- 2025-03-28 15:22:18紅色促凝劑采血管
- 紅色促凝劑采血管是一種采用促凝劑加速血液凝固的真空采血管,管壁為紅色標記,內(nèi)含促凝劑和抗凝分離膠。該采血管能迅速將血液樣本中的血清與血細胞分離,有效縮短檢驗前的處理時間,提高檢驗效率。促凝劑能加速凝血過程,使血清更快析出,適用于多種生化檢驗項目。其操作簡便,結(jié)果準確,是臨床實驗室常用的采血管類型之一。
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紅色促凝劑采血管產(chǎn)品
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紅色促凝劑采血管問答
- 2025-01-10 12:00:13動態(tài)應(yīng)變儀能采低頻信號嗎
- 動態(tài)應(yīng)變儀能采低頻信號嗎? 在現(xiàn)代工程測量和實驗研究中,動態(tài)應(yīng)變儀廣泛應(yīng)用于結(jié)構(gòu)健康監(jiān)測、材料試驗以及各類振動測試中。作為一種精密的測試工具,動態(tài)應(yīng)變儀主要用于測量物體在外力作用下的應(yīng)變情況,而其對低頻信號的采集能力一直是工程技術(shù)人員關(guān)注的重要問題。動態(tài)應(yīng)變儀能否有效采集低頻信號呢?本文將從動態(tài)應(yīng)變儀的工作原理、頻率響應(yīng)范圍以及適用領(lǐng)域等方面深入探討這一問題,幫助大家更好地理解動態(tài)應(yīng)變儀的性能特點。 動態(tài)應(yīng)變儀的工作原理 動態(tài)應(yīng)變儀通常采用應(yīng)變片原理,基于應(yīng)變片的電阻變化來監(jiān)測物體變形。當物體受到外力作用時,應(yīng)變片發(fā)生微小的形變,進而改變其電阻,動態(tài)應(yīng)變儀通過對電阻變化的實時采集來反映應(yīng)變信息。由于其高精度和實時性,動態(tài)應(yīng)變儀被廣泛應(yīng)用于對動態(tài)負載下的應(yīng)變變化進行監(jiān)測。 動態(tài)應(yīng)變儀的頻率響應(yīng) 動態(tài)應(yīng)變儀的頻率響應(yīng)范圍是決定其能否有效采集低頻信號的關(guān)鍵因素。頻率響應(yīng)指的是動態(tài)應(yīng)變儀能夠準確捕捉和傳輸?shù)男盘栴l率范圍。大部分動態(tài)應(yīng)變儀主要設(shè)計用于監(jiān)測中高頻信號,因此其頻率響應(yīng)范圍通常集中在10 Hz到幾千Hz之間。在這一范圍內(nèi),動態(tài)應(yīng)變儀能夠有效地測量由于外部負載或振動引起的應(yīng)變變化。 對于低頻信號(通常指低于10 Hz的頻率范圍),大多數(shù)常規(guī)動態(tài)應(yīng)變儀的響應(yīng)可能會減弱,這使得其在低頻范圍內(nèi)的測量精度受到一定影響。隨著科技的進步,一些高端或特殊設(shè)計的動態(tài)應(yīng)變儀能夠擴大其頻率響應(yīng)范圍,具備采集低頻信號的能力。這類設(shè)備通常采用更高靈敏度的傳感器和更強大的信號處理技術(shù),從而實現(xiàn)低頻信號的精確采集。 動態(tài)應(yīng)變儀能否采集低頻信號? 雖然傳統(tǒng)的動態(tài)應(yīng)變儀主要應(yīng)用于中高頻信號測量,但隨著技術(shù)的發(fā)展,部分現(xiàn)代動態(tài)應(yīng)變儀已經(jīng)具備了較強的低頻響應(yīng)能力。