圖像的整體質(zhì)量,還需要考慮圖像缺陷檢測的準(zhǔn)確性和分類能力。高質(zhì)量的工業(yè)CT圖像能夠清楚地顯示缺陷的位置、形態(tài)以及大小,從而為后續(xù)的質(zhì)量分析提供準(zhǔn)確依據(jù)。 總結(jié) 評(píng)判工業(yè)CT圖像的質(zhì)量不僅僅是對圖像本身的分析,還涉及多個(gè)層面的綜合考量,包括分辨率、對比度、三維重建、成像精度以及缺陷檢測等因素。為了確保工業(yè)CT技術(shù)在實(shí)際應(yīng)用中的可靠性,只有在滿足以上標(biāo)準(zhǔn)的情況下,圖像才能為工程師提供有效的數(shù)據(jù)支持,確保檢測結(jié)果的性和可信度。因此,工業(yè)CT圖像的評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)必須與行業(yè)需求緊密結(jié)合,持續(xù)優(yōu)化技術(shù)手段,才能確保其在不同領(lǐng)域中的廣泛應(yīng)用。
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2022-12-06 13:04:21探秘腫瘤微環(huán)境,原位“看透”細(xì)胞因子
細(xì)胞因子是腫瘤微環(huán)境(Tumor Microenvironment,TME)中細(xì)胞通訊的關(guān)鍵介質(zhì),在癌癥的發(fā)生、發(fā)展、治 療和預(yù)后等多個(gè)方面發(fā)揮重要作用。在過去的 40 年中,細(xì)胞因子和細(xì)胞因子受體作為癌癥靶點(diǎn)或癌癥治 療方法得到了廣泛的研究。目前公認(rèn)的臨床前治 療策略為增強(qiáng)干擾素和白細(xì)胞介素(包括 IL-2 ,IL-7 ,IL-12 和 IL-15 )的生長抑 制和免疫刺激作用,或抑 制細(xì)胞因子(如 TNF ,IL-1β 和 IL-6 )的炎癥和促進(jìn)腫瘤的作用[1]。圖 1 . 細(xì)胞因子在腫瘤微環(huán)境中的作用特定細(xì)胞因子的表達(dá)也與腫瘤細(xì)胞的高存活率和高轉(zhuǎn)移性密切相關(guān)。其中促炎細(xì)胞因子 IL-6 和 IL-8 與多種癌癥相關(guān),包括淋巴瘤、黑色素瘤、乳腺癌、前列腺癌和結(jié)腸直腸癌等 [2,3]。因此,分析細(xì)胞因子的表達(dá)是一種重要的診斷工具和預(yù)測癌癥預(yù)后的關(guān)鍵因素。非放射性的 RNA 原位雜交技術(shù)(ViewRNA ISH)是一種高靈敏度的檢測細(xì)胞因子表達(dá)的有效方法,并且可以對 1 至 4 個(gè) mRNA 目標(biāo)進(jìn)行多重分析。檢測原理如下圖所示:圖 2 .  ViewRNA ISH 檢測原理安捷倫BioTek Cytation 5 多功能細(xì)胞成像微孔板檢測系統(tǒng),可容納多達(dá)四個(gè)熒光通道同時(shí)成像,快速并出色地成多色熒光成像。儀器配備的高內(nèi)涵分析軟件可自動(dòng)計(jì)算細(xì)胞內(nèi) RNA 的表達(dá)水平。Cytation 5 活細(xì)胞成像工作站結(jié)合ViewRNA ISH,為細(xì)胞因子研究提供了一種高效率、高靈敏度和可重復(fù)的檢測方法。實(shí)驗(yàn)案例分享 實(shí)驗(yàn)一.細(xì)胞因子mRNA的成像和分析 為研究細(xì)胞因子mRNA 在不同營養(yǎng)條件下的表達(dá)情況,設(shè)置兩組對照實(shí)驗(yàn)。陽性對照細(xì)胞培養(yǎng)于完全培養(yǎng)基中,而陰性對照細(xì)胞經(jīng)過 18 小時(shí)的血清饑餓處理。隨后加入 ViewRNA 探針以標(biāo)記 IL-6 、IL-8 和 ACTB mRNA ,在Cytation 5 上分別使用 RFP 、GFP 、Cy5 和 DAPI 通道對探針進(jìn)行成像完成 ISH 細(xì)胞分析。圖像結(jié)果表明:細(xì)胞因子mRNA 的表達(dá)在營養(yǎng)匱乏的條件下會(huì)顯著降低。