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2025-01-21 09:31:20磷酸鹽校正曲線
磷酸鹽校正曲線是用于校準(zhǔn)或驗(yàn)證磷酸鹽濃度測量結(jié)果的圖形表示。通過一系列已知磷酸鹽濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液測量,繪制出吸光度或熒光強(qiáng)度與磷酸鹽濃度之間的關(guān)系曲線。此曲線有助于校正儀器誤差,提高測量準(zhǔn)確性。在環(huán)境監(jiān)測、水質(zhì)分析、生物學(xué)實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域,磷酸鹽校正曲線是確保數(shù)據(jù)可靠性的重要工具。

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2021-09-26 10:55:38Tris(77-86-1)與磷酸鹽緩沖液的選擇
Tris和磷酸鹽都是很常用的緩沖液,它們有相同的地方也有很多不同的地方,如何能在使用時(shí)正確分辨和選擇,這也是難倒了一批人。我們今天就先從它們各自的應(yīng)用及使用環(huán)境講起。讓你能很直觀的感受到它們的區(qū)別。Tris緩沖液在電泳緩沖液中同甘氨酸構(gòu)成緩沖體系穩(wěn)定pH值;在凝膠中使用Tris-HCl緩沖體系穩(wěn)定pH值;被廣泛用作核酸和蛋白質(zhì)的溶劑;Tris緩沖液的低離子強(qiáng)度特點(diǎn)還可用于線蟲的中間纖維的形成;在Tris鹽酸緩沖液中加入EDTA制成“TE緩沖液”,可用于DNA的穩(wěn)定和存儲(chǔ);將調(diào)節(jié)pH值的酸溶液換成乙酸,獲得“TAE緩沖液”,換成硼酸可獲得TBE緩沖液。這兩種緩沖液常用于核酸電泳實(shí)驗(yàn)中。磷酸鹽緩沖液一般的有活性的生物制劑都要用磷酸鹽緩沖溶液來稀釋。原因就是它具有鹽平衡、可調(diào)整適宜pH值的緩沖作用。蒸餾水不具有鹽平衡作用,會(huì)破壞生物蛋白的結(jié)構(gòu)及生物特性;生理鹽水不具有調(diào)整pH的作用,對(duì)完整的、有活性的物質(zhì)不能保證其在最適條件下參與生物反應(yīng),所以使用PBS是先選。當(dāng)然,有的生物活性物質(zhì)需要的條件比較高,就需要在平衡緩沖液中加入更多的成分,維持合適的條件保證生物活性物質(zhì)保持其最完整的特性。因此PBS主要用于細(xì)胞實(shí)驗(yàn),其緩沖范圍最適宜在中性(7.0)。在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中要慎重地選擇緩沖溶液,不僅要考慮緩沖液的緩沖范圍,還要綜合考慮緩沖液的使用環(huán)境:1. 磷酸鹽緩沖溶液的緩沖范圍比較寬,但是它在pH7.5以上時(shí)緩沖能力很?。籘ris本身呈堿性,可以只用Tris-HCl緩沖體系即可配制pH范圍由酸性到堿性的緩沖液,方法也較為簡單,對(duì)于不同的實(shí)驗(yàn),Tris還可以與其他物質(zhì)組成多種緩沖體系。2. 磷酸鹽緩沖溶液易與常見的Ca2+離子、Mg2+離子以及重金屬離子締合生成沉淀,同時(shí)會(huì)抑zhi某些生物化學(xué)過程以及多數(shù)酶的活性,包括激酶,磷酸化酶,脫氫酶等;相比之下Tris緩沖溶液對(duì)生物化學(xué)過程干擾很小,也不與鈣、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀。若反應(yīng)體系中存在金屬離子或者酶制劑,則以Tris緩沖溶液為較優(yōu)選擇。3. Tris緩沖液的pH值受溶液濃度影響較磷酸鹽緩沖溶液大,同樣稀釋十倍,磷酸鹽緩沖溶液的pH值變化小于0.1,而Tris緩沖液的pH值變化則大于0.1。因此對(duì)于體積變化較大的反應(yīng)體系,則應(yīng)慎重使用Tris 緩沖液。4. 另外,Tris緩沖溶液受環(huán)境影響較大。一般來說,溫度每升高一度,pH值下降0.03; 同時(shí)其易吸收空氣中的CO2,所以配制的緩沖液要蓋嚴(yán)密封。