特別是在一些精密工程應(yīng)用中,如土木結(jié)構(gòu)健康監(jiān)測、大型機械設(shè)備的振動分析等領(lǐng)域,低頻信號的監(jiān)測需求愈加重要。在這些場合下,選用具有廣泛頻率響應(yīng)范圍的動態(tài)應(yīng)變儀,可以確保對低頻應(yīng)變信號的精確采集。 對于低頻信號的采集,儀器的設(shè)計和外部環(huán)境也起著至關(guān)重要的作用。例如,信號的采樣率、儀器的抗噪性能以及信號處理的精度都會直接影響到低頻信號的準確度。因此,盡管某些動態(tài)應(yīng)變儀能夠支持低頻信號的采集,但在實際使用中,工程師仍需要根據(jù)具體的測量需求、儀器性能及測試環(huán)境來綜合考慮是否選擇該儀器。 結(jié)論 總體來看,動態(tài)應(yīng)變儀是否能夠采集低頻信號,取決于儀器的設(shè)計、頻率響應(yīng)范圍以及應(yīng)用場景。雖然傳統(tǒng)動態(tài)應(yīng)變儀主要用于中高頻信號的測量,但隨著技術(shù)的發(fā)展,越來越多的動態(tài)應(yīng)變儀能夠有效擴展其頻率響應(yīng)范圍,滿足低頻信號的采集需求。在實際應(yīng)用中,選擇合適的動態(tài)應(yīng)變儀需要根據(jù)測試目的、信號特性以及環(huán)境條件綜合考慮,從而保證數(shù)據(jù)的準確性和可靠性。
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- 2023-03-03 16:36:05熒光成像在血管神經(jīng)外科手術(shù)中的優(yōu)勢
- 熒光素和ICG熒光血管造影改變了血管神經(jīng)外科醫(yī)生的手術(shù)方式,它提供具有豐富信息的術(shù)中視圖。2021神經(jīng)可視化峰會是一個匯集quan球神經(jīng)外科醫(yī)生的特別活動,在此期間,A教授在一次家du網(wǎng)絡(luò)研討會上分享了他在熒光引導(dǎo)下的神經(jīng)外科手術(shù)經(jīng)驗,介紹了幾個臨床案例。學(xué)習(xí)要點了解熒光素鈉和ICG的歷史以及它們在血管神經(jīng)外科的首次應(yīng)用探討熒光技術(shù)在神經(jīng)外科的優(yōu)勢,及其如何為神經(jīng)外科醫(yī)生提供有價值的信息觀看熒光引導(dǎo)下的神經(jīng)外科手術(shù)視頻,包括動靜脈畸形(AVM)、搭橋和動脈瘤手術(shù)的臨床案例熒光成像在神經(jīng)外科的應(yīng)用:熒光素鈉和ICG的歷史及其首次應(yīng)用熒光素鈉自20世紀60年代末以來一直用于神經(jīng)外科,最初由醫(yī)生對其進行了描述,醫(yī)生在開顱時進行了硬膜外血管造影術(shù)。吲哚菁綠(ICG)在很久以后才被應(yīng)用于評估腦血流。它是由醫(yī)生在21世紀初引入的,并決定將這種廣泛應(yīng)用于眼科的技術(shù)轉(zhuǎn)移到神經(jīng)外科。ICGzui早用于神經(jīng)外科評估動脈瘤,并逐步應(yīng)用于幾種神經(jīng)外科病癥:評估旁路通透性、AVM手術(shù)、評估海綿狀血管瘤手術(shù)和神經(jīng)腫瘤學(xué)中靜脈引流異常。目前,腦熒光血管造影使用ICG的情況更為普遍。熒光造影引導(dǎo)下的神經(jīng)外科:熒光素鈉與ICG的優(yōu)缺點熒光素鈉視頻血管造影有一些優(yōu)勢,包括成本較低,精細細節(jié)的可視化,以及可以直接在顯微鏡下通過熒光過濾器進行觀察。