- 2025-01-10 17:02:23成年海馬神經(jīng)發(fā)生和記憶提取
- 成年海馬神經(jīng)發(fā)生是指在成年哺乳動(dòng)物的海馬區(qū)內(nèi),持續(xù)產(chǎn)生新的神經(jīng)元的過程。這些新神經(jīng)元對(duì)記憶的形成和鞏固起著關(guān)鍵作用。記憶提取則是指將存儲(chǔ)在大腦中的記憶信息重新激活和提取出來的過程。在海馬區(qū),神經(jīng)發(fā)生與記憶提取密切相關(guān),新生成的神經(jīng)元能夠促進(jìn)記憶的編碼、存儲(chǔ)和提取,進(jìn)而增強(qiáng)記憶能力。這一過程對(duì)于學(xué)習(xí)和記憶功能至關(guān)重要。
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成年海馬神經(jīng)發(fā)生和記憶提取資訊
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- 大成學(xué)堂 | Nat子刊一作直播,詳解下丘腦促進(jìn)成年海馬神經(jīng)發(fā)生并調(diào)控學(xué)習(xí)記憶
- 9月6日(周二)20:00,「大成學(xué)堂」特邀文章第 一作者李亞東博士在線直播,分享其課題組在神經(jīng)環(huán)路調(diào)控成年海馬神經(jīng)發(fā)生和記憶提取方面取得的新進(jìn)展
成年海馬神經(jīng)發(fā)生和記憶提取產(chǎn)品
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成年海馬神經(jīng)發(fā)生和記憶提取問答
- 2022-05-30 10:46:45Nat Neurosci︱宋娟團(tuán)隊(duì)揭示下丘腦環(huán)路調(diào)控海馬神經(jīng)發(fā)生促進(jìn)記憶提取和對(duì)抗焦慮樣行為
- 文章概述成年海馬神經(jīng)發(fā)生在記憶和情緒處理中起重要作用,海馬新生神經(jīng)元在DG中產(chǎn)生、成熟并整合到現(xiàn)有環(huán)路中,并且這個(gè)過程由神經(jīng)環(huán)路的活動(dòng)進(jìn)行動(dòng)態(tài)調(diào)節(jié)。目前的研究主要關(guān)注神經(jīng)環(huán)路調(diào)控神經(jīng)發(fā)生的某一階段,例如干細(xì)胞分裂、神經(jīng)前體細(xì)胞分化或者未成熟神經(jīng)元存活等等。然而,目前尚不清楚對(duì)神經(jīng)環(huán)路修飾的海馬新生神經(jīng)元對(duì)動(dòng)物行為記憶的影響。2022年5月6日,美國(guó)北卡羅來納大學(xué)教堂山分校(University of North Carolina at Chapel Hill)宋娟課題組博士后李亞東、羅艷佳等人在Nature Neuroscience上發(fā)表了題“Hypothalamic modulation of adult hippocampal neurogenesis in mice confers activity-dependent regulation of memory and anxiety-like behavior”的最新研究,揭示了下丘腦后部核團(tuán)乳頭上核(SuM)調(diào)控成年海馬神經(jīng)發(fā)生,促進(jìn)記憶提取和對(duì)抗焦慮的新機(jī)制。核心觀點(diǎn)該研究聚焦于SuM-DG環(huán)路修飾的ABN及其發(fā)育的不同階段,通過光纖記錄、光遺傳、化學(xué)遺傳、膜片鉗和譜系示蹤等方法,揭示了SuM-DG環(huán)路修飾成年海馬新生神經(jīng)元,促進(jìn)記憶提取和對(duì)抗焦慮。研究結(jié)果分析1. 