圖 3 . 陽性和陰性對照組成像。HCT116 放大 20 倍圖像作為( A )陽性對照和( B )陰性對照。MDA-MB-231 細(xì)胞放大 40 倍的圖像作為( C )陽性對照和( D )陰性對照。藍(lán)色:DAPI 染色的細(xì)胞核;綠色:標(biāo)記 IL-8 mRNA ;橙色:標(biāo)記 IL-6 mRNA ;紅色:標(biāo)記 ACTB mRNA 。接下來為了定量分析細(xì)胞因子表達(dá),首先在 Cytation 5 的 DAPI 通道下進(jìn)行細(xì)胞核計(jì)數(shù),以確定每孔的細(xì)胞數(shù)量(圖 4A )。然后分別在GFP 、RFP 通道進(jìn)行細(xì)胞因子探針( IL-6 或 IL-8 )的熒光信號(hào)分析(圖 4B )。通過細(xì)胞熒光信號(hào)的比率評(píng)估不同實(shí)驗(yàn)條件下的細(xì)胞因子表達(dá)(圖 5 )。圖 4 . 每個(gè)細(xì)胞的熒光信號(hào)分析。( A ) 使用 Agilent-BioTek Gen5 軟件進(jìn)行細(xì)胞分析圈選出 DAPI 標(biāo)記的細(xì)胞核;( B ) 熒光標(biāo)記的 IL-8 信號(hào)的圖像分析。如圖 5 所示,使用 ViewRNA ISH 和 Cytation 5 這一組合準(zhǔn)確的量化了細(xì)胞內(nèi) IL-6 和 IL-8 mRNA 的表達(dá)。圖 5 . MDA-MB-231 細(xì)胞中 IL-8 表達(dá)和 HCT116 細(xì)胞中 IL-6 表達(dá),并以細(xì)胞數(shù)目進(jìn)行校正。 實(shí)驗(yàn)二.誘導(dǎo)細(xì)胞因子 mRNA 的表達(dá) 使用不同劑量的 IL-1β 刺激 DU145 細(xì)胞,以分析細(xì)胞因子的 mRNA 的表達(dá)(圖6)。圖 7 結(jié)果顯示:雖然 IL-6 和 IL-8 的 mRNA 表達(dá)增加,但 IL-8 的表達(dá)變化更為顯著,這與先前研究結(jié)果一致[4]。IL-1β 的最 高劑量下,這兩種細(xì)胞因子的表達(dá)減少則是由于細(xì)胞毒性。這驗(yàn)證了該檢測方法的可行性與穩(wěn)定性。圖 6 . 不同濃度的 IL-1β 刺激下的 IL-6 、IL-8 和 ACTB 熒光 mRNA 探針信號(hào) ( A ) 0 ng/mL;( B ) 0.02 ng/mL ;0.128 ng/mL;( D ) 0.8 ng/mL。藍(lán)色:DAPI染色的細(xì)胞核;綠色:標(biāo)記的IL-8 mRNA;橙色:標(biāo)記的 IL-6 mRNA ;紅色:標(biāo)記的 ACTB mRNA 。圖 7 . 不同濃度的 IL-1β 刺激下 DU145 細(xì)胞中 IL-6 和 IL-8 mRNA 的表達(dá)。 實(shí)驗(yàn)三.抑 制細(xì)胞因子 mRNA 的表達(dá) 研究表明絲裂原活化蛋白激酶( MAPK )可調(diào)節(jié) IL-8 ,并證明用 MAPK/ERK 抑 制劑 U 0126 治 療可減少 DU145 和 MDA-MB-231 細(xì)胞中的炎癥細(xì)胞因子[4,5]。為了確認(rèn)這一現(xiàn)象并驗(yàn)證 ViewRNA ISH 和 Cytation 5 這一組合的能力,將不同濃度的 U 0126 加入到每種細(xì)胞類型中孵育 30 分鐘。然后用 1 ng/mL 的 IL-1β 刺激 DU145 細(xì)胞達(dá) 3 小時(shí),而 MDA-MB-231 細(xì)胞未被刺激。使用 GFP 和 RFP 通道進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)和圖像分析以評(píng)估在 U 0126 治 療后 IL-8 和 IL-6 細(xì)胞因子 mRNA 的表達(dá)。采集的圖像(圖 8 )和計(jì)算的熒光信號(hào)強(qiáng)度 (圖 9 )證實(shí)了 U 0126 的抑 制作用。