- 2025-01-10 10:50:43疫苗超低溫保存箱
- 疫苗超低溫保存箱是醫(yī)療和公共衛(wèi)生領(lǐng)域常用的設(shè)備,其基本功能在于提供超低溫度環(huán)境,專門用于儲(chǔ)存疫苗等生物制品。該設(shè)備能夠確保疫苗在超低溫條件下保存,從而維持其效力和安全性,延長(zhǎng)使用期限。疫苗超低溫保存箱廣泛應(yīng)用于疾控中心、醫(yī)院、診所及疫苗接種點(diǎn)等場(chǎng)合,具有溫度控制精確、制冷效果好、儲(chǔ)存空間合理等特點(diǎn),是保障疫苗接種工作順利進(jìn)行的重要設(shè)備。
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疫苗超低溫保存箱問(wèn)答
- 2025-01-08 12:30:13煙密度測(cè)試箱多少錢
- 煙密度測(cè)試箱多少錢:分析市場(chǎng)價(jià)格與購(gòu)買建議 在現(xiàn)代工業(yè)中,煙密度測(cè)試箱廣泛應(yīng)用于煙氣排放監(jiān)測(cè)、環(huán)境保護(hù)、以及設(shè)備維護(hù)等多個(gè)領(lǐng)域。對(duì)于許多企業(yè)而言,選擇合適的煙密度測(cè)試箱不僅僅是為了確保測(cè)試結(jié)果的準(zhǔn)確性,同時(shí)也需要考慮成本因素。因此,了解煙密度測(cè)試箱的價(jià)格、購(gòu)買途徑及其影響因素,成為了企業(yè)采購(gòu)決策中的關(guān)鍵一環(huán)。本文將詳細(xì)探討煙密度測(cè)試箱的市場(chǎng)價(jià)格區(qū)間,影響價(jià)格的主要因素,以及如何選擇適合自己需求的設(shè)備。 煙密度測(cè)試箱的市場(chǎng)價(jià)格范圍 煙密度測(cè)試箱的價(jià)格因品牌、功能、規(guī)格以及所使用的技術(shù)不同而有所差異。一般來(lái)說(shuō),市場(chǎng)上煙密度測(cè)試箱的價(jià)格從幾千元到上萬(wàn)元不等。低端入門級(jí)設(shè)備價(jià)格大致在3000元至6000元之間,適合一些小型企業(yè)或預(yù)算有限的單位。中高端產(chǎn)品,尤其是那些具有更多測(cè)量功能和更高精度的設(shè)備,其價(jià)格則可能達(dá)到10000元以上。 煙密度測(cè)試箱的價(jià)格還受到多個(gè)外部因素的影響,包括設(shè)備的測(cè)量范圍、自動(dòng)化程度、是否符合新的環(huán)保標(biāo)準(zhǔn)等。通常,具有更多高端技術(shù)配置和功能的產(chǎn)品,其價(jià)格會(huì)較為昂貴,但能提供更高的測(cè)試精度和更多的測(cè)試數(shù)據(jù)分析功能。 影響煙密度測(cè)試箱價(jià)格的因素 品牌影響力 市場(chǎng)上的煙密度測(cè)試箱品牌眾多,不同品牌的設(shè)備質(zhì)量和技術(shù)水平有所不同。知名品牌通常能夠提供更好的售后服務(wù)和技術(shù)支持,因此它們的產(chǎn)品價(jià)格較高。 技術(shù)參數(shù)和功能 煙密度測(cè)試箱的測(cè)試精度、檢測(cè)速度、測(cè)量范圍等技術(shù)參數(shù)對(duì)其價(jià)格有直接影響。例如,具有更高測(cè)量精度的測(cè)試箱,能夠滿足更為嚴(yán)格的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn),價(jià)格自然較高。 材料與制造工藝 一些高端煙密度測(cè)試箱采用了更為精密和耐用的材料,同時(shí)在制造過(guò)程中可能使用了更高端的工藝。這些因素也會(huì)增加生產(chǎn)成本,進(jìn)而影響產(chǎn)品價(jià)格。 售后服務(wù)和保修政策 優(yōu)質(zhì)的售后服務(wù)和長(zhǎng)時(shí)間的保修期往往是用戶選擇高價(jià)設(shè)備的重要因素。這些服務(wù)保障可以有效提升設(shè)備使用的長(zhǎng)期價(jià)值,尤其適合對(duì)設(shè)備穩(wěn)定性和使用效率有較高要求的行業(yè)。 如何選擇適合的煙密度測(cè)試箱 在選擇煙密度測(cè)試箱時(shí),除了關(guān)注價(jià)格外,還應(yīng)根據(jù)自身的使用需求來(lái)評(píng)估設(shè)備的性能與功能。首先要確定測(cè)試的煙氣類型和濃度范圍,以確保所選設(shè)備能夠滿足檢測(cè)要求。考慮設(shè)備的自動(dòng)化程度和操作簡(jiǎn)便性,這對(duì)于提高工作效率和減少人工操作失誤至關(guān)重要。建議選擇有良好售后支持的品牌,以便在設(shè)備出現(xiàn)問(wèn)題時(shí)能夠及時(shí)解決。 結(jié)論 綜合來(lái)看,煙密度測(cè)試箱的價(jià)格因品牌、技術(shù)功能、制造工藝等多種因素而有所差異。在購(gòu)買時(shí),除了關(guān)注價(jià)格外,更應(yīng)重視設(shè)備的性能、穩(wěn)定性及其售后服務(wù)。通過(guò)合理的選擇和預(yù)算規(guī)劃,企業(yè)能夠在確保檢測(cè)精度的也能獲得具有成本效益的設(shè)備。
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- 2023-05-26 09:34:24如何確保疫苗安全有效?