作者以前的研究發(fā)現(xiàn),SuM神經(jīng)元投射密集支配DG中成熟的顆粒細(xì)胞(GC),但SuM-DG 投射是否與神經(jīng)干細(xì)胞(rNSCs)形成功能連接尚不清楚。作者使用了共聚焦成像和3D重建方法,證明了SuM神經(jīng)元與DG中rNSCs存在連接,通過膜片鉗和光遺傳技術(shù)表明SuM-DG投射谷氨酸能從而激活rNSCs并促進(jìn)rNSCs分裂。SuM-DG投射谷氨酸能激活rNSCs并促進(jìn)rNSCs分裂2. 為了研究環(huán)路修飾對(duì)海馬神經(jīng)發(fā)生的影響,作者通過譜系示蹤、光遺傳和化學(xué)遺傳等方法,發(fā)現(xiàn)在神經(jīng)發(fā)生起始階段,SuM神經(jīng)元通過谷氨酸能誘導(dǎo)rNSCs的活化,并促進(jìn)rNSCs分裂產(chǎn)生新的rNSCs和神經(jīng)前體細(xì)胞。激活SuM神經(jīng)元促進(jìn)rNSCs和神經(jīng)前體細(xì)胞的產(chǎn)生3.接下來檢測(cè)SuM GABAergic在新生神經(jīng)元調(diào)節(jié)中發(fā)揮的作用。作者發(fā)現(xiàn)使用光遺傳激活SuM GABAergic神經(jīng)元能夠促進(jìn)神經(jīng)前體分化,增加新生神經(jīng)元數(shù)量并促進(jìn)樹突發(fā)育,敲除Vgat后該效應(yīng)消失。結(jié)果表明SuM GABAergic傳遞調(diào)節(jié)神經(jīng)干細(xì)胞分化和早期未成熟神經(jīng)元發(fā)育。SuM GABAergic傳遞調(diào)節(jié)神經(jīng)干細(xì)胞分化和早期未成熟神經(jīng)元發(fā)育4.由于成熟的 GC 接收雙 SuM GABAergic/glutamatergic輸入,作者想知道成年新生神經(jīng)元(ABN)是否也接收雙輸入。通過使用光遺傳和膜片鉗技術(shù)發(fā)現(xiàn),DG中ABN接受GABAergic/glutamatergic雙輸入,且在ABN發(fā)育未成熟晚期階段,光遺傳激活SuM能夠增加未成熟神經(jīng)元、新生神經(jīng)元以及樹突棘的數(shù)量。結(jié)果表明SuM神經(jīng)元促進(jìn)晚期階段成年新生未成熟神經(jīng)元的成熟和樹突棘發(fā)育。SuM神經(jīng)元促進(jìn)晚期階段成年未成熟神經(jīng)元的成熟和樹突棘發(fā)育5. 已有研究ABN 活動(dòng)對(duì)記憶和情緒行為至關(guān)重要,作者接下來檢測(cè)ABN活性對(duì)動(dòng)物行為學(xué)的影響。作者選擇性激活SuM環(huán)路修飾的 ABN后進(jìn)行新異位置識(shí)別(NPR)和場(chǎng)景性恐懼記憶(CFC)實(shí)驗(yàn),結(jié)果發(fā)現(xiàn)NPR 測(cè)試中的辨別率和CFC中Freezing time增加,表明SuM 修飾的ABN的激活提高記憶性能。激活SuM環(huán)路修飾的ABN改善記憶表現(xiàn)6. 為了檢測(cè)SuM修飾的ABN在調(diào)節(jié)情緒處理中的作用,通過光遺傳和化學(xué)遺傳分別調(diào)控SuM環(huán)路修飾的ABN,并分別進(jìn)行了曠場(chǎng)、O迷宮和強(qiáng)迫游泳測(cè)試,結(jié)果發(fā)現(xiàn),SuM環(huán)路修飾的ABN活動(dòng),可進(jìn)一步促進(jìn)記憶提取,對(duì)抗焦慮樣行為。SuM環(huán)路修飾的ABN活動(dòng)可促進(jìn)記憶提取和抗焦慮樣行為7. 有研究表明SuM 神經(jīng)元的放電增加是對(duì)新異環(huán)境的反應(yīng),作者接下來檢測(cè)新奇環(huán)境是否可以調(diào)節(jié)SuM-DG神經(jīng)元的活動(dòng)。