此外,也驗(yàn)證了該方法的靈敏度,可以準(zhǔn)確識(shí)別給予抑 制劑后 mRNA 的表達(dá)變化。圖 8. U 0126 抑 制 IL-8 mRNA 的表達(dá)。圖像顯示了在不同濃度的 U 0126 處理后 ( A-E ) MDA-MB-231 細(xì)胞內(nèi) IL-6 、IL-8 和 ACTB 熒光 mRNA 探針信號(hào);( F-J ) 為 DU145 細(xì)胞。藍(lán)色:DAPI 染色的細(xì)胞核;綠色:標(biāo)記的 IL-8 mRNA ;橙色:標(biāo)記的 IL-6 mRNA ;紅色:標(biāo)記的 ACTB mRNA 。圖 9 . U 0126 治療后 IL-8 和 IL-6 mRNA 在 MDA-MB-231 和 DU 145 細(xì)胞中的表達(dá)結(jié) 語ThermoFisher 的 ViewRNA ISH 細(xì)胞分析試劑盒和探針提供一種靈敏的方法來檢測 mRNA 表達(dá)。該方法在安捷倫BioTek Cytation 5 細(xì)胞成像系統(tǒng)的加持下得以更更快地采集多熒光通道的圖像,并更精 準(zhǔn)的計(jì)算出每一個(gè)細(xì)胞的熒光信號(hào)強(qiáng)度。這種檢測、成像和分析的完 美結(jié)合提供了一種靈敏、靈活和高通量的方法用以檢測細(xì)胞因子 mRNA 的表達(dá)。參考文獻(xiàn):[1] Propper DJ, Balkwill FR. Harnessing cytokines and chemokines for cancer therapy. Nat Rev Clin Oncol. 2022 Apr;19(4):237-253.[2] Kampan NC, Xiang SD, McNally OM, Stephens AN, Quinn MA, Plebanski M. Immunotherapeutic Interleukin-6 or Interleukin-6 Receptor Blockade in Cancer: Challenges and Opportunities. Curr Med Chem. 2018;25(36):4785-4806.[3] Vecchi L, Mota STS, Zóia MAP, Martins IC, de Souza JB, Santos TG, Beserra AO, de Andrade VP, Goulart LR, Araújo TG. Interleukin-6 Signaling in Triple Negative Breast Cancer Cells Elicits the Annexin A1/Formyl Peptide Receptor 1 Axis and Affects the Tumor Microenvironment. Cells. 2022 May 20;11(10):1705.[4] Kooijman R, Himpe E, Potikanond S, Coppens A. Regulation of interleukin-8 expression in human prostate cancer cells by insulin-like growth factor-I and inflammatory cytokines. Growth Horm IGF Res. 2007 Oct;17(5):383-91.[5] Chelouche-Lev D, Miller CP, Tellez C, Ruiz M, Bar-Eli M, Price JE. Different signalling pathways regulate VEGF and IL-8 expression in breast cancer: implications for therapy. Eur J Cancer. 2004 Nov;40(16):2509-18. 
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