- 2025-12-15 12:54:28實時頻譜分析
- 實時頻譜分析是一種信號處理技術(shù),能夠動態(tài)監(jiān)測和分析信號的頻率成分隨時間的變化。它通過將信號在時域和頻域上同時展示,幫助用戶直觀理解信號的頻譜特征隨時間如何演變。實時頻譜分析廣泛應(yīng)用于通信、雷達、聲納、生物醫(yī)學等領(lǐng)域,用于信號監(jiān)測、故障診斷、干擾源定位等,是信號處理和電子測量中不可或缺的工具。
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實時頻譜分析問答
- 2017-09-27 20:39:46如何理解實時頻譜分析的含義
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- 2023-01-12 17:17:57Ramina 應(yīng)用實例|實時監(jiān)測細胞培養(yǎng)性能測試
- 前言拉曼光譜在復雜水體系中反映組分微小變化的能力深化了該技術(shù)在生物制藥過程分析(如生物反應(yīng)器中的細胞生長)方面的應(yīng)用。拉曼光譜儀技術(shù)可以實時、原位和無損地監(jiān)測生物制藥生產(chǎn)過程,可用于復雜化學體系的連續(xù)過程監(jiān)測。拉曼光譜技術(shù)在生物反應(yīng)過程中可檢測大量代謝物變化的能力已將該技術(shù)提升為強大的過程分析工具。實驗概述拉曼光譜分析光學探頭具有可重復使用的特點,通過減少運行間的可變性來提高過程監(jiān)測的可重復性和可靠性。Thermo Scientific? Ramina? 過程分析儀可匹配多個光纖探頭。MarqMetrix 生物反應(yīng)器球形探頭是專為滿足生物工藝工業(yè)的要求而設(shè)計的,可以搭載到 Ramina 過程分析儀上使用。這些探頭具有快速、易于更換和連接以及耐用等特點,可以進行無菌處理,比如離線的高壓滅菌。DynaDrive 一次性生物反應(yīng)器(S.U.B.)是 S.U.B. 技術(shù)的最 新產(chǎn)品,為大規(guī)模生物生產(chǎn)提供了更好的性能,并具備可擴展性。與傳統(tǒng)的 S.U.B. 設(shè)計相比,長方體的罐體具有幾個關(guān)鍵優(yōu)勢,包括優(yōu)越的混合和傳質(zhì)能力以及更好的可擴展性。本應(yīng)用介紹了Ramina過程分析儀系統(tǒng)與 500L HyPerforma DynaDrive 生物反應(yīng)器的集成,并實現(xiàn)關(guān)鍵過程參數(shù)(CPPs)的在線測量,通過采集整個細胞生長培養(yǎng)過程中連續(xù)生成的光譜數(shù)據(jù)建立起若干參數(shù)和代謝物的精確預測模型。材料與方法細胞培養(yǎng)和喂養(yǎng)策略細胞培養(yǎng)在500L HyPerforma DynaDrive S.U.B 中進行(見下圖1),其中包含體積約為320L細胞培養(yǎng)基,在36.5℃,pH=6.9+/-0.3, DO=50%的條件下接種0.5x106個細胞/mL。體系的 pH 值通過添加二氧化碳氣體和碳酸鈉來控制。細胞在化學定義的培養(yǎng)基中生長,從第3天開始每天進行兩步喂養(yǎng)過程。第 一種喂養(yǎng)介質(zhì)以起始體積的重量為4%添加,第二種喂養(yǎng)介質(zhì)以0.4%添加。第6天體系溫度轉(zhuǎn)為33°C。試驗在14天后終止。生物反應(yīng)器避光處理以防止雜散光干擾。在高壓滅菌后,將 Ramina 過程分析儀生物反應(yīng)器球形探頭插入HyPerforma DynaDrive S.U.B. 中,進行在線實時拉曼光譜數(shù)據(jù)采集。圖1.500L Thermo Scientific HyPerforma DynaDrive S.U.B. 細胞培養(yǎng)罐Ramina 過程分析儀測試使用 Ramina 過程分析儀進行數(shù)據(jù)采集(見下圖2), Ramina 過程分析儀的生物反應(yīng)器球形探頭直接浸入在生物反應(yīng)器(500L) 中,每平均20次測量獲取一張拉曼光譜數(shù)據(jù),積分/曝光時間為3秒,激光功率設(shè)置為450mW。