- 疫苗Vaccine疫苗有過(guò)負(fù) 面報(bào)道,但是國(guó)產(chǎn)新冠疫苗遠(yuǎn)銷海內(nèi)外,三年疫苗接種老少男女上億人次,事實(shí)證明,國(guó)產(chǎn)疫苗能浴火重生、安全可靠。1、如何確保防疫針劑有效和安全?藥理有效性需要通過(guò)液相質(zhì)譜儀等儀器查驗(yàn)。2、如何確保疫苗針劑的西林瓶密封無(wú)破損?在歐洲、美國(guó)和印度制藥廠都采用雙光源X射線檢測(cè),特別是凍干粉針劑無(wú)法通過(guò)燈檢來(lái)檢出西林瓶中的碎玻璃。Thermo Scientific? Xpert? 側(cè)射型 X 射線檢查系統(tǒng)3、如何保證注射的劑量是安全和有效呢? 為什么有的孩子注射后會(huì)有不良反應(yīng)? 是否超過(guò)安全劑量?生產(chǎn)疫苗制劑已經(jīng)采用全自動(dòng)生產(chǎn)流水線,凍干粉和水針劑都采用自動(dòng)灌裝,灌裝后的劑量檢測(cè)是采用動(dòng)態(tài)檢重秤設(shè)備,一般疫苗要求控制重量誤差為10至30毫克;而傳統(tǒng)檢重秤稱量臺(tái)帶有電機(jī)、軸承和滾軸會(huì)產(chǎn)生振動(dòng)影響稱量,無(wú)法保證一年后動(dòng)態(tài)稱量精度達(dá)到10-30毫克,如同汽車開(kāi)了一年需要保養(yǎng)才能上路,五年后的保養(yǎng)成本會(huì)越來(lái)越高,而且不能達(dá)到新車狀態(tài)。核心技術(shù)Core technology賽默飛世爾科技公司成功突破了高速和高精度的瓶頸,其核心采用松帶專 利技術(shù):稱重傳感器采用工業(yè)級(jí)、動(dòng)態(tài)響應(yīng)迅速的應(yīng)變電阻稱重傳感器。Thermo Scientific Versa Rx選用的是針對(duì)動(dòng)態(tài)檢重秤應(yīng)用的應(yīng)變電阻稱重傳感器,其松帶技術(shù)使稱量臺(tái)上沒(méi)有電機(jī)。首先,徹底消除電機(jī)振動(dòng),其次實(shí)現(xiàn)了稱量臺(tái)自重輕巧,可以忽略稱量臺(tái)本身重量,只考慮最 大產(chǎn)品重量,相對(duì)而言稱量臺(tái)的有效稱量精度提高到0.01%。換而言之,達(dá)到與電磁補(bǔ)償式稱重傳感器一樣的稱量精度,實(shí)現(xiàn)了高速高精度的夢(mèng)想,在600件/分鐘時(shí),根據(jù)包裝袋的大小不同,最 佳動(dòng)態(tài)精度可達(dá)到10-30mg。應(yīng)用要點(diǎn)Application key points在醫(yī)藥行業(yè)采用檢重秤(或稱為:分選秤)主要用于檢測(cè)說(shuō)明書(shū)缺損和確保灌裝量。要求測(cè)量速度高:一般在300件/分鐘以上;動(dòng)態(tài)檢測(cè)精度高:一般要求正負(fù)偏差在100mg至300mg。影響檢重秤動(dòng)態(tài)精度的因素除了機(jī)器本身的機(jī)械振動(dòng)影響以外,產(chǎn)品長(zhǎng)度、產(chǎn)品內(nèi)部晃動(dòng)以及環(huán)境因素都會(huì)影響精度。在相同稱量臺(tái)長(zhǎng)度條件下產(chǎn)品長(zhǎng)度越長(zhǎng),稱量時(shí)間越短精度會(huì)越差,克服方法是加長(zhǎng)稱量段長(zhǎng)度。01、消除不利檢重秤的環(huán)境因素基礎(chǔ)不堅(jiān)固,基礎(chǔ)振動(dòng),檢重秤支撐腳懸空,檢重秤輸入端與前端輸送機(jī)之間的空隙過(guò)大,運(yùn)行時(shí)輸入/輸出皮帶碰到秤量段和各種方向的氣流影響都會(huì)影響檢重秤的動(dòng)態(tài)稱量。