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2025-01-10 17:05:48組織病理學(xué): 組織病理學(xué)是研究組織疾病發(fā)生、發(fā)展規(guī)律及其形態(tài)學(xué)改變的學(xué)科，主要通過顯微鏡觀察組織切片，對(duì)疾病進(jìn)行診斷和鑒別診斷。它涉及組織細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、功能及代謝等方面的變化，是病理學(xué)的重要分支。在臨床中，組織病理學(xué)對(duì)于明確腫瘤性質(zhì)、判斷預(yù)后、指導(dǎo)治療等方面具有重要意義。此外，它還在科研領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用，幫助科研人員深入了解疾病的發(fā)病機(jī)制。

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Milli-Q? 講堂 | 純水應(yīng)用篇（三）：如何為組織病理學(xué)選擇符合要求的用水

許多組織學(xué)和細(xì)胞學(xué)應(yīng)用都離不開水。水是許多試劑、染色劑、緩沖液和洗滌液的主要成分，同時(shí)也廣泛應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)室儀器（染色、組織處理等）中。選擇合適的水質(zhì)可以有益于染色穩(wěn)定性和可重現(xiàn)性。

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2022-08-10
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2021-06-02
卒中術(shù)后腦組織病理學(xué)評(píng)估 - TTC染色

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2020-04-03

組織病理學(xué)文章

卒中術(shù)后腦組織病理學(xué)評(píng)估 - H&E染色

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2020-04-11

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組織病理學(xué)問答

2020-04-03 09:08:22卒中術(shù)后腦組織病理學(xué)評(píng)估 - TTC染色: 本文節(jié)選自《實(shí)驗(yàn)卒中手術(shù)學(xué)》主編：楊國源書號(hào)：ISBN 978-7-5046-6264-4/R·1648氯化三苯基四氮唑（TTC）染色氯化三苯基四氮唑TTC（2，3，5-triphenyltetrazolium chloride）染色是一種定量檢測(cè)腦梗塞體積的迅速、方便、便宜、可靠的方法，它是一種用于評(píng)價(jià)組織內(nèi)脫氫酶活性的標(biāo)準(zhǔn)染色方法。大腦切成2毫米的切片后，放入2%TTC溶液中，TTC能與正常線粒體氧化酶系統(tǒng)發(fā)生反應(yīng)而降解成深紅色，而梗塞部位受損以致線粒體缺乏降解TTC的酶的能力而不會(huì)被TTC染色，呈現(xiàn)白色，使得受損組織與正常組織極易區(qū)分開來。目前，很多學(xué)者釆用TTC染色標(biāo)記腦組織缺血性損傷，計(jì)算腦梗死灶體積。該方法能清楚地區(qū)分正常腦組織和梗死腦組織的界線，但要求實(shí)驗(yàn)者在取材時(shí)要速度快，在極短時(shí)間內(nèi)將組織投入TTC溶液中。組織中斷血供時(shí)間過長，會(huì)造成新的損傷區(qū)域，致使測(cè)量出現(xiàn)較大誤差，甚至組織完全不能染色。剝離和切片時(shí)應(yīng)十分注意。因?yàn)槟X組織十分脆軟，容易出現(xiàn)碎裂，給測(cè)量帶來不便（如下圖所示）。MCAO術(shù)后TTC染色白色為梗塞部位；深紅色為正常部位一、實(shí)驗(yàn)材料 1.TTC溶液。 2.磷酸鹽緩沖液。 3.刀片。 4.大腦模具。 5.培養(yǎng)皿。 6.載玻片。 7.4%多聚甲醛。二、TTC染色過程 1.動(dòng)物處死后，取腦并且小心地浸入低溫磷酸鹽緩沖液中。這樣使大腦更加堅(jiān)硬，方便切片。 2.用刀片把大腦切成2毫米厚片。 3.切片時(shí)要小心，因?yàn)槟X組織容易粘在刀片上。為了防止損傷，刀片先浸入2%TTC溶液中。TTC溶液對(duì)光和熱敏感，在不使用的時(shí)候要用鋁箔包好。切好的腦片放入TTC溶液中進(jìn)行染色并且持續(xù)觀察顏色的改變?？梢约訜崾惯@個(gè)過程變快，比如放入37℃的培養(yǎng)箱。 4.當(dāng)腦片表面開始變成粉紅色，翻轉(zhuǎn)腦片。染上色的是具有活性的腦組織。梗塞的部分由于線粒體失活，所以不能被染色，仍然為白色。 5.當(dāng)腦片變成紅色，反應(yīng)結(jié)束，用磷酸鹽緩沖液洗去TTC溶液。 6.腦片要進(jìn)行拍照，來確定梗塞量。也可以把腦片放入多聚甲醛中過夜進(jìn)行固定。這樣拍照更加方便。此步一定要注意避光，否則染色還會(huì)褪色。三、應(yīng)用TTC檢測(cè)的注意點(diǎn) 1.TTC染色是計(jì)算梗塞量的標(biāo)準(zhǔn)方法。 2.TTC溶液對(duì)光敏感，因此要避光保存。 3.染色前是否進(jìn)行磷酸鹽緩沖液灌注不影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。文末福利掃描下方二維碼，申請(qǐng)SYRFLSI Ⅲ激光散斑血流成像系統(tǒng)，造模完畢即可檢測(cè)造模效果，點(diǎn)擊查看大腦中動(dòng)脈缺血模型的操作步驟。提交申請(qǐng)后7個(gè)工作日內(nèi)我們的工作人員會(huì)與您聯(lián)系