ICG需要單獨的紅外攝像機,可以將信息顯示在不同的屏幕上。熒光素?zé)晒庖矠闊o牽開器手術(shù)提供了有用的價值,這與手術(shù)創(chuàng)傷的降低密切相關(guān)。熒光素鈉的另一個優(yōu)點是作為一種相對惰性的染料,急性毒性研究顯示盡管會誘發(fā)一些嚴重的過敏反應(yīng),但它對人類沒有特殊危害。此外,成本也非常低。熒光素鈉的缺點:它在血液中至少停留一小時,需要長時間等待后才能重復(fù)使用。ICG的半衰期為3至4分鐘,因此可以在短時間內(nèi)進行第二次或第三次注射。但在某些病人群體中,如對碘過敏的病人或甲狀腺功能亢進的病人,它是禁用的。而且它價格昂貴。熒光造影在動靜脈畸形(AVM)手術(shù)中的應(yīng)用在一名患有左額葉動靜脈畸形的患者中,選擇了對側(cè)入路,以避免優(yōu)勢半球,并更好地控制進料器。使用FL560術(shù)中熒光素?zé)晒饽K,可通過顯微鏡在手術(shù)野內(nèi)精確地顯示時間、給藥器、靜脈和AVM周圍的短血管,并具有清晰的對比度。但在使用ICG時,用戶必須查看另一個屏幕,而且無法看到AVM的周圍環(huán)境。必須通過從顯示器轉(zhuǎn)移到手術(shù)野來進行解釋。熒光素?zé)晒飧菀自谑中g(shù)野中直接識別供血血管,并將實質(zhì)圖像更好地可視化。圖1:用FL560熒光素?zé)晒饽K觀察AVM與用ICG觀察AVM。圖片由A教授提供。熒光造影在搭橋手術(shù)中的應(yīng)用在一例煙霧病患者中,施行了顳淺動脈-大腦中動脈搭橋術(shù)(STA-MCA)。熒光素鈉熒光對探索和檢查STA以及在手術(shù)野直接看到動脈的功能非常有用。這是了解搭橋手術(shù)工作方式的一種非常有效的技術(shù)。它提供了良好的血管和組織灌注的可視化,盡管厚壁血管不太明顯。圖2:在搭橋手術(shù)中使用FL560熒光素?zé)晒饽K。圖片由A教授提供。熒光造影在動脈瘤手術(shù)中的應(yīng)用在一名患有中動脈小動脈瘤的患者中,使用熒光素?zé)晒庵С謯A閉。造影劑有助于暴露動脈瘤,并在手術(shù)野中直接觀察到穿支及其灌注情況。使用ICG可能會忽略這一點,因為它需要查看另一個屏幕,且呈現(xiàn)的是黑白圖像。在熒光素?zé)晒庀?,閉塞的動脈瘤清晰可見。但由于動脈瘤手術(shù)往往很快,而且厚壁血管也不太明顯,所以無法進行重復(fù)使用。熒光素鈉可與ICG結(jié)合使用,兩者并不相互排斥。圖注:利用FL560熒光素?zé)晒饽K進行動脈瘤夾閉。圖片由A教授提供。綜上所述,熒光素視頻血管造影具有手術(shù)野三維可視化的優(yōu)勢,可以實時進行手術(shù)操作,尤其是對狹窄視野內(nèi)的小血管。此外,它的成本更低。熒光素血管造影的缺點是無法觀察到厚壁血管中的血流,而且染料在血液中停留的時間較長。ICG血管造影技術(shù)和熒光素血管造影技術(shù)為神經(jīng)外科醫(yī)生提供了重要優(yōu)勢。
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- 2022-06-23 14:13:21ibidi科普知識系列|血管生成實驗小常識