氣流影響可以通過(guò)增加防風(fēng)罩解決。中包裝段所處位置經(jīng)常有叉車或液壓車裝卸貨物,因此基礎(chǔ)振動(dòng)對(duì)檢重秤影響較大。02、克服基礎(chǔ)振動(dòng)Thermo Scientific的Versa Rx檢重秤應(yīng)用了DBSVAC(Dynamic broad spectrum vibration analysis and compensation) 動(dòng)態(tài)寬頻振動(dòng)分析和補(bǔ)償專 利技術(shù),通過(guò)分析和補(bǔ)償基礎(chǔ)振動(dòng)消除了基礎(chǔ)振動(dòng)對(duì)檢重秤影響。03、消除產(chǎn)品內(nèi)部晃動(dòng)液體藥品內(nèi)部的藥水晃動(dòng)可以影響檢重秤動(dòng)態(tài)精度,Thermo Scientific的VersaRx檢重秤從輸入段到稱量段到輸出段采用刀口設(shè)計(jì),使液體藥品非常平滑進(jìn)入稱量臺(tái),從而克服了藥水晃動(dòng)的稱量的影響。
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- 2023-05-26 14:41:07有了它們——疫苗檢測(cè)更進(jìn)一步
- 疫苗檢測(cè):人生就像一段旅程,這段路程有時(shí)精彩, 有時(shí)荊棘,我們?cè)诰手芯`放自我,在荊棘中奮勇前進(jìn)。而在這段旅程中,保駕護(hù)航的疫苗不僅在傳染病領(lǐng)域提供了預(yù)防功能,新型疫苗在一些醫(yī)學(xué)疑難雜癥的預(yù)防和治 療領(lǐng)域有了新的突破。疫苗因其組成復(fù)雜,結(jié)構(gòu)龐大,工藝繁瑣,使得其檢測(cè)和分析更有挑戰(zhàn)。今天我們從疫苗中主成分檢測(cè),工藝監(jiān)控和載體檢測(cè)三個(gè)角度分享一下疫苗檢測(cè)中的創(chuàng)新應(yīng)用。HPLC方法檢測(cè)疫苗中的主成分蛋白質(zhì)疫苗在預(yù)防肝炎,帶狀皰疹病毒,HPV感染,新冠病毒和其他病毒感染起到了非常重要的應(yīng)用,除了經(jīng)典的酶聯(lián)免疫的方法。液相色譜法因檢測(cè)方法簡(jiǎn)單,重復(fù)性好,越來(lái)越多應(yīng)用于蛋白總量的測(cè)定。核酸疫苗的研發(fā)和生產(chǎn)中,HPLC技術(shù)的應(yīng)用也解決了一些檢測(cè)難題。SEC方法檢測(cè)目標(biāo)蛋白總量-BIOBASIC SEC 120 BIOASIC SEC-120色譜柱檢測(cè)分子量比較小的用于豬的疫苗蛋白總含量測(cè)定,重復(fù)性良好。優(yōu)于酶聯(lián)免疫法偏差較大的結(jié)果。SEC方法檢測(cè)人免疫球蛋白二聚體-MAbPac SEC-1SEC方法是檢測(cè)蛋白類制劑中的聚體分析的經(jīng)典方法。5 μm的300?孔徑的MAbPac SEC-1色譜柱可以快速分析人血白蛋白的聚體和單體。疫苗分子量,結(jié)構(gòu)和組成不同,我們有不同排阻范圍的柱子選擇,下面是我們可以用于疫苗檢測(cè)的一些SEC柱子信息,可以用于快速蛋白純度測(cè)定和含量測(cè)定。RP方法檢測(cè)蛋白組成-MAbPac RP蛋白類疫苗需要檢測(cè)目標(biāo)蛋白的含量,對(duì)于抗體類蛋白,可以采用親和色譜法快速定量,重組蛋白常用電泳法,免疫化學(xué)法等方法,很少使用反相色譜法進(jìn)行。因?yàn)橐呙绯煞直容^復(fù)雜,常規(guī)的硅膠基質(zhì)反相色譜柱,孔徑比較小,不耐堿洗等因素。新型的耐堿性聚合物基質(zhì)的MAbPac RP色譜柱,可以在檢測(cè)該重組疫苗蛋白,在0.1 mg/mL-2.5 mg/mL范圍內(nèi)線性良好。用于蛋白疫苗定量檢測(cè)。