2020-04-11 09:15:37卒中術(shù)后腦組織病理學(xué)評(píng)估 - H&E染色: 本文節(jié)選自《實(shí)驗(yàn)卒中手術(shù)學(xué)》主編：楊國源書號(hào)：ISBN 978-7-5046-6264-4/R·16481.冰凍切片蘇木素伊紅染色1、將4%多聚甲醛灌注后的大腦，用冰凍切片機(jī)切片，厚度為10~40微米。2、將腦片貼在載玻片上，并且吹干過夜。3、將腦片脫脂（若是腦組織直接冰凍，則不需要脫脂）：（a）將腦片浸沒在氯仿和乙醇混合物中至少1小時(shí)。（b）將腦片分別在、95%、70%和50%的乙醇中各浸泡5分鐘，然后用蒸餾水沖洗。注意：必須等到片子完全干燥（沒有水滴）。如果腦片是幾天前準(zhǔn)備的，在染色之前必須放到蒸餾水中浸泡5分鐘。4、染色步驟：（a）將蘇木素滴在腦片上，染色20~25分鐘。整個(gè)過程用眼睛或顯微鏡觀察，保證細(xì)胞核變藍(lán)。（b）用蒸餾水洗2次。（c）用0.25%的氨水溶液輕輕沖洗約10秒。（d）用蒸餾水洗2次。（e）用伊紅染色10秒（f）用蒸餾水洗2次。（g）用70%、80%、90%、95%、的乙醇脫水1次，每次3分鐘。（h）用乙醇與二甲苯混合液脫水3分鐘。（i）用二甲苯處理5分鐘（j）滴2~3滴封片劑，用蓋玻片封住腦片，準(zhǔn)備在顯微鏡下觀察。2.石蠟切片的蘇木素-伊紅染色1、修剪組織：如果大腦固定在4%6的多聚甲醛里，那么修剪組織必須在通風(fēng)櫥里進(jìn)行。去除小腦和嗅球部分。大腦用水沖洗干凈，冠狀切片切成3份。組織放在生理鹽水中。2、處理以及石蠟包埋：在自動(dòng)包埋機(jī)上進(jìn)行包埋。金屬盒放在機(jī)器中過夜。組織進(jìn)行梯度脫水，并用石蠟進(jìn)行包埋。3、組織包埋的步驟: （a）加熱溫度控制在59~61℃；（b）樣品控制臺(tái)溫度在59~61℃；（c）冷凍臺(tái)溫度為5℃；（d）組織轉(zhuǎn)移到加熱臺(tái)上，浸在石蠟中，然后移至樣品控制臺(tái)。注意：不要把樣品放反了，同時(shí)要保持它們的方向一致。把鐵塊放在冷凍臺(tái)上，冷卻20分鐘。4、室溫下在切片機(jī)上切片：（a）水浴溫度控制在45~50℃。（b）石蠟組織放在冰水混合物中。（c）室溫下設(shè)置好切片機(jī)。（d）45℃，吹干載玻片20分鐘。（e）蠟塊固定在切片機(jī)上，修整蠟塊表面，直至大腦組織出現(xiàn)。（f）切片，厚度可根據(jù)試驗(yàn)要求，切成4~10微米。（g）腦片轉(zhuǎn)移到水浴中，然后貼在載玻片上。5、預(yù)染：載玻片在60℃的烘箱中烤片15分鐘，融化石蠟，使乙醇揮發(fā)。注意用架子架住載玻片。6、HE染色：可以自動(dòng)也可以手動(dòng)進(jìn)行。1）自動(dòng)：染色在染色機(jī)中進(jìn)行，依次用以下溶液處理：（a）3次二甲苯；（b）2次乙醇；（c）2次95%乙醇；（d）蘇木素染色；（e）2次95%乙醇；（1）70%乙醇；（g）伊紅染色；（h）70%乙醇；（i）3次二甲苯。2）手動(dòng)：每一步驟約1~2分鐘，整個(gè)過程需要25~30分鐘。載玻片放入盒子中，滴2~3滴封片劑，然后用蓋玻片小心地蓋在上面。① 注意事項(xiàng)：（a）封片前片子不要干燥，封片劑將地封住腦片；（b）在完全干燥之前保證片子平整；（c）在顯微鏡下觀察片子的染色效果。例如：如果組織在冰盒中的浸泡時(shí)間不足夠長，組織看起來會(huì)有皺褶。如果漂片溫度太高，片子會(huì)碎，如果溫度太低，片子不能漂浮。② 手動(dòng)的HE染色方法：（a）3次二甲苯，每次2分鐘，脫去脂肪和蠟；（b）乙醇，每片10滴；（c）95%乙醇，2次，每片10滴；（d）蒸餾水洗；（e）蘇木素染色15分鐘；（f）蒸餾水洗2次；（g）0.25%氨水洗，直至組織變藍(lán)；（h）蒸餾水洗2次；（i）0.5%的伊紅染色，每片10~20滴；（j）95%乙醇，洗2次，每片10~15滴；（k）乙醇，每片10滴；（l）3次二甲苯，每片10滴。蘇木素伊紅染色后細(xì)胞核呈藍(lán)色，細(xì)胞質(zhì)呈粉紅色或紅色。如下圖所示：文末福利掃描下方二維碼，申請(qǐng)SYRFLSI Ⅲ激光散斑血流成像系統(tǒng)，造模完畢即可檢測(cè)造模效果。點(diǎn)擊查看大腦中動(dòng)脈缺血模型的操作步驟。提交申請(qǐng)后7個(gè)工作日內(nèi)我們的工作人員會(huì)與您聯(lián)系