- 1、哪種細胞密度最適合我的實驗? 通常,我們建議每孔使用5,000-10,000個HUVEC。 但是,確定最佳細胞數(shù)對于使用μ-Slide血管生成從管形成測定中獲得最佳結(jié)果是至關(guān)重要。 細胞密度取決于細胞類型和細胞大小。 因此,在開始實際實驗之前,我們建議在非抑制條件下播種幾個細胞數(shù)并對管形成進行成像。 然后,對于最佳測定條件,使用在您的實驗中產(chǎn)生最多管數(shù)的細胞密度。請記住,細胞通常不會在凝膠基質(zhì)上增殖。請參閱:血管生成實驗實驗裝置優(yōu)化和數(shù)據(jù)分析 |ibidi μ-Slide 2、應(yīng)該在哪個時間段內(nèi)觀察細胞? 管形成的持續(xù)時間取決于細胞類型和所使用的細胞外基質(zhì),應(yīng)單獨確定。 通常,HUVEC在 2-4小時后已經(jīng)形成管。24小時后細胞開始發(fā)生凋亡,這導(dǎo)致從基質(zhì)中脫離和管破裂。請參閱:血管生成實驗實驗裝置優(yōu)化和數(shù)據(jù)分析 |ibidi μ-Slide 3、是否需要活細胞成像裝置來每小時拍攝管形成測定的照片? 非必須,通過顯微鏡對 μ-Slide 血管生成上的同一位置進行一致和精確的成像。 可以使用顯示 x/y 坐標的顯微鏡載物臺或自動載物臺來完成成像。 使用自動化平臺,可以將孔的所有位置(特別是每個孔的中心)保存到位置列表中,您可以在每個時間點訪問相應(yīng)的位置。 但是,使用完整的活細胞成像設(shè)置在顯微鏡上建立生理條件要方便得多。使用ibidi Stage Top 孵育系統(tǒng)等活細胞孵育裝置有助于在成像過程中提供穩(wěn)定溫度和濕度條件,從而在體外可以直接進行視頻拍攝。 4、是否可以使用 μ-Slide 血管生成在凝膠基質(zhì)內(nèi)培養(yǎng)細胞? 可以,μ-Slide 血管生成非常適合在精確定義的3D基質(zhì)中培養(yǎng)細胞。由于大界面的凝膠和頂部細胞培養(yǎng)基,凝膠中的條件可以通過更換上部儲液器中的介質(zhì)來調(diào)整?! ?、應(yīng)該在管形成實驗中使用含酚紅的凝膠還是不含酚紅的凝膠? 對于使用μ-Slide血管生成的管形成測定中的相差顯微鏡,酚紅不會干擾圖片,并且由于其顏色,處理更容易。然而,當使用熒光顯微鏡時,酚紅可能會干擾探頭的波長。在這種情況下,應(yīng)該使用無酚紅凝膠?! ?、是否需要將μ-Slide Angiogenesis血管生成載玻片放入培養(yǎng)箱的濕室中進行凝膠聚合? 我們建議將μ-Slide血管生成載玻片放入加濕腔中進行凝膠聚合。 雖然反應(yīng)室對于聚合本身不是必需的,但它可以最大限度地減少蒸發(fā)的影響。 在高流量孵化器中,防止蒸發(fā)的足夠百分比的濕度可能不會始終保持一致。 μ-Slide血管生成中的少量凝膠會很快變干,這會導(dǎo)致彎液面的形成。 7、胎牛血清 (FBS) / 胎牛血清 (FCS) 濃度是否會影響管形成實驗中的管形成和降解速率? 一般是的。 這取決于所使用的細胞類型或細胞系。 當提供濃度高達 10% FCS 的細胞培養(yǎng)基時,我們在 μ-Slide 血管生成中觀察到典型的原代細胞 (HUVEC) 管形成和 Matrigel? 上的幾種內(nèi)皮細胞系。 但是,我們建議分別優(yōu)化每個細胞系的 FBS/FCS 濃度?! ?、您是否推薦使用減少生長因子的 Matrigel? 進行管形成分析? 對于使用μ-Slide血管生成的管形成測定,我們使用了減少生長因子的 Matrigel? 和未減少的 Matrigel?。請參閱:腫瘤學(xué)必備 | 血管生成實驗介紹 9、我們希望使用減少了生長因子的 Matrigel? 和無血清培養(yǎng)基以及 50 ng/ml VEGF。 這足以刺激管的形成嗎? 可以,這種組合足以刺激ibidi血管生成實驗室器皿中的管形成,而培養(yǎng)基中沒有任何額外的生長因子?! ?0、除了 Matrigel? 