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2021-09-16 11:34:16磷酸鹽、TRIS、HEPES、PIPES緩沖劑的了解
如何選擇緩沖劑?選擇緩沖體系,其解離常數(shù)pKa值應(yīng)該在設(shè)定的pH上下一個(gè)pH值單位內(nèi),因?yàn)榫彌_液的pKa變化超過一個(gè)pH單位時(shí),其緩沖能力就會(huì)明顯下降;緩沖體系不應(yīng)影響蛋白質(zhì)的活性或者DNA的穩(wěn)定性,并避免其他離子的干擾;另外,還要考慮溫度的影響:溫度不僅對(duì)緩沖液有影響,對(duì)細(xì)胞也有影響,大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞在37℃的生理狀況下pH為7.0~7.5,而在溫度下降到0℃時(shí)可達(dá)到8.0。一、磷酸鹽緩沖液的優(yōu)缺點(diǎn):是使用很廣泛的一種緩沖劑,由于它有二級(jí)解離,所以緩沖的pH值范圍很廣,可配置各種pH值的酸性、堿性和中性緩沖液。優(yōu)點(diǎn):易配成各種濃度適用pH范圍寬pH受溫度影響小稀釋后pH變化小缺點(diǎn):易與常見的鈣離子、鎂離子及重金屬離子締合成沉淀。二、Tris緩沖液的優(yōu)缺點(diǎn):Tris緩沖液是在生物化學(xué)研究中使用較廣泛的一種緩沖劑,其本身為弱堿,常用有效pH在“中性”范圍。優(yōu)點(diǎn):堿性較強(qiáng),可以只用這一種緩沖液配置由酸到堿的但范圍pH緩沖液;對(duì)生物化學(xué)過程干擾很小,不與鈣、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀;易吸收空氣中的CO2,所以配制的緩沖液要蓋嚴(yán)密封;此緩沖液對(duì)某些pH電極發(fā)生一定干擾作用,所以要使用與Tris溶液具有兼容性的電極。缺點(diǎn):pH受濃度影響較大,稀釋10倍,pH變化大于0.1溫度效應(yīng)大,如4℃時(shí)pH=8.4,37℃時(shí)pH=7.4三、HEPES緩沖液的優(yōu)缺點(diǎn):HEPES是一種非離子兩性緩沖液,其在pH7.2~7.4范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力,常用在生化診斷試劑盒、DNA/RNA提取試劑盒及PCR診斷試劑盒里。優(yōu)點(diǎn):在開放式培養(yǎng)或細(xì)胞觀察時(shí)能維持較恒定的pH值,并對(duì)細(xì)胞無毒性作用。缺點(diǎn):在高濃度時(shí)對(duì)一些細(xì)胞可能有毒,與其他緩沖劑相比價(jià)格略貴。四、PIPES緩沖液的優(yōu)缺點(diǎn):PIPES是哌嗪緩沖液家族的一員,與HEPES屬于同一家族。它是兩性離子Good's緩沖液,在6.1至7.5的pH范圍內(nèi)有效。由于pH范圍與HEPES略有不同,PIPES的濃度僅為HEPES濃度的一半。優(yōu)點(diǎn):該緩沖劑不會(huì)與金屬絡(luò)合,因此可用于含金屬離子的溶液;可以用于色譜分析,電子顯微鏡固定植物細(xì)胞,以及代替草甘膦緩沖液。缺點(diǎn):當(dāng)溶液的pH值升高到6.5以上時(shí),PIPES的游離酸才容易溶解,但是PIPES的鈉鹽很容易溶解;如果使用的是游離酸形式的緩沖液,請(qǐng)使用氫氧化鈉將其轉(zhuǎn)化為鈉鹽,以提高在較低pH下的溶解度;像HEPES一樣,PIPES不適用于涉及氧化還原反應(yīng)的實(shí)驗(yàn),因?yàn)樗鼤?huì)導(dǎo)致自由基的形成。 
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2020-04-02 10:58:50如何用校正曲線法對(duì)鋼鐵中含量低于1%的C元素進(jìn)行定量分析?