使用光纖記錄方法(瑞沃德R820三色多通道光纖記錄系統(tǒng))檢測(cè)SuM-DG神經(jīng)元投射的活性,結(jié)果發(fā)現(xiàn)在豐富環(huán)境(EE)中,小鼠SuM神經(jīng)元活性顯著增加。瑞沃德R820三色多通道光纖記錄系統(tǒng)便捷高效 擴(kuò)展性強(qiáng)數(shù)據(jù)可視化 靈敏度高SuM-DG神經(jīng)元在EE中活性增高8. 由于 SuM 神經(jīng)元對(duì)新異環(huán)境具有高度反應(yīng)性,作者接下來檢測(cè)新異環(huán)境是否誘導(dǎo)這一反應(yīng)所必需的。結(jié)果發(fā)現(xiàn)SuM 消融后,EE誘導(dǎo)的神經(jīng)反應(yīng)和ABN介導(dǎo)的行為改善被消除。消融SuM后EE誘導(dǎo)的神經(jīng)反應(yīng)和ABN介導(dǎo)的行為改善被消除總結(jié)該研究解決了一個(gè)長(zhǎng)期存在的問題,即刺激神經(jīng)環(huán)路是否能夠產(chǎn)生足夠的神經(jīng)源性效應(yīng)來調(diào)節(jié)海馬體依賴性行為??偟膩碚f,本文發(fā)現(xiàn)了SuM-DG神經(jīng)環(huán)路通過GABAergic/ glutamatergic輸入調(diào)控海馬ABN發(fā)育的全過程,并且提出了激活SuM-DG環(huán)路修飾的ABN能夠調(diào)控記憶和對(duì)抗焦慮的重要觀點(diǎn)。光纖記錄可以檢測(cè)神經(jīng)核團(tuán)及環(huán)路的信號(hào)變化,有助于探究腦區(qū)上下游投射及神經(jīng)元活性與行為學(xué)的關(guān)系。瑞沃德R820三色光纖記錄系統(tǒng)兼具數(shù)據(jù)采集及數(shù)據(jù)分析功能,紅綠熒光自由采集,同時(shí)兼具行為視頻與熒光數(shù)據(jù)同步記錄分析功能,讓實(shí)驗(yàn)更為高效。想更多了解瑞沃德R820三色光纖記錄系統(tǒng)識(shí)別下方二維碼,即可申請(qǐng)免費(fèi)試用
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- 2025-06-10 10:45:22信號(hào)發(fā)生器怎么發(fā)生諧波
- 信號(hào)發(fā)生器怎么發(fā)生諧波 信號(hào)發(fā)生器作為電子測(cè)試與研究中不可或缺的工具,其主要功能是產(chǎn)生特定頻率的信號(hào),廣泛應(yīng)用于通信、電子、測(cè)試及實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中。信號(hào)發(fā)生器在工作過程中常常會(huì)產(chǎn)生諧波,這些諧波對(duì)系統(tǒng)的穩(wěn)定性與性能影響深遠(yuǎn)。本文將深入探討信號(hào)發(fā)生器是如何產(chǎn)生諧波的,并詳細(xì)分析諧波產(chǎn)生的原因、影響以及如何有效和管理諧波的技術(shù)手段。 在電子信號(hào)的生成過程中,理想的信號(hào)通常是正弦波,但實(shí)際生成的信號(hào)往往包含基頻的整數(shù)倍頻率成分,這些額外的頻率成分稱為諧波。諧波的產(chǎn)生源于信號(hào)發(fā)生器內(nèi)部的非線性失真,它不僅可能影響測(cè)試結(jié)果的準(zhǔn)確性,還可能對(duì)設(shè)備產(chǎn)生不必要的干擾。通常,信號(hào)發(fā)生器輸出的信號(hào)如果發(fā)生非線性失真,便會(huì)將基頻信號(hào)轉(zhuǎn)化為高次諧波成分。 信號(hào)發(fā)生器產(chǎn)生諧波的原因主要有兩個(gè)方面。