之外,您在試管形成實驗中是否有使用其他凝膠的經(jīng)驗? 原則上,任何凝膠都可用于μ-Slide血管生成管形成實驗。 細胞可以附著在表面上是很重要的。 膠原蛋白、纖連蛋白和層粘連蛋白為細胞粘附提供了重要的結(jié)合基序。 11、什么是管形成實驗合適的陽性和陰性對照? 建議使用陽性和陰性對照來減少管形成實驗中的變量。陽性對照是預(yù)期細胞在其中形成血管的樣本(取決于實驗設(shè)置),從而向研究人員表明該實驗已正確進行。陰性對照是與所有其他樣品以相同方式處理的樣品,但預(yù)計不會顯示任何實驗結(jié)果(例如,很少或沒有管形成)?! bidi血管生成實驗室器皿中管形成實驗的最佳陽性和陰性對照很大程度上取決于所使用的細胞、凝膠基質(zhì)和一般實驗設(shè)置。因此,我們建議您查閱文獻,了解您感興趣的主題中成功使用的對照(陽性和陰性對照)。 在下文中,您可以找到管形成測定中陽性和陰性對照的可能方法: 如果需要分析特定化合物誘導(dǎo)血管生成的效力,則可以使用用已知血管生成誘導(dǎo)劑(例如 VEGF 或 FGF2)處理的樣品作為陽性對照。濃度很大程度上取決于細胞類型和實驗設(shè)置。 如果使用原代細胞,預(yù)篩選的內(nèi)皮細胞系(例如,HUVEC)在用特定生長因子處理后表現(xiàn)出明確的反應(yīng),可以作為陽性對照。 對于某些細胞類型,形成管的能力還取決于所使用的凝膠基質(zhì)。作為陽性對照,內(nèi)皮細胞應(yīng)在含有饑餓培養(yǎng)基(不含生長因子或血清的培養(yǎng)基)的生長因子減少的 Matrigel?上顯示管形成。如果需要測試促血管生成物質(zhì),則使用饑餓培養(yǎng)基尤其重要,因為大多數(shù)細胞培養(yǎng)基都添加了生長因子。為了分析物質(zhì)的真實效果,基質(zhì)和培養(yǎng)基都必須不含任何生長因子。作為陰性對照,細胞可以播種在不同的基質(zhì)(例如膠原蛋白 I)上,預(yù)計不會形成管狀?! 〔挥绊懠毎盍Φ墓苄纬梢种苿ɡ?,蘇拉明或蘿卜硫素)可用作陰性對照。如果實驗的目的是測試抗血管生成物質(zhì),則使用這種類型的抑制劑尤其重要?! ∪绻萌魏稳芙獾奈镔|(zhì)(例如,在 DMSO 或乙醇中)處理細胞,則僅使用溶劑作為陰性對照。 12、是否有用于分析管形成實驗的推薦染色方案? 一般來說,相差顯微鏡足以自動分析 μ-Slide血管生成中的標準管形成實驗。 但是,如果您想研究某種標記,您可以應(yīng)用您的標準方案(例如,用于免疫熒光染色),但要小心,以免損壞凝膠基質(zhì)或細胞網(wǎng)絡(luò)?! ∈褂胏alcein的染色方案示例可參閱:腫瘤學(xué)必備 | 血管生成實驗介紹 13、在開始實驗之前,我是否必須將 ibidi 血管生成實驗室器皿平衡到 37°C? 不,不需要平衡 μ-Slide 血管生成。 在室溫下儲存,可以立即用凝膠基質(zhì)填充。 由于μ-Slide 的開孔形式,加熱時從凝膠中逸出的氣體可以與大氣自由交換?! ?4、完成實驗后,μ-Slide Angiogenesis和μ-Plate Angiogenesis 96 Well可以重復(fù)使用嗎? 不可以,μ-Slide血管生成載玻片和μ-Plate血管生成96孔板是一次性耗材,僅供一次性使用。 15、μ-Slide 血管生成是否有96孔版的? 有。 μ-Plate血管生成96孔板具有與μ-Slide血管生成相同的“孔中孔”設(shè)計和凝膠體積 (10 μl)。 μ-Plate血管生成96孔可用作高通量管形成實驗的篩選板,具有完全的ANSI/SLAS (SBS) 和robotics兼容性。