【問題的提出】       一方面,由于碳污染無處不在、很難控制以及分光晶體本身是由含 C 元素的材質(zhì)構(gòu)成等原因,準(zhǔn)確測量 C 是所有顯微分析中的一個(gè)難點(diǎn),另一方面,鋼鐵和某些材料用戶,準(zhǔn)確測量碳鋼中的碳濃度又是一件必須的事情,為此,電子探針分析中開發(fā)出了校正曲線法,實(shí)現(xiàn)碳鋼中的 C 含量準(zhǔn)確定量分析。       該分析方法基于————鋼中 C 含量低于 1%時(shí),C 的 X 射線強(qiáng)度和濃度滿足線性關(guān)系。       對(duì)于鋼中碳化物的 C 的定量分析仍需要 ZAF 分析方法來測量?!緶y量原理】低碳鋼中 C 含量的精確定量測定步驟       ? 選用 4 個(gè)(或 5 個(gè))已經(jīng)碳含量(C)的低碳鋼作為標(biāo)準(zhǔn)樣品       ? 選擇 LDE2 晶體或 LDE2H 晶體分別對(duì)上述標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行碳的 X 射線強(qiáng)度測量(I) ? 利用 JXA-8230 電子探針的 Calibration Curve Quantitative Method 標(biāo)準(zhǔn)軟件及上述測量數(shù)據(jù),可以得到如下圖所示的 I—C 直線       ? 選擇上述 4 個(gè)標(biāo)準(zhǔn)樣品中的某一個(gè)樣品作為未知樣品,再次測量這個(gè)樣品的碳的 X射線強(qiáng)度 Ix,利用上述 I—C 曲線,就可以算出對(duì)應(yīng)于 Ix 的 Cx ? Cx 和已知的該標(biāo)準(zhǔn)樣品的碳濃度 C 一致       下面操作步驟是山東大學(xué)材料學(xué)院劉樹帥老師整理的詳細(xì)步驟,供大家參考。在此,我們也對(duì)他的辛勤工作表示由衷的感謝!?。∫弧?biāo)樣庫的建立1、標(biāo)樣的選擇:       需要具備含碳量低于 1%的五個(gè)鋼鐵樣品標(biāo)樣;2、分光晶體的選擇:       利用 LDE2H 或 LDE6H 探測含量較低的 C 元素;3、建立標(biāo)樣分析條件的設(shè)置:      (1)建立 Fe-C 標(biāo)樣的標(biāo)樣庫(Std.Mng);       (2)建立標(biāo)樣的峰位及強(qiáng)度信息(STD):       首先,分析條件的選擇:       #1:由于標(biāo)樣中 C 含量較低,且 C 元素特征 X-ray 的波長較長,為了保證足夠的計(jì)數(shù)強(qiáng)度,加速電壓推薦設(shè)置為 15KV,束流 500nA;       #2:電子束與樣品交互作用時(shí),由與碳沉積等因素會(huì)對(duì)標(biāo)樣中某一位置的含 C 量造成影響,因此,標(biāo)樣的采集選擇同步控制法(即保持 PCD 的常開狀態(tài)),特別提醒:同步控制法中 PCD的常開狀態(tài)僅在 Accumulation 狀態(tài)下生效,定量分析時(shí)不會(huì)起作用。       同時(shí),標(biāo)樣的采集不再進(jìn)行尋峰和扣背底,縮短電子束在標(biāo)樣上的駐留時(shí)間;       #3:標(biāo)樣分析位置的采集以及束斑尺寸的選擇:       由于標(biāo)樣中 C 元素的含量較低,可能存在碳含量分布不均的情況,因此,需要采用Accumulation 的方式錄入標(biāo)樣位置信息(通常采用陣列的方法錄入,如選擇合適的陣列數(shù),根據(jù)標(biāo)樣選擇恰當(dāng)?shù)牟介L),利用光鏡逐一核對(duì)標(biāo)樣位置;推薦束斑尺寸為 50μm;       #4:譜儀和分光晶體的選擇,C 元素峰位的標(biāo)記:       通常,根據(jù)機(jī)器配置,選擇 LDE2H 或 LDE6H 分光晶體,同時(shí),在距離采集強(qiáng)度信息較遠(yuǎn)的位置處尋峰;另外,為了盡可能的弱化碳沉積,將 Peak 采集時(shí)間由默認(rèn) 10s 更改為 2s,Acquire 后獲得校正曲線;       #5:打開校正曲線的窗口,點(diǎn)擊 confirm,對(duì)采集數(shù)據(jù)中偏離較大的數(shù)值進(jìn)行合理的刪減, 然后重新計(jì)算平均強(qiáng)度(挑肥揀瘦); 通過以上系列操作,建立起校正曲線的標(biāo)樣信息。