,信號(hào)發(fā)生器內(nèi)部的電子元件(如放大器、調(diào)制器、混頻器等)在處理信號(hào)時(shí),受到自身工作特性和結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)的影響,產(chǎn)生非線性響應(yīng),從而導(dǎo)致信號(hào)頻率的倍增。第二,信號(hào)發(fā)生器的輸出級(jí)與負(fù)載之間的不匹配,也可能導(dǎo)致反射信號(hào)的干擾,使得諧波成分進(jìn)一步增強(qiáng)。 信號(hào)發(fā)生器輸出的波形設(shè)計(jì)也是諧波產(chǎn)生的一個(gè)重要因素。例如,矩形波或脈沖波等非正弦波形,天然包含了大量的高次諧波成分,而這對(duì)于一些高精度測(cè)試來說,可能會(huì)引入誤差。因此,信號(hào)發(fā)生器的設(shè)計(jì)通常會(huì)采取一定的措施來控制這些諧波的幅度,確保輸出信號(hào)的純凈度。 為了和管理諧波,現(xiàn)代信號(hào)發(fā)生器采用了多種技術(shù)。使用高質(zhì)量的線性放大器與調(diào)制電路可以有效減少非線性失真,從源頭上減少諧波的產(chǎn)生。頻率合成技術(shù),如直接數(shù)字合成(DDS)技術(shù),也能精確控制輸出波形的頻率成分,顯著降低諧波的影響。通過良好的輸出阻抗匹配設(shè)計(jì),減少信號(hào)反射,避免因不匹配產(chǎn)生的附加諧波。 信號(hào)發(fā)生器在工作過程中產(chǎn)生的諧波是由其內(nèi)部電路設(shè)計(jì)、非線性失真及信號(hào)輸出與負(fù)載匹配等多種因素共同作用的結(jié)果。隨著技術(shù)的發(fā)展,通過優(yōu)化設(shè)計(jì)和采取先進(jìn)的頻率合成技術(shù),可以有效地控制和減少諧波的影響,提高信號(hào)生成的純度與準(zhǔn)確性,保證測(cè)試結(jié)果的可靠性與精度。
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- 2022-10-14 09:04:14直播回顧 |「大成學(xué)堂」DA(VTA)→5-HT(DRN)神經(jīng)環(huán)路調(diào)控神經(jīng)厭食癥
- 9月27日(周二)20:00,最/新一期「大成學(xué)堂」直播活動(dòng)成功舉辦。本次直播,美國(guó)貝勒醫(yī)學(xué)院劉海蘭博士在線詳解神經(jīng)性厭食癥新調(diào)控機(jī)制的前沿研究。該研究成果已發(fā)表在Nature Neuroscience上,題為“A D2 to D1 shift in dopaminergic inputs to midbrain 5-HT neurons causes anorexia in mice”。作為第 一作者,劉海蘭博士在此次直播中細(xì)致講解了其研究的思路,并在線解答了大家的提問,獲得滿屏好評(píng)。沒有趕上看直播或想再回顧精彩內(nèi)容的小伙伴掃碼即可查看直播回放首先,劉海蘭博士介紹了研究背景。神經(jīng)性厭食癥作為一種高致死的精神疾病,近年來發(fā)病率顯著上升,但是其發(fā)病機(jī)制并不明確、治 療手段也有限。目前基礎(chǔ)研究和臨床研究表明,神經(jīng)性厭食癥的病人伴隨著多巴胺受體的多位點(diǎn)突變,這提示多巴胺神經(jīng)系統(tǒng)的異常也與厭食癥的發(fā)生 發(fā)展有關(guān)。同時(shí)研究表明位于中腦腹側(cè)被蓋區(qū)(VTA)的多巴胺(dopamine)神經(jīng)元和位于中腦中縫背核(DRN)的五羥色胺(5-HT)神經(jīng)元能夠參與調(diào)控包括進(jìn)食在內(nèi)的動(dòng)機(jī)性行為,它們也被發(fā)現(xiàn)與神經(jīng)性厭食癥的發(fā)病機(jī)制相關(guān)?;谶@些研究背景,隨后劉海蘭博士分享了研究的詳細(xì)情況。