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- 2022-11-03 10:04:33LS18平鋪光片顯微鏡成像案例—脂肪組織神經(jīng)和血管的3D重構(gòu)
- 脂肪組織在機體能量穩(wěn)態(tài)調(diào)控和體溫調(diào)節(jié)中發(fā)揮著重要的作用。脂肪組織由不同類型的脂肪細胞以及脂肪細胞前體、免疫細胞、成纖維細胞、血管和神經(jīng)投射物組成。目前分析脂肪組織的免疫組織化學(xué)和免疫熒光方法主要是基于對具有相對高倍率成像的薄切片。然而,這種方法存在著明顯的局限性。首先,復(fù)雜的絲狀結(jié)構(gòu),如交感神經(jīng)和脈管系統(tǒng),已知在脂肪功能中起著重要的作用,薄切片僅捕獲一小部分組織,這可能導(dǎo)致結(jié)論因分析的組織部分不同而產(chǎn)生差異,很難通過薄切片進行評估。其次,由于脂肪組織獨特的無定形形態(tài)特征,很難僅根據(jù)切片染色來評估脂肪組織的三維結(jié)構(gòu)。鑒于這些因素,非常需要一種可提供整個脂肪組織的三維可視化并且保持高分辨率的方法。 锘海生命科學(xué)自主研發(fā)的平鋪光片顯微鏡具有三維成像速度快、對比度高、低光毒性、低光漂白等諸多優(yōu)點。此外,依托于顯微鏡測樣服務(wù)工作積累的豐富的組織透明化、組織免疫熒光染色及成像經(jīng)驗,锘海生命科學(xué)自主研發(fā)出了快速高效的锘海組織透明化試劑盒,大大提高樣本組織透明化的效率,為廣大科研工作者提供一套更為專業(yè)、完整的服務(wù)解決方案! 我們使用TH對脂肪組織的神經(jīng)進行標記,如下圖1、2所示,為小鼠附睪脂肪神經(jīng)成像3D重構(gòu)結(jié)果。該脂肪組織大小為6.0x8.5x2.5 mm,成像分辨率為橫向4 μm,縱向10 μm,成像時長僅4分鐘。圖1 小鼠附睪脂肪組織神經(jīng)成像圖2 小鼠附睪脂肪組織神經(jīng)成像(局部圖)我們使用SM22對脂肪組織的大血管進行標記,如下圖3、4所示,為小鼠附睪脂肪組織大血管成像3D重構(gòu)結(jié)果。該脂肪組織大小為6.0x8.5x4.0 mm,成像分辨率為橫向2 μm,縱向10 μm,成像時長僅10分鐘。圖3 小鼠附睪脂肪組織大血管成像圖4 小鼠附睪脂肪組織大血管成像(局部圖)參考文獻:[1] Chi J, Crane A, Wu Z, Cohen P. Adipo-Clear: A Tissue Clearing Method for Three-Dimensional Imaging of Adipose Tissue. J Vis Exp. 2018 Jul 28;(137):58271. doi: 10.3791/58271. PMID: 30102289; PMCID: PMC6126572.[2] Wang P, Loh KH, Wu M, Morgan DA, Schneeberger M, Yu X, Chi J, Kosse C, Kim D, Rahmouni K, Cohen P, Friedman J. A leptin-BDNF pathway regulating sympathetic innervation of adipose tissue. Nature. 2020 Jul;583(7818):839-844. doi: 10.1038/s41586-020-2527-y. Epub 2020 Jul 22. PMID: 32699414.