二、未知樣品的定量分析:       #1:加速電壓 15KV,束流 500nA;       #2:修正方法:選擇 Calibration Curve 法,并設(shè)置尋峰和背底均為 none;       #3:束斑尺寸:50μm,分析位置可根據(jù)需求進(jìn)行設(shè)置;       #4:分光晶體選擇 LDE2H 或 LDE6H,peak 駐留時(shí)間 2s,選擇建立的校準(zhǔn)曲線標(biāo)樣信息;       #5:獲得微量 C 元素定量分析的結(jié)果;Intensity & Wt. %       Group : Fe-C-STD-2       Sample : Fe-C-STD-2_0002_QNT       Page 1 Unknown Specimen No. 1 Path : Fe-C-Cr-Ni       Project : Fe-C-STD-2_0002 Position No. : 1       Comment :Stage : X= -28.5292       Y= -1.3514       Z= 10.7345 Acc. Voltage : 15.0 (kV)       Probe Dia. : 50.0       Scan : Off Dated on 2019/08/20 17:42:49 WDS only       No. of accumulation : 1 Element       Peak(mm)       Curr.(A)       Counts       Time(s)       S.D. 1       C         124.846       4.999E-007     23219.8       2.0           152.3Calibration curve Metal       Acc. Voltage : 15.0 (kV) Element       Mass(%)       Atom(%)       cps/uA       S.D.(%) C                  0.6921       100.0000         23224.4      0.0045 ---------------------------------------------------------------------------------------Total            0.6921       100.0000          23224.4Unknown Specimen No. 2 Path : Fe-C-Cr-Ni       Project : Fe-C-STD-2_0002 Position No. : 2       Comment : Stage : X= -28.4311       Y= -1.7044       Z= 10.7450 Acc. Voltage : 15.0 (kV)       Probe Dia. : 50.0       Scan : Off Dated on 2019/08/20 17:43:01 WDS only       No. of accumulation : 1 Element       Peak(mm)       Curr.(A)       Counts       Time(s)       S.D. 1       C         124.846         4.996E-007   22449.8       2.0          149.83Calibration curve Metal       Acc. Voltage : 15.0 (kV) Element       Mass(%)       Atom(%)       cps/uA       S.D.(%) C                  0.6332         100.0000        22467.8     0.0042 ---------------------------------------------------------------------------------------------Total            0.6332         100.0000        22467.8Unknown Specimen No. 3 Path : Fe-C-Cr-Ni       Project : Fe-C-STD-2_0002 Position No. : 3       Comment : Stage : X= -28.7638       Y= -1.7638       Z= 10.7525 Acc. Voltage : 15.0 (kV)       Probe Dia. : 50.0       Scan : Off Dated on 2019/08/20 17:43:13 WDS only       No. of accumulation : 1 Element       Peak(mm)       Curr.