SEC方法檢測(cè)mRNA聚體-BIOBASIC SEC 1000尺寸排阻色譜法(SEC)是用于聚體分析的經(jīng)典方法,硅膠基質(zhì)的BIOBSIC SEC 1000可以將該2000 nt的聚體與單體分開(kāi)。RP方法檢測(cè)mRNA雜質(zhì)-DNAPac RP反相色譜法是在變性條件下分析mRNA的雜質(zhì),DNAPac RP 1500?的孔徑,可以用于不同堿基對(duì)大小的mRNA的分離。IEC方法檢測(cè)mRNA雜質(zhì)-DNAPac PA200離子交換色譜法在非變性條件下分析mRNA雜質(zhì),可以用于監(jiān)控mRNA工藝中雜質(zhì)的去除情況。也可以用于成品中mRNA完整性的檢測(cè)。HPLC方法檢測(cè)疫苗生產(chǎn)中的工藝組分疫苗生產(chǎn)過(guò)程中會(huì)引入各類潛在風(fēng)險(xiǎn)物質(zhì),在生產(chǎn)過(guò)程中會(huì)引進(jìn)一些滅活劑,裂解劑,凍干保護(hù)劑等制劑,為了增加免疫持久性,調(diào)節(jié)親和力會(huì)加入一些佐劑,賦型劑,防腐劑等組分。特色液相色譜柱在CAD檢測(cè)器下可以快速進(jìn)行這類組分的檢測(cè)。RP方法檢測(cè)戊二醛-Acclaim 120 C18戊二醛具有甲醇含量低,無(wú)致畸變,無(wú)積毒的特點(diǎn),越來(lái)越被廣泛用于滅活。DNPH衍生后的戊二醛可以產(chǎn)生兩個(gè)衍生產(chǎn)物,兩個(gè)產(chǎn)物都可以在Acclaim 120 C18柱上得到很好的分離,在戊二醛在0.4 μg/mL-10.0 μg/mL范圍內(nèi)線性良好。陰離子交換反相方法檢測(cè)去氧膽酸-Acclaim Surfactant去氧膽酸是一種裂解劑,可以裂解病毒顆粒后經(jīng)過(guò)純化去除部分病毒成分,有效降低不良反應(yīng)。Acclaim Surfactant Plus色譜柱采用陰離子交換和RP雙重保留機(jī)理,可以在CAD檢測(cè)器下分離和定量不同的去氧膽酸。陰離子交換反相色譜法快速檢測(cè)吐溫80-Retain AX 吐溫80也可以用于裂解病毒顆粒,分光光度法因其萃取時(shí)間較長(zhǎng),導(dǎo)致分析時(shí)間比較長(zhǎng),使用Hypersep Retain AX色譜柱可以避免復(fù)雜的樣品前處理,直接定量生物制劑中的吐溫80含量。陰離子交換,RP色譜法分析PEG組成-Accliam Surfactant Plus對(duì)聚乙二醇(PEG)評(píng)估時(shí),希望在色譜上對(duì)其進(jìn)行盡可能的分離,以獲得指紋譜圖,進(jìn)行更好的質(zhì)量控制。Acclaim? Surfactant Plus是一款表面活性劑專用柱,尤其適合分析聚合物類的輔料,在對(duì)不同聚合度的PEG分析 時(shí),都能夠獲得優(yōu)秀的峰型和分離度。HILIC分析蔗糖-Hypersil APS-2蔗糖,乳糖添加在活性物質(zhì)濃度較低的疫苗中,減少冷凍干燥時(shí)被升華的氣流帶走并且使凍干后的產(chǎn)品能形成較理想的團(tuán)塊。Hypersil APS-2在分析蔗糖,乳糖時(shí),峰對(duì)稱度好,定量準(zhǔn)確。RP分析膽固醇、DPPC、Lyso-PC和皂苷分析-Hypersil Gold PFPHPLC方法檢測(cè)疫苗載體RP分析納米脂質(zhì)體組成-Acclaim 300 C18RP分析納米脂質(zhì)體組成-Accucore C30納米脂質(zhì)體是一種非常有前景的藥物載體,可以有效保護(hù)mRNA等藥物運(yùn)輸?shù)郊?xì)胞中,脂質(zhì)體的組成和比例會(huì)影響藥物的包裹率和穩(wěn)定性,300?的Acclaim C18色譜柱和80?的Accucore C30色譜柱可以將納米脂質(zhì)體中的幾種組分分開(kāi)。