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- 2022-02-24 09:44:46牛血管緊張素II(AngII)ELISA試劑盒使用說明書
- 本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。牛血管緊張素II(AngII)ELISA試劑盒使用說明書【牛血管緊張素II(AngII)ELISA試劑盒 試劑盒名稱】牛血管緊張素II(AngII)ELISA試劑盒【牛血管緊張素II(AngII)ELISA試劑盒 試劑盒用途】定量牛血清、血漿及相關(guān)液體樣本中血管緊張素II(AngII)的含量【牛血管緊張素II(AngII)ELISA試劑盒檢測原理】本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。將標準品、待測樣本加入到預(yù)先包被血管緊張素II(AngII)透明酶標包被板中,溫育足夠時間后,洗滌除去未結(jié)合的成分,再加入酶標工作液,溫育足夠時間后,洗滌除去未結(jié)合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下轉(zhuǎn)化為藍色產(chǎn)物,在酸的作用下變成黃色,顏色的深淺與樣品中血管緊張素II(AngII)濃度呈正相關(guān),450nm波長下測定OD值,根據(jù)標準品和樣品的OD值,計算樣本中血管緊張素II(AngII)含量。【牛血管緊張素II(AngII)ELISA試劑盒 試劑盒組成】1酶標包被板12孔×8條7底物夜A6mL2標準品:200ng/ml0.6mL8底物夜B6mL320倍濃縮洗滌液20mL9終止液6mL4標準品稀釋液6mL10說明書1份5樣本稀釋液6mL11封板膜1張6酶標試劑6mL12密封袋1個備注:標準品用標準品稀釋液依次稀釋為:200、100、50、25、12.5、6.25ng/ml【牛血管緊張素II(AngII)ELISA試劑盒需要而未提供的試劑和器材】1、37℃恒溫箱標準規(guī)格酶標儀精密移液器及一次性吸頭蒸餾水一次性試管吸水紙【牛血管緊張素II(AngII)ELISA試劑盒操作步驟】1、準備:從冰箱取出試劑盒,室溫復(fù)溫平衡30分鐘。2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。3、加標準品和待測樣本:取足夠數(shù)量的酶標包被板,固定于框架上,分別設(shè)置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔,記錄各孔位置,在標準品孔中加入標準品50μL;待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);空白對照孔不加。4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。6、加酶標工作液:每孔加入酶標工作液50μL,空白對照孔不加。7、溫育:重復(fù)4的操作。8、洗板:重復(fù)5的操作。9、顯色:每孔先加入顯色劑A 液50μL,再加入顯色劑B液 50μL,37℃避光顯色15min。10、終止:取出酶標板,每孔加終止液50μL,終止反應(yīng)(顏色由藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11、測定:以空白孔調(diào)零,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。12、計算:根據(jù)標準品的濃度及對應(yīng)的OD值,計算出標準曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度,也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。最終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)。【牛血管緊張素II(AngII)ELISA試劑盒 樣本要求】1、樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因為疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的抑制劑。2、標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能立即試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3、樣本應(yīng)充分離心,不得有溶血及顆粒?!九Q芫o張素II(AngII)ELISA試劑盒注意事項】1、實驗嚴格按照說明書的操作進行,實驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。2、酶標包被板開封后如未用完,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。3、建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差。4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍,計算結(jié)果乘以5才是樣本實際濃度。5、本試劑盒定量范圍為0.1-200ng/ml,超過此范圍,為標準曲線延伸計算所得,不做為準確定量結(jié)果,請用特殊稀釋液稀釋后測定準確結(jié)果(0.1-200ng/ml范圍內(nèi)),乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本最終濃度。6、若顯色過淺,可適當延長底物溫育時間。7、為避免交叉污染,標準品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭;酶標工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微孔;不得重復(fù)使用封板膜。8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,不同批號的試劑不得混用。9、底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下?!九Q芫o張素II(AngII)ELISA試劑盒操作程序總結(jié)】
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