2023-03-24 14:29:50南京試劑組織女工揚(yáng)州游園賞春活動(dòng): 邗溝春水碧如油,到處春風(fēng)足逗留。煙花三月，正是下?lián)P州好時(shí)節(jié)。時(shí)值“3.8婦女節(jié)”來臨之際，南京試劑組織女工80余人前往揚(yáng)州瘦西湖、東關(guān)街等地游園賞春活動(dòng)。 4日上午9時(shí)許，女工們揣著驛動(dòng)的心乘車抵達(dá)揚(yáng)州，第一站便是瘦西湖。清代錢塘詩人汪沆有詩云：“垂楊不斷接殘蕪，雁齒虹橋儼畫圖。也是銷金一鍋?zhàn)?，故?yīng)喚作瘦西湖?！笔菸骱纱说妹?。瘦西湖清瘦狹長，長十余里，猶如一幅山水畫卷。女工們跟隨導(dǎo)游的步伐，沿湖行走，路過冶春、綠楊村、紅園、西園曲水等景點(diǎn)，途經(jīng)大虹橋、長堤春柳，再到徐園、小金山、釣魚臺(tái)、蓮性寺、白塔、鳧莊、五亭橋，然后向北至蜀崗平山堂、觀音山。瘦西湖公園內(nèi)柳樹吐綠，梅花、桃花競(jìng)相開放，呈現(xiàn)出桃紅柳綠的春日美景，讓我們體驗(yàn)了一場(chǎng)與春風(fēng)作伴、赴賞花之約的視覺盛宴。旖旎多姿的園林風(fēng)光，獨(dú)特別致的風(fēng)景建筑接踵而至，令人目不暇接，女工們既見了早春佳景，又賞園林風(fēng)光，正所謂“ 兩岸花柳全依水，一路樓臺(tái)直到山”。中午時(shí)分，在品嘗了揚(yáng)州特色美食后，踏青隊(duì)伍再次出發(fā)前往揚(yáng)州最具有代表性的一條歷史老街——東關(guān)街。東關(guān)街位于揚(yáng)州市中心，全長1100余米，由一塊塊石板鋪成主街，走在路上，不時(shí)能看到青磚灰瓦的鹽商大院。街上琳瑯滿目的小商鋪將當(dāng)?shù)靥厣朗撑c特產(chǎn)小玩意集中于此，實(shí)在是讓人目不暇接。街上游人熙熙攘攘、摩肩接踵，讓人感受到鮮活的人氣和江南煙火喧然之感。春景賞不盡，轉(zhuǎn)眼是歸程?？鞓返臅r(shí)光總是短暫，不經(jīng)意間一天的行程接近尾聲。大家胸中藏著瘦西湖的亭臺(tái)樓閣湖光山景，身上帶著揚(yáng)州古街的濃濃的煙火人情，懷著愉悅的心情踏上了新的工作生活之旅。