IEC分析AAV包裹率-ProPac3R SAX AAV用于藥物載體中,其包裹率通常通過(guò)超速離心的方法測(cè)定,但是檢測(cè)時(shí)間比較長(zhǎng),儀器成本也比較高。新型的,單分散的3um的強(qiáng)陰離子交換柱ProPac 3R SAX可以將不同亞型的包裹的AAV與空殼的AAV分開(kāi),并且可以得到雜質(zhì)峰。疫苗接種是預(yù)防控制傳染病最有效的手段,新冠疫情中多種不同技術(shù)路徑的疫苗均用于防疫中,其中核酸疫苗帶來(lái)重要變革。相信新的檢測(cè)手段和方法會(huì)在疫苗領(lǐng)域有更廣泛的應(yīng)用。
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- 2023-02-15 14:27:47腫瘤疫苗生物學(xué)活性評(píng)估
- 腫瘤疫苗背景腫瘤疫苗,是一種具有預(yù)防和治 療潛力的有吸引力的替代免疫治 療選擇,是近年研究的熱點(diǎn)之一。針對(duì)腫瘤相關(guān)抗原(Tumor-associated antigen,TAA)或腫瘤特異性抗原 (Tumor specific antigen,TSA) 的疫苗可以特異性地攻擊和破壞抗原過(guò)表達(dá)的惡性細(xì)胞,并由于免疫記憶而實(shí)現(xiàn)慢性治 療反應(yīng)。因此,與其他免疫療法相比,癌癥疫苗提供了特異性、安全性和可耐受的治 療。根據(jù)腫瘤抗原的組分,癌癥疫苗大致可以分為四種類型:基于 DNA 的疫苗,基于 RNA 的疫苗,基于多肽的疫苗和基于免疫細(xì)胞的疫苗。FDA 批準(zhǔn)的首 個(gè)個(gè)性化腫瘤疫苗 PROVENGE (Sipuleucel-T) 是一種基于免疫細(xì)胞的疫苗,用于激素難治性前列腺癌的治 療。除此之外,Moderna,BioNTech 都在布局基于 mRNA 的腫瘤疫苗。圖 1 腫瘤疫苗抗原呈遞平臺(tái)示意圖腫瘤疫苗有效性評(píng)估方法生物體接種疫苗后,腫瘤抗原被帶到淋巴結(jié),進(jìn)而激活抗原特異性的 B 細(xì)胞和 T 細(xì)胞,活化的 B 細(xì)胞產(chǎn)生的抗體及活化的效應(yīng) T 細(xì)胞會(huì)使腫瘤內(nèi)脹并誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞死亡。圖 2 腫瘤疫苗誘導(dǎo)的免疫反應(yīng)示意圖如何有效的評(píng)估腫瘤疫苗的有效性是一個(gè)非常值得探討的問(wèn)題,常用的腫瘤疫苗有效性驗(yàn)證的方法,包括細(xì)胞因子檢測(cè)、CTL 活性檢測(cè)、T 細(xì)胞活化標(biāo)志物檢測(cè)、抗體滴度檢測(cè)、ADCC 檢測(cè)等。1、細(xì)胞因子檢測(cè)細(xì)胞因子是由免疫細(xì)胞經(jīng)過(guò)刺激而合成并分泌的小分子蛋白質(zhì),在免疫應(yīng)答中起著非常重要的作用,因此可以通過(guò)細(xì)胞因子的分泌能力來(lái)反應(yīng)疫苗誘導(dǎo)的細(xì)胞免疫的水平。常見(jiàn)的細(xì)胞因子有白介素 (IL) 、干擾素 (IFN)、 腫瘤壞死因子 (TNF) 等。下面比較了幾種常見(jiàn)的檢測(cè)方法。ELISA 是一種非常經(jīng)典的細(xì)胞因子的檢測(cè)方法,例如在王曉東等人發(fā)表的關(guān)于胃癌疫苗研究的文章中,提到了用 ELISA 的方法檢測(cè)接種疫苗后小鼠骨 髓源樹(shù)突狀細(xì)胞(BMDCs)分泌細(xì)胞因子的能力,檢測(cè)方法如下:BMDCs 在含有 10ng/mL GM-CSF 和 10ng/mL IL-4 的 X-vivo 15 培養(yǎng)基中培養(yǎng),37℃下培養(yǎng) 6 天,然后以每孔 5×104 細(xì)胞的密度在 96 孔板中接種。