(A)         Counts       Time(s)       S.D. 1       C          124.846         4.997E-007   21204.4        2.0         145.62Calibration curve Metal       Acc. Voltage : 15.0 (kV) Element       Mass(%)       Atom(%)       cps/uA       S.D.(%) C                  0.5358          100.0000       21217.2     0.0037 ----------------------------------------------------------------------------------------------Total            0.5358          100.0000       21217.2
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2019-08-22 14:40:20離子色譜儀對(duì)污廢水中多聚磷酸鹽的測定
對(duì)多聚磷酸鹽的分析如P2O74-,P3O105-,一般是先將其轉(zhuǎn)化為PO43-用光度法測定總磷,此法不僅要作樣品前處理,而且不能進(jìn)行形態(tài)分離。用離子色譜法,陰離子交換分離;氧化鈉淋洗液和甲醇有機(jī)改進(jìn)劑,梯度淋洗分離多聚磷酸鹽(正磷酸鹽PO43-、焦磷酸鹽P2O74-、三聚磷酸鹽P3O105-),化學(xué)YZ電導(dǎo)檢測的Z低檢出限達(dá)到15~50微克/升。下圖B為同時(shí)分離5種磷酸鹽的標(biāo)準(zhǔn)色譜圖。另外,使用疏水性非常低的陰離子分離柱分離多聚磷酸鹽有了新的進(jìn)展。一次進(jìn)樣可同時(shí)測定正、焦、三聚和四聚磷酸鹽。
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2019-07-24 16:44:37化學(xué)添加劑有機(jī)磷和多聚磷酸鹽的標(biāo)準(zhǔn)離子色譜圖
      對(duì)多聚磷酸鹽的分析如P2O74-,P3O105-,通常是先將其轉(zhuǎn)換為PO43-用光度法分析總磷,此法不但需作試樣前處理,并且不可以開展形態(tài)分離。用離子色譜法,陰離子交換分離;氧化鈉淋洗液和甲醇有機(jī)改進(jìn)劑,梯度淋洗分離多聚磷酸鹽(正聚磷酸鹽PO43-、焦磷酸鹽P2O74-、三聚磷酸鹽P3O105-),化學(xué)YZ電導(dǎo)檢測的低檢出限達(dá)到15~50微克/升。下圖B為同一時(shí)間分離5種聚磷酸鹽的標(biāo)準(zhǔn)色譜圖。      有機(jī)磷和多聚磷酸鹽是常見的化學(xué)添加劑。因?yàn)镃a2+,Mg2+與多聚磷酸鹽有很強(qiáng)的絡(luò)合能力,因而工業(yè)生產(chǎn)中普遍用多聚磷酸鹽作為循環(huán)系統(tǒng)水中的阻垢劑和防蝕劑;日用品化學(xué)品如洗潔劑、牙青等添加多聚磷酸鹽以軟化水硬度。大批的聚磷酸鹽排入水體中易造成水質(zhì)的富營養(yǎng)化,可使水中水生植物大批繁衍,耗費(fèi)氧分,造成水生動(dòng)物的死亡。      此外,采用疏水性比較低的陰離子分離柱分離多聚磷酸鹽有了新的突破。一次進(jìn)樣可同一時(shí)間分析正、焦、三聚和四聚磷酸鹽。      現(xiàn)階段,很多西方國家已明令禁止采用多聚磷酸鹽做化學(xué)添加劑。離子色譜儀可用以污廢水中多聚磷酸鹽的分析。下圖A為聚磷酸鹽的化學(xué)結(jié)構(gòu)。(來源:青島普仁儀器有限公司)
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