其團(tuán)隊(duì)利用TPH2-CreER小鼠模型開展了系列實(shí)驗(yàn),采用神經(jīng)環(huán)路示蹤技術(shù)和電生理技術(shù),首次發(fā)現(xiàn)了中腦腹側(cè)被蓋區(qū)-中縫背核(VTA→DRN)的DAVTA神經(jīng)元→5-HTDRN神經(jīng)元環(huán)路調(diào)控食欲和神經(jīng)性厭食癥。主要研究過程,主要為以下四方面內(nèi)容:低頻刺激抑 制DAVTA→5-HTDRN神經(jīng)環(huán)路并通過 DRD2 促進(jìn)攝食行為高頻刺激激活DAVTA→5-HTDRN神經(jīng)環(huán)路并通過 DRD1 抑 制攝食行為DAVTA→5-HTDRN神經(jīng)環(huán)路的活動(dòng)調(diào)控神經(jīng)厭食癥5-HTDRN神經(jīng)元中的 DA受體可調(diào)節(jié)神經(jīng)厭食癥狀直播時(shí)觀眾們提問踴躍,但是由于時(shí)間限制無法一一解答。在這里,我們特意整理出部分提問文字版的解答~聊天區(qū)部分問題詳解(文字版)1.研究神經(jīng)性厭食癥除了常見的轉(zhuǎn)基因技術(shù)、電生理技術(shù)之外,是否有新的實(shí)驗(yàn)方法能嘗試?答:在我們的課題中除了用了電生理,以及這些轉(zhuǎn)基因小鼠模型之外,我們也使用了化學(xué)遺傳學(xué)、光遺傳學(xué)方法去慢性或急性的操控神經(jīng)元的活性,同時(shí)我們也使用了光纖記錄,實(shí)時(shí)記錄神經(jīng)元的活性改變。2.aba小鼠的成功率和存活率有多少?答:在這個(gè)過程中我們的那個(gè)存活率,因?yàn)槲覀冞@邊動(dòng)物protocal上限制的是如果小鼠的體重低于原始體重的80%,就必須要處死,所以我們算存活率是當(dāng)小鼠體重降到它原來體重的80%的時(shí)候,我們就認(rèn)為這只動(dòng)物已經(jīng)死了。所以在我們的aba模型中,通常到第三天左右就會(huì)有動(dòng)物的體重低于原來體重的80%,然后隨著到第四天第五天可能會(huì)有50%左右的小鼠體重低于80%。3.激活DRN中5HT神經(jīng)元如何能減少進(jìn)食?答:5-HT神經(jīng)元它在攝食中的作用已經(jīng)有很多報(bào)道了。有一些報(bào)道說5-HT神經(jīng)元可以投射至下丘腦的POMC和AgRP神經(jīng)元。POMC和AgRP神經(jīng)元在攝食中的作用也是被許許多多研究證實(shí)的。POMC神經(jīng)元它可以抑 制AgRP神經(jīng)元,激活食欲。而5-HT神經(jīng)元可以通過它的受體抑 制AgRP神經(jīng)元,同時(shí)激活POMC神經(jīng)元活性來抑 制食欲。想觀看本期全程回放識(shí)別下方二維碼即可收看「大成學(xué)堂」以建立“全 球精英分享先進(jìn)技術(shù),解析領(lǐng)域內(nèi)研究熱點(diǎn)”為宗旨的知識(shí)分享平臺(tái)。欄目開播以來已開展了超10場(chǎng)直播活動(dòng),數(shù)十名海內(nèi)外知名學(xué)者在此講授生命科學(xué)學(xué)術(shù)理論、實(shí)驗(yàn)技術(shù)等課程。歡迎大家進(jìn)入「大成學(xué)堂」專題頁,學(xué)習(xí)相關(guān)課程。?掃碼入群,提前獲取后續(xù)直播課信息以及get到豐富的學(xué)術(shù)干貨~
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- 2023-01-09 09:21:31你睡覺時(shí),大腦竟然在努力加深記憶!