以 5μM 或 10μM 的最 終濃度加入疫苗抗原,孵育 24 小時(shí)。使用小鼠 TNF-α 和 IL-12 p70 ELISA Ready-SET-Go 試劑組定量培養(yǎng)上清中的 TNF-α 和 IL-12 。首先在 4℃下用捕獲抗體包被 ELISA 板過(guò)夜,然后在室溫下依次加入阻斷液、細(xì)胞培養(yǎng)上清和檢測(cè)抗體,孵育 1h 。 最 后加入終止液和顯色劑,用酶標(biāo)儀 (BioTek) 在 450nm 處記錄 OD 值。檢測(cè)結(jié)果如下:從檢測(cè)結(jié)果可以看出,T7(TLR7 激動(dòng)劑)的存在可以顯著提升 ML/MB 抗原誘導(dǎo)的免疫反應(yīng)。圖 3 ELISA 法測(cè)定小鼠骨 髓樹(shù)突狀細(xì)胞 (BMDCs) 分泌TNF-α (a) 和 IL-12 (b) 的水平Ankita Leekha 等人發(fā)表的關(guān)于 SRAS-COV2 疫苗文章中,提到了用 ELISPOT 的方法評(píng)估細(xì)胞因子的分泌水平,可以作為參考。具體方法如下:從小鼠中分離脾細(xì)胞和肺細(xì)胞,使用小鼠 IFNγ ELISpot 基礎(chǔ)試劑盒和小鼠 IL4 ELISpot 基礎(chǔ)試劑盒 (Mabtech, VA, USA) 進(jìn)行 IFNγ 和 IL4 ELISpot 檢測(cè)。在 37℃ 下,在預(yù)包被抗體的 ELISpot 板中,用抗原刺激脾細(xì)胞和肺細(xì)胞,培養(yǎng) 16-18 小時(shí)。第二天,洗掉細(xì)胞,加入生物素化的檢測(cè)抗體。洗板后,加入 1:30000 稀釋的 Extravidi-ALP 偶聯(lián)物,室溫孵育 1 小時(shí)。洗板后,每孔添加 70μL 顯色液,孵育 20-30min,形成斑點(diǎn),然后用水清洗,干燥。使用 Cytation 7 (BioTek) 對(duì)斑點(diǎn)進(jìn)行量化。每個(gè)點(diǎn)對(duì)應(yīng)一個(gè)單獨(dú)的細(xì)胞因子分泌細(xì)胞。檢測(cè)結(jié)果如下:圖 4 ELIPSOT 方法檢測(cè)小鼠脾細(xì)胞和肺細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的水平2、CTL 活性檢測(cè)疫苗誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性 T 淋巴細(xì)胞 (CTL) 可以直接殺傷腫瘤細(xì)胞,起到抗腫瘤的作用,因此可以通過(guò)檢測(cè) CTL 的殺傷效應(yīng)來(lái)反應(yīng)疫苗的效果。常用的檢測(cè)細(xì)殺傷效應(yīng)的方法有很多,下表列舉了一些常用的方法。王曉東等人發(fā)表的文章中提到了 LDH 檢測(cè),檢測(cè)方法如下:從接種疫苗小鼠的脾 臟中分離淋巴細(xì)胞(效應(yīng)細(xì)胞)。EAC 腫瘤細(xì)胞(靶細(xì)胞)與淋巴細(xì)胞(效應(yīng)細(xì)胞-靶細(xì)胞比例為 50:1)共培養(yǎng) 4h,使用乳酸脫氫 (LDH) 法測(cè)定細(xì)胞毒性。將培養(yǎng) 4h 后的培養(yǎng)上清加入在 ELISA 板中,室溫下加入底物溶液,孵育 30min。最 后,加入終止液終止反應(yīng),并用酶標(biāo)儀 (BioTek) 在 490nm 處檢測(cè)光密度。檢測(cè)結(jié)果如下:相對(duì)于 PBS 對(duì)照組來(lái)說(shuō),T7-MB 組 CTL 細(xì)胞具有顯著的殺傷效應(yīng)。