每個數(shù)據(jù)光譜的總采集時間為2分鐘,在 Ramina 過程分析儀用以建立模型數(shù)據(jù)與離線儀器分析通過匹配時間戳以確認。圖2.Thermo Scientific? Ramina? 在線拉曼分析儀化學計量學模型建立來自多臺 Ramina 過程分析儀、探頭和生物反應(yīng)器的數(shù)據(jù)被用于創(chuàng)建模型。訓練數(shù)據(jù)集從每個生物反應(yīng)器的45個樣本中收集,以創(chuàng)建每個化學計量學模型。對光譜數(shù)據(jù)進行了檢查,剔除了由宇宙射線引起的異常譜峰。選擇感興趣的光譜區(qū)域,并對光譜進行預處理,以去除基線干擾并優(yōu)化信噪比。建模過程中測試了許多預處理技術(shù),包括Savitzky Golay濾波、自動Whitaker平滑、多元散射校正、SNV和均值中心化。根據(jù)建模的關(guān)注點選擇優(yōu)化不同的預處理技術(shù)。為每個感興趣的組分創(chuàng)立偏最小二乘(PLS)模型并進行交叉驗證以測試每個模型的優(yōu)化的效果。這些組分包括葡萄糖、乳酸、谷氨酰胺、谷氨酸、TCD、VCD和其他在生物反應(yīng)器培養(yǎng)過程中產(chǎn)生的常見代謝物。結(jié)果在這項工作中,在線拉曼光譜儀應(yīng)用于連續(xù)分批補料 CHO 細胞培養(yǎng)過程。使用拉曼光譜監(jiān)測工藝參數(shù)首先需要使用外部校準數(shù)據(jù)集(獨立離線數(shù)據(jù))建立化學計量學模型,通過對感興趣的參數(shù)的離線分析數(shù)據(jù)和對應(yīng)的在線拉曼光譜數(shù)據(jù)的關(guān)聯(lián)關(guān)系建立模型。
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- 2022-06-06 14:14:13如何處理實時熒光定量PCR數(shù)據(jù)
- 實時熒光定量PCR數(shù)據(jù)中的基本概念:在整個擴增過程中會出現(xiàn)基線期,指數(shù)期,線性期和平臺期。其中在基線期和指數(shù)增長期,擴增產(chǎn)物都是以指數(shù)級增長,但是在基線期我們沒辦法檢測;而到了線性期和平臺期之后,由于不同基因,或者不同條件下其擴增效率差別很大,因此沒有辦法計算模板的含量。因此,在指數(shù)增長期的CT值就成了計算模板含量的關(guān)鍵值?!?圖一:線性圖譜▲ 圖二:對數(shù)圖譜為什么知道CT值就能夠得到最初的目標基因含量呢?如圖三,表示一個基因單次擴增曲線。N為擴增產(chǎn)物的分子數(shù),模板的分子數(shù)乘以1+擴增效率的n次方,n代表循環(huán)次數(shù)。也就是說,如果擴增效率為100%,產(chǎn)物的分子數(shù)就等于模板數(shù)乘以2的n次方。但是在線性增長期和平臺期,擴增效率不可能是100%,因此PCR理論方程只在指數(shù)期成立,也就是圖三綠色框的部分?!?圖三數(shù)據(jù)處理:以下三張圖分別表示我們在做熒光定量PCR時提到的三個名稱:擴增曲線、標準曲線、溶解曲線。1、juedui定量:使用一系列稀釋的已知濃度的標準品與未知樣本同時進行測定,根據(jù)系列濃度標準品的CT值與起始模板量之間的線性比例關(guān)系。注意事項:? 標準品必須來源可靠,濃度已知。? 標準品要和待測樣品同時在儀器中擴增。? 只能根據(jù)標準品覆蓋的濃度范圍進行待測樣本濃度的推測。2、相對定量:是用來確定經(jīng)過不同處理的樣品之間的表達差異或目標在不同時相差的表達差異,也就是倍數(shù)差異。Azure Cielo?實時熒光定量PCR系統(tǒng)來自美國Azure Biosystems公司,以創(chuàng)新服務(wù)于生命科學為愿景。Azure Cielo?實時熒光定量PCR系統(tǒng)融合了高品質(zhì)Peltier溫度模塊和基于光纖傳輸?shù)墓鈱W檢測系統(tǒng),為您的科學研究提供高精準、高靈敏的可靠結(jié)果。Azure Cielo 3/6檢測通道,可根據(jù)實驗需求靈活配置。同時配有10.3觸控系統(tǒng),主機本身可獨立運行、連接、遠程交互,讓您隨時隨地知悉實驗進程和及時獲得實驗結(jié)果。
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