- 艾伯塔大學(xué)神經(jīng)系統(tǒng)科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)了一種在深度睡眠中有效幫助記憶的機(jī)制:大腦的核重聚體(nucleus reuniens,RE)可有效協(xié)調(diào)大腦中與記憶有關(guān)的兩個(gè)腦結(jié)構(gòu)——內(nèi)側(cè)前額葉皮質(zhì)(medial prefrontal cortex,mPFC)和海馬體(hippocampus,HPC),換句話說,睡眠期間的大腦活動(dòng)可能有助于記憶的持久性。http://www.giant-bio.com/home-newsinfo-id-4187.html 慢波睡眠(slow-wave sleep)是睡眠的***深階段,大腦以非常慢的、每秒一次的節(jié)奏運(yùn)動(dòng)。前額葉皮質(zhì)和海馬體間的協(xié)調(diào)對(duì)情景記憶尤為重要,且是慢波睡眠的標(biāo)志,研究者就其中間體——下丘腦核重聚體如何調(diào)節(jié)這種協(xié)調(diào)關(guān)系展開研究。 利用電生理、光遺傳學(xué)和化學(xué)遺傳學(xué)等技術(shù)對(duì)33只雄性大鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn),評(píng)估了RE在調(diào)節(jié)慢振蕩同步中的作用。通過單元記錄技術(shù),證實(shí)了RE神經(jīng)元在前腦失活狀態(tài)下表現(xiàn)出緩慢的節(jié)律性活動(dòng)模式,并與持續(xù)的緩慢振蕩(slow oscillation,SO)相耦合。 RE單元與前腦相耦合 無論是在RE水平或是軸突投射束水平,甚至在mPFC水平,均可誘發(fā)HPC電位***大值,同時(shí),刺激mPFC以誘發(fā)HPC反應(yīng),可以通過選擇性抑RE從而阻斷該反應(yīng)。抑制RE可降低mPFC-HPC的同步 在這項(xiàng)工作中,研究者展示了大腦中的兩個(gè)遠(yuǎn)距離記憶相關(guān)區(qū)域——內(nèi)側(cè)前額葉皮質(zhì)(mPFC)和海馬體(HPC)如何在慢波活動(dòng)中通過一個(gè)間接式的丘腦結(jié)構(gòu)——核重聚體(RE)來協(xié)調(diào)它們的活動(dòng),它在慢波活動(dòng)中協(xié)調(diào)兩個(gè)情景記憶結(jié)構(gòu)的強(qiáng)大能力,展示了與離線記憶整合的潛在相關(guān)性,表明RE對(duì)睡眠依賴的記憶鞏固有顯著的影響,這是一個(gè)令人驚喜的研究途徑。 生物磁珠對(duì)細(xì)胞篩選的方法已日漸成熟,原理是將包被一抗的磁珠與細(xì)胞表面對(duì)應(yīng)的分子特異性結(jié)合,或者將包被二抗的磁珠與已經(jīng)與細(xì)胞表面分子特異性結(jié)合的一抗結(jié)合。磁珠攜帶與之結(jié)合的細(xì)胞吸附與分離柱或試管上,實(shí)現(xiàn)陽性細(xì)胞或陰性細(xì)胞的分離。洛陽吉恩特生物自主研發(fā)生產(chǎn)了各類生物磁珠,可以實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