圖 5 LDH 法測(cè)定 CTL 介導(dǎo)的 EAC 靶細(xì)胞的裂解水平3、抗體滴度及親和力檢測(cè)腫瘤疫苗除了可以誘導(dǎo)細(xì)胞免疫之外,也可誘導(dǎo)體液免疫,對(duì)此可通過(guò)對(duì)抗體滴度及親和力進(jìn)行檢測(cè)來(lái)反應(yīng)疫苗抗腫瘤的效果,ELISA 是一種非常經(jīng)典的檢測(cè)方法。上述關(guān)于胃癌疫苗的文章中通過(guò) ELISA 方法測(cè)定小鼠接種疫苗后血清中總 IgG 含量,具體檢測(cè)過(guò)程如下:小鼠接種疫苗后收集血液樣本,通過(guò) 3000g 離心 15 分鐘獲得血清樣本。ELISA 板預(yù)先在 4℃ 包被 BSA-MG1 過(guò)夜,然后在室溫下依次加載封閉溶液 2h,血清樣品 (1:50 稀釋) 和檢測(cè)抗體 1h。最 后,在體系中加入 p-NPP 底物 (Millipore) 和終止液,用酶標(biāo)儀 (BioTek) 在 405nm 處記錄 OD 值。檢測(cè)結(jié)果如下:相對(duì)于 PBS 對(duì)照組來(lái)說(shuō),T7-MB 組抗體含量明顯上升。圖6 ELISA法測(cè)定疫苗誘導(dǎo)的血清抗體水平除此之外,在 Emily C. Gale 等人發(fā)表的關(guān)于 mRNA 遞送系統(tǒng)及輔劑研究的文章中,通過(guò) ELISA 的方法測(cè)定了 mRNA OVA 模式疫苗誘導(dǎo)的 OVA 特異性抗體的絕 對(duì)含量及其親和力。具體檢測(cè)方法如下:抗體濃度:小鼠接種加強(qiáng)疫苗后,采集血液樣品,血清按照 1:100 000 進(jìn)行稀釋。采用 anti-OVA mouse IgG1 ELISA (Cayman Chemicals) 試劑,按照試劑廠家的說(shuō)明進(jìn)行 ELISA 實(shí)驗(yàn)。使用 Synergy H1 Microplate Reader (BioTek) 在 450nm 處記錄 OD 值。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算血清抗體濃度,表示 mg/mL??贵w親和性:將 12 個(gè)梯度稀釋的血清與恒定濃度標(biāo)記 HRP 的 anti-OVA 抗體 (3nM) 混合,并在 OVA 抗原包被的板中室溫孵育 2 小時(shí),洗板后用 TMB 底物孵育,用 HCl 停止反應(yīng)。測(cè)定 450nm 處的 OD 值。根據(jù)業(yè)內(nèi)發(fā)現(xiàn)的單克隆抗體的共同親和力,假設(shè)對(duì)照抗體的 KD 為 1nM 對(duì)實(shí)驗(yàn)組的 KD 值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。這一假設(shè)僅影響報(bào)告的絕 對(duì) KD 值,而不影響實(shí)驗(yàn)組之間的相對(duì)差異。檢測(cè)結(jié)果如下:pIC 為雙鏈 RNA 結(jié)構(gòu)模擬物,圖E中比較了可溶性的 pIC 和不同納米顆粒遞送系統(tǒng)誘導(dǎo)的絕 對(duì)抗體含量,從圖 E 中可以看出 2B 遞送系統(tǒng)誘導(dǎo)的 OVA 特異性抗體含量最 高。從F和G可以看出 2B 遞送系統(tǒng)相對(duì)于可溶性 pIC 來(lái)說(shuō)誘導(dǎo)的 IgG 親和力也顯著升高。圖 7 pIC/PBAE NPs 增強(qiáng)體液免疫4、ADCC 檢測(cè)疫苗誘導(dǎo)體液免疫產(chǎn)生的抗體能夠捕捉目標(biāo)抗原,阻斷這個(gè)靶分子的功能,也可以引導(dǎo)其他免疫細(xì)胞(如巨噬細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞)殺死表達(dá)抗原的靶細(xì)胞,在腫瘤治 療中,特別是血液腫瘤中,抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用 (ADCC) 起著關(guān)鍵作用,ADCC 常用的檢測(cè)方法包括細(xì)胞活力檢測(cè)、LDH 檢測(cè)、工程細(xì)胞株、Delfia、RTCA、細(xì)胞成像檢測(cè)等。