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2025-01-10 10:53:44外泌體分析
外泌體分析是一種研究細(xì)胞外泌體的生物化學(xué)分析方法。它通常包括外泌體的提取、純化、鑒定和分析等步驟,旨在深入了解細(xì)胞間通信、疾病發(fā)生機(jī)制等。外泌體是由細(xì)胞分泌的小囊泡,攜帶著蛋白質(zhì)、核酸等生物分子,參與細(xì)胞間的信息傳遞。通過分析外泌體的成分和功能,可以為疾病診斷、治療和藥物研發(fā)提供新的思路和方法。

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2023-05-11 11:20:33直播 | 深入外泌體: 冷凍電鏡下的新一代藥物遞送載體
細(xì)胞排出廢物的“垃圾桶”,到如今科研界熱度居高不下的寵兒,外泌體在某種意義上完成了質(zhì)的飛躍。外泌體是細(xì)胞分泌到胞外的一種囊泡(Extracellular Vesicles,EVs),其大小為30-150nm,具有雙層磷脂膜結(jié)構(gòu),含有豐富的內(nèi)含物(包含蛋白質(zhì)、核酸等多種活性生物分子)。外泌體應(yīng)用于疾病診斷、藥物裝載等方面,它穿透性極強(qiáng)、吸收更佳、低免疫原性,使得它成為了非常優(yōu)質(zhì)的“活性物質(zhì)遞送系統(tǒng)”。外泌體由蛋白質(zhì)、核酸、脂質(zhì)組成,含有較高水平的膽固醇、鞘磷脂及飽和脂肪酸。相比其他載體,外泌體在遞送藥物方面有著顯而易見的優(yōu)勢:①外泌體的安全性非常高;②外泌體有非常好的靶向性潛力;③外泌體具備工程改造潛力;④外泌體有優(yōu)秀的多分子裝載能力。藥物遞送系統(tǒng)(DDS)的表征是新藥研發(fā)致關(guān)重要的一個(gè)環(huán)節(jié),反應(yīng)DDS 的特性。冷凍電鏡是外泌體直觀表征的不二利器,通過將外泌體樣本快速冷凍,可以獲得外泌體近生理狀態(tài)下形貌信息細(xì)節(jié),直接表征多項(xiàng)指標(biāo);還可以通過冷凍電子斷層掃描技術(shù)獲得外泌體近生理狀態(tài)下的3D結(jié)構(gòu),為新藥開發(fā)打開納米世界的大門。隨著冷凍電鏡技術(shù)的不斷發(fā)展,已經(jīng)突破分辨率極限,達(dá)到原子級別。冷凍電鏡技術(shù)對外泌體的探究越來越細(xì)致,為了更深入的走進(jìn)外泌體,了解冷凍電鏡下的新一代藥物遞送載體,藥融圈聯(lián)合賽默飛共同邀請到蘇州唯思爾康科技有限公司SVP何新軍以及賽默飛世爾科技材料與結(jié)構(gòu)分析業(yè)務(wù)拓展經(jīng)理劉靖怡2位行業(yè)專家,于2023年5月18日做客線上直播間,揭開外泌體的神秘面紗。
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2025-02-01 09:10:16金相顯微鏡能不能測粉體
金相顯微鏡能不能測粉體? 金相顯微鏡作為一種用于觀察金屬樣品的顯微分析工具,廣泛應(yīng)用于材料科學(xué)和金屬研究中。它能夠通過對金屬表面的觀察,幫助研究人員了解金屬的組織結(jié)構(gòu)、相組成及晶粒大小等重要信息。當(dāng)我們將其應(yīng)用到粉體測量上時(shí),是否能獲得理想的效果?本文將深入探討金相顯微鏡能否有效測量粉體,并分析其中的技術(shù)挑戰(zhàn)與局限性。 金相顯微鏡的基本原理與應(yīng)用 金相顯微鏡通過將樣品制備成適合觀察的薄片,借助不同的顯微鏡鏡頭和光源進(jìn)行觀察,從而獲取材料的微觀結(jié)構(gòu)信息。通常,這類顯微鏡配備了高分辨率的光學(xué)系統(tǒng),能夠清晰呈現(xiàn)金屬材料表面不同相區(qū)的結(jié)構(gòu)特征,廣泛應(yīng)用于金屬鑄造、焊接、熱處理等領(lǐng)域,幫助研究者了解材料的性能變化。 粉體的特殊性與金相顯微鏡的適應(yīng)性 粉體由于其顆粒形態(tài)的特殊性,相較于常規(guī)的金屬樣品,更難通過傳統(tǒng)金相顯微鏡進(jìn)行觀察。粉體材料的顆粒大小、形狀、分布等特征對于顯微鏡的觀察提出了更高的要求。金相顯微鏡主要適用于平整、穩(wěn)定的固體表面觀察,而粉體由于其顆粒形態(tài)和尺寸的不規(guī)則性,難以獲得清晰的觀察結(jié)果。粉體樣品的制備過程通常需要將其制成薄片或者通過特殊處理固定,才能進(jìn)行顯微鏡分析。 