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- 2022-05-30 14:29:33如何高效進(jìn)行成年鼠腦單細(xì)胞懸液制備
- 作為構(gòu)成神經(jīng)系統(tǒng)的基本結(jié)構(gòu)和功能單位,神經(jīng)細(xì)胞的體外分離、培養(yǎng)在神經(jīng)科學(xué)研究中占據(jù)前沿地位。由于神經(jīng)元分離后不會(huì)再次分裂、增殖,因此在進(jìn)行相關(guān)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)時(shí),需要高效地制備高質(zhì)量原代神經(jīng)細(xì)胞保證實(shí)驗(yàn)材料的供應(yīng)。然而神經(jīng)細(xì)胞的分離制備難度較大,相較于新生鼠,成年鼠腦的解離更復(fù)雜,需要機(jī)械和酶解聯(lián)合作用來降解細(xì)胞外基質(zhì),同時(shí)大量的髓鞘碎片和紅細(xì)胞也會(huì)干擾下游實(shí)驗(yàn)。那么,如何快速制備高質(zhì)量的大/小鼠神經(jīng)細(xì)胞懸液樣本呢?接下來,我們從實(shí)驗(yàn)儀器及材料、實(shí)驗(yàn)步驟和實(shí)驗(yàn)結(jié)果一一介紹,希望對(duì)你的實(shí)驗(yàn)有所幫助。實(shí)驗(yàn)儀器及材料瑞沃德 DSC-400單細(xì)胞懸液制備儀;瑞沃德 HJ-400 加熱套;瑞沃德 DHABE-5003大小鼠成年腦組織溫和酶解試劑盒;瑞沃德 SCT-100組織處理管;70μm 細(xì)胞濾器;瑞沃德眼科手術(shù)器械;細(xì)胞培養(yǎng)耗材、移液槍等。實(shí)驗(yàn)步驟1、按照說明書要求,混合配置酶mix并37℃水浴激活。2、剝離成年鼠(P>7)腦組織,暫存至盛有HBSS(含Ca2+和Mg2+)的培養(yǎng)皿中,用眼科鑷輕輕地將腦組織的血管盡可能去除。盡可能剔除腦組織上的血管3、將腦組織和酶mix放于組織處理管中,用剪刀將全腦簡(jiǎn)單剪成4塊。4、將組織處理管倒置至單細(xì)胞懸液制備儀上,安裝加熱套,運(yùn)行程序 M_ABrain_Heater_2。5、潤(rùn)濕細(xì)胞濾器,過濾細(xì)胞懸液樣本,300×g ,離心10 min。使用細(xì)胞篩過濾雜質(zhì)6、轉(zhuǎn)移細(xì)胞樣本至15mL離心管,加入去碎片試劑后混勻,上層鋪預(yù)冷的PBS,3000×g, 4℃,升速為5,降速為3,離心10min,保留下層細(xì)胞后洗滌收集。去除碎片,收集下層細(xì)胞7、裂紅操作(可選)。8、細(xì)胞計(jì)數(shù)及流式檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果使用瑞沃德單細(xì)胞懸液制備儀處理成年小鼠腦組織獲得的細(xì)胞可達(dá)90%,細(xì)胞活性高,不影響下游實(shí)驗(yàn)。瑞沃德 DHABE-5003大小鼠成年腦組織溫和酶解試劑盒,可用于成年大鼠或小鼠(P>7)全腦組織的單細(xì)胞懸液制備,可支持腦內(nèi)所有神經(jīng)及非神經(jīng)細(xì)胞的分離。文末驚喜免費(fèi)試用福利識(shí)別上方二維碼免費(fèi)申請(qǐng)?jiān)囉脝渭?xì)胞懸液制備儀
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