王曉東等人發(fā)表的關(guān)于胃癌疫苗研究的文章中,提到了 LDH 方法檢測(cè) ADCC,檢測(cè)方法如下:小鼠接種疫苗后,采集其血清樣本(1:25 稀釋),然后與 EAC 細(xì)胞(靶細(xì)胞)在 37°C 孵育 30min。使用小鼠 NK 細(xì)胞分離試劑盒從正常 BALB/c 小鼠中分離出自然殺傷 (NK) 細(xì)胞(效應(yīng)細(xì)胞),與抗體標(biāo)記的 EAC 細(xì)胞以效靶比 50:1 共培養(yǎng) 4 小時(shí)。采用 LDH 法 (Promega) 測(cè)定細(xì)胞毒性,檢測(cè)方法與之前提到的 CTL 活性檢測(cè)的方法一致。檢測(cè)結(jié)果如下:相對(duì)于 PBS 對(duì)照組來(lái)說(shuō),T7-MB 組產(chǎn)生的抗體具有顯著的殺傷效應(yīng)。圖 8 LDH 法測(cè)定血清抗體介導(dǎo)的 EAC 靶細(xì)胞的裂解水平腫瘤疫苗生物學(xué)活性檢測(cè)解決方案推薦本文介紹了腫瘤疫苗活性檢測(cè)的常用方法,包括細(xì)胞因子檢測(cè)、CTL 活性檢測(cè)、抗體滴度及親和力檢測(cè)、ADCC 檢測(cè)等方法,涉及到了酶標(biāo)儀、成像系統(tǒng)、流式、RTCA、洗板分液系統(tǒng)等設(shè)備。Agilent 細(xì)胞分析事業(yè)部可以從多個(gè)角度為用戶提供從樣品處理,到結(jié)果檢測(cè)再到數(shù)據(jù)分析的全面解決方案。
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- 2022-12-19 16:03:21燃燒箱
- 水平燃燒測(cè)試方法:UL94《防火測(cè)試》GBT2408-2008《塑料燃燒性能的測(cè)定水平法和垂直法》IEC60695-11-10《燃燒防火測(cè)試》GB5169.16-2017《電工電子產(chǎn)品著火危險(xiǎn)試驗(yàn) 第16部分:試驗(yàn)火焰 50W水平與垂直火焰試驗(yàn)方法》HB級(jí)水平燃燒測(cè)試方法如下:在試樣一端25mm和100mm處,垂直于長(zhǎng)軸劃兩條標(biāo)線,在25mm標(biāo)記的另一終端,使試樣與縱軸平行,與橫軸傾斜45度位置夾住試樣,本生燈與試樣相對(duì)位置調(diào)整好,旋轉(zhuǎn)壓力表,壓力表只作開(kāi)關(guān)應(yīng)用,一般不顯示讀數(shù),使流量計(jì)顯示適合氣體流量,然后微調(diào)流量計(jì),啟動(dòng)點(diǎn)火按鈕,點(diǎn)燃本生燈。調(diào)節(jié)燃?xì)饬髁浚⒄{(diào)節(jié)本生燈下端的滾花螺母,使燈管在垂直位置時(shí)產(chǎn)生20mm高的藍(lán)色火焰,將本生燈傾斜45度。遙控或者推動(dòng)本生燈推桿,將本生燈推送到指定位置。開(kāi)啟施焰時(shí)間倒計(jì),施焰時(shí)間結(jié)束后拉回本生燈,停止施焰,若試樣繼續(xù)燃燒(包括有焰燃燒或無(wú)焰燃燒),使用面板按鈕鍵記錄燃燒前沿從25mm標(biāo)線到燃燒終止時(shí)的燃燒時(shí)間T(單位秒)并記錄從25mm標(biāo)線到燃燒終止端的燒損長(zhǎng)度L(單位毫米)。
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