2023-02-13 10:39:43組織透明化與點(diǎn)擊化學(xué)相結(jié)合的新技術(shù)CATCH: 在完整組織中觀察藥物靶點(diǎn)相互作用的工具一直是理解體內(nèi)藥物作用的主要障礙。2022年發(fā)表在Cell上的題為“Insitu identification of cellular drug targets in mammalian tissue”的文章有突破性進(jìn)展，作者通過修改和整合點(diǎn)擊化學(xué)（CC）與組織透明化技術(shù)，開發(fā)了一種方法——透明輔助組織點(diǎn)擊化學(xué)（Clearing-Assisted Tissue Click Chemistry，簡(jiǎn)稱CATCH），允許小分子藥物-靶點(diǎn)相互作用在亞細(xì)胞分辨率下進(jìn)行標(biāo)記和成像(圖1A)。該技術(shù)為組織中小分子的體內(nèi)相互作用可視化提供了一個(gè)有價(jià)值的平臺(tái)，并能夠識(shí)別藥物在哺乳動(dòng)物組織中的分布和參與。圖1 CATCH技術(shù)的方法開發(fā)1.組織透明化極大地改善了哺乳動(dòng)物組織中的化學(xué)標(biāo)記作者對(duì)小鼠給藥脂肪酸酰胺水解酶（FAAH）緩聚劑PF7845-yne（末端含炔基），通過CuAAC點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)，炔基與熒光標(biāo)簽的疊氮化物反應(yīng)形成疊氮炔環(huán)，進(jìn)而引入熒光基團(tuán)。初始試圖直接成像藥物結(jié)合的FAAH，但由于信噪比較差，未能顯示細(xì)胞靶標(biāo)。因而猜測(cè)腦組織構(gòu)成復(fù)雜，其致密的脂膜可能影響點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)，作者測(cè)試了基于聚丙烯酰胺的水凝膠組織透明化方法CLARITY，結(jié)果發(fā)現(xiàn)去除脂質(zhì)后顯著提升了成像的信噪比（圖1C、D）。作者同時(shí)也驗(yàn)證了其他的透明化方法也得到了類似的效果（圖1E）。此外，作者還比較了不同的點(diǎn)擊化學(xué)配體（TBTA，BTTAA，BTTP）及不同的銅離子濃度下的反應(yīng)效率，發(fā)現(xiàn)使用BTTP，150 μM硫酸銅條件下可獲得高信噪比且穩(wěn)定的成像（圖1B）。2.CATCH實(shí)現(xiàn)了藥物-靶點(diǎn)接觸的全腦、亞細(xì)胞原位成像為了驗(yàn)證CATCH應(yīng)用的廣泛性，作者對(duì)三種小分子藥物FAAH緩聚劑PF7845-yne、BIA10-2474-yne和單胺氧化酶（MAO）緩聚劑Pargyline-yne進(jìn)行CATCH成像，結(jié)果清晰展示了藥物-靶點(diǎn)在小鼠不同腦區(qū)的分布（圖2A-E）。另外，還可以展示這些分子主要靶向的細(xì)胞類型，F(xiàn)AAH緩聚劑主要靶向新皮質(zhì)和海馬中的神經(jīng)元樣結(jié)構(gòu);而Pargyline-yne主要結(jié)合全腦的血管樣結(jié)構(gòu)，少量下丘腦和腦橋內(nèi)稀疏但特異標(biāo)記的神經(jīng)元樣結(jié)構(gòu)（圖2F）。圖2 全腦藥物結(jié)合的可視化2.CATCH可與熒光標(biāo)記復(fù)合以識(shí)別靶細(xì)胞類型作者在給藥處理后進(jìn)行NeuN免疫染色，發(fā)現(xiàn)PF7845-yne和BIA10-2474-yne主要與新皮質(zhì)、海馬和杏仁核中的NeuN+神經(jīng)元共定位。而在腦橋中發(fā)現(xiàn)了一小群神經(jīng)元樣結(jié)構(gòu)，它們是NeuN陰性但被 pargyline-yne 靶向的（圖3A-D）。隨后作者洗脫NeuN并重新孵育TH抗體驗(yàn)證該推測(cè)，確定了NeuN-，Pargyline-yne陽性的細(xì)胞的確是LC-NA神經(jīng)元（圖3E）。由此證明，CATCH可以和熒光標(biāo)記結(jié)合揭示了藥物結(jié)合的細(xì)胞類型，并且可以區(qū)分神經(jīng)元不同部分的藥物靶標(biāo)參與位點(diǎn)，可以支持多輪的藥物靶向細(xì)胞類型鑒定。圖3 藥物靶點(diǎn)的細(xì)胞型鑒定锘海團(tuán)隊(duì)自主研發(fā)的組織透明化試劑盒可以高效地進(jìn)行脫色脫脂，采用親水性溫和環(huán)境的設(shè)計(jì)，在組織熒光保護(hù)、樣本形態(tài)維持、降低自發(fā)熒光等方面表現(xiàn)出比較優(yōu)異的性能，適用范圍廣、操作簡(jiǎn)便、速度快、效率高。

2022-04-11 13:18:17病理學(xué)成像何須動(dòng)手？明美大體成像儀讓標(biāo)本拍攝更簡(jiǎn)單: 病理學(xué)成像何須動(dòng)手？明美大體成像儀ME40讓標(biāo)本拍攝更簡(jiǎn)單在病理學(xué)中，大體標(biāo)本的制作和拍攝是很常規(guī)又麻煩的工作，因?yàn)樘幚順?biāo)本容易弄臟手，不好操作成像設(shè)備對(duì)焦和拍攝。針對(duì)大體標(biāo)本拍攝需求，明美推出了大體成像儀ME40，不僅能自動(dòng)對(duì)焦，還能不動(dòng)手實(shí)現(xiàn)放大和拍照，解放雙手，讓大標(biāo)本拍攝更簡(jiǎn)單方便。大體成像儀ME40簡(jiǎn)介大體成像儀ME40明美大體成像儀ME40是專門針對(duì)大體標(biāo)本拍攝開發(fā)的成像系統(tǒng)，主體為800萬像素自動(dòng)對(duì)焦相機(jī)，能提供10倍光學(xué)變焦放大和超大景深，采用高性能DSP芯片搭配ISP算法技術(shù)，成像速度快，圖像清晰，細(xì)節(jié)豐富，顏色還原準(zhǔn)確，成像性能扎實(shí)。標(biāo)配伸縮架和成像圖大體成像儀ME40標(biāo)配抗酸堿超耐磨底座，自帶標(biāo)尺和伸縮架，可安裝支架燈，以便自主調(diào)節(jié)燈光的角度和相機(jī)的高度，實(shí)現(xiàn)更理想的成像效果。更適合病理取材臺(tái)的吸盤支架大吸力金屬吸盤支架除了標(biāo)準(zhǔn)的底座式安裝，大體成像儀ME40還可以選配大吸力金屬吸盤支架，可以非常靈活而牢固地吸附在取材臺(tái)的不銹鋼面上，節(jié)省臺(tái)面的處理空間，也減少設(shè)備清潔的麻煩。解放雙手的三鍵腳踏開關(guān)三鍵腳踏開關(guān)為了進(jìn)一步解放雙手進(jìn)行標(biāo)本操作，大體成像儀ME40配備三鍵腳踏開關(guān)，連接裝有驅(qū)動(dòng)軟件的電腦后，可以通過腳踏實(shí)現(xiàn)光學(xué)變焦放大、縮小以及拍照，圖像可以直接在電腦上預(yù)覽、儲(chǔ)存和測(cè)量。大體成像儀ME40大體成像儀ME40成像速度快，圖像清晰，色彩準(zhǔn)確，性能滿足病理學(xué)大體標(biāo)本拍攝、錄像等需要，而自動(dòng)對(duì)焦、吸盤萬向支架和三鍵腳踏開關(guān)，則在易用性方面帶來了很多優(yōu)勢(shì)，目前在大體標(biāo)本拍攝、法醫(yī)物證、古玩鑒定、防偽檢測(cè)和工業(yè)維修方面都有所應(yīng)用。如果您對(duì)大體成像儀ME40感興趣，歡迎咨詢，我們將竭誠為您服務(wù)！來源：https://www.mshot.com/article/1401.html