金相顯微鏡在粉體分析中的局限性 粉體的顆粒尺寸通常較小,且形狀不規(guī)則,傳統(tǒng)金相顯微鏡的分辨率和觀察角度可能無法完全呈現(xiàn)顆粒的全貌。金相顯微鏡在觀察粉體時(shí)需要樣品表面平整,如果沒有經(jīng)過特殊的樣品制備,觀察效果可能會受到影響。再者,由于金相顯微鏡主要側(cè)重于觀察金屬的微觀結(jié)構(gòu),而粉體的形態(tài)和表面特性常常需要借助其他顯微技術(shù)(如掃描電子顯微鏡 SEM)來獲得更為的分析結(jié)果。 結(jié)論 金相顯微鏡雖然可以對粉體進(jìn)行一定程度的觀察,但由于粉體的顆粒特性、樣品制備難度及金相顯微鏡的局限性,它并非粉體分析的佳選擇。若要獲得更高精度的粉體表征,推薦使用掃描電子顯微鏡(SEM)等其他更為適合粉體分析的儀器。
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2024-01-15 17:30:19包涵體蛋白復(fù)體常見十大問題解析
在生命科學(xué)領(lǐng)域中,包涵體復(fù)體的研究占據(jù)了重要的地位。但隨著研究的深入,一些問題逐漸浮現(xiàn)。本文將對包涵體復(fù)體研究中常見的挑戰(zhàn)進(jìn)行解析,以及為研究者提供一些解決思路。  ①包涵體復(fù)性原則:低濃度,平緩梯度,低溫。 ②怎樣洗滌包涵體?通常的洗滌方法一般是洗不干凈的,可以先把包涵體用6M鹽酸胍溶解充分,過濾除去未溶解的物質(zhì),注意留樣跑電泳,然后用水稀釋到4M,離心把沉淀和上清分別跑電泳,如此類推可以一直稀釋到合適的濃度,可以找到一個(gè)合適去除雜質(zhì)的辦法,其實(shí)這就是梯度沉淀的方法,比通常的直接洗脫效果好。 ③對于尿素和鹽酸胍該怎么選擇尿素和鹽酸胍屬中強(qiáng)度變性劑,易經(jīng)透析和超濾除去。它們對包涵體氫鍵有較強(qiáng)的可逆性變性作用,所需濃度尿素8-10M,鹽酸胍6-8M。尿素溶解包涵體較鹽酸胍慢而弱,溶解度為70-90%,尿素在作用時(shí)間較長或溫度較高時(shí)會裂解形成氰酸鹽,對重組蛋白質(zhì)的氨基進(jìn)行共價(jià)修飾,但用尿素溶解具有不電離,呈中性,成本低,蛋白質(zhì)復(fù)性后除去不會造成大量蛋白質(zhì)沉淀以及溶解的包涵體可選用多種色譜法純化等優(yōu)點(diǎn),故目前已被廣泛采用。 鹽酸胍溶解能力達(dá)95%以上,且溶解作用快而不造成重組蛋白質(zhì)的共價(jià)修飾。但它也有成本高、在酸性條件下易產(chǎn)生沉淀、復(fù)性后除去可能造成大量蛋白質(zhì)沉淀和對蛋白質(zhì)離子交換色譜有干擾等缺點(diǎn)。 ④8M尿素溶解的包涵體溶液應(yīng)如何保存?在4度放置半個(gè)月,都沒什么問題 。在室溫放置超過48小時(shí),可能會對目的蛋白有影響,因?yàn)槟蛩卦趬A性條件下可使一些氨基酸?;栽缧┨幚鞡I溶液比較好。 ⑤復(fù)性時(shí)的蛋白濃度一般使用濃度為0.1-1.0mg/ml,太高的濃度容易形成聚體沉淀,太低的濃度不經(jīng)濟(jì),而且很多蛋白在低濃度時(shí)不穩(wěn)定,很容易變性。 ⑥蛋白復(fù)性后濃度低蛋白可能是在復(fù)性的過程中發(fā)生降解了。 可以將復(fù)性好的蛋白濃縮一下泡膠看看。復(fù)性過程一般都是低濃度蛋白,需要保證分子間有足夠的折疊空間。一些未正確折疊的蛋白就存在于沉淀中,可能沉淀看不出來,復(fù)性后的蛋白高速離心看看。 ⑦復(fù)性中蛋白析出是怎么回事?該怎么處理?出現(xiàn)蛋白析出,肯定是條件變化太劇烈了。 復(fù)性應(yīng)該采取復(fù)性液濃度和PH值逐漸變化的方法,例如根據(jù)包涵體的溶液成分,每隔1個(gè)PH或濃度值配置一種溶液,逐步透析到正常。此外透析時(shí)必須濃度極低,條件溫和,使蛋白質(zhì)能夠正確折疊。但是復(fù)性的比率應(yīng)該很低。 若加變性劑尿素可加到2M,鹽酸胍可加到1-1.5M; 另外可將甘油濃度增加,范圍可在≤30%,且在復(fù)性樣品中也可加適量甘油。 ⑧復(fù)性效果的檢測根據(jù)具體的蛋白性質(zhì)和需要,可以從生化、免疫、物理性質(zhì)等方面對蛋白質(zhì)的復(fù)性效率進(jìn)行檢測。 凝膠電泳:一般可以用非變性的聚丙烯酰胺凝膠電泳可以檢測變性和天然狀態(tài)的蛋白質(zhì),或用非還原的聚丙烯酰胺電泳檢測有二硫鍵的蛋白復(fù)性后二硫鍵的配對情況。光譜學(xué)方法:可以用紫外差光譜、熒光光譜、圓二色性光譜(CD)等,利用兩種狀態(tài)下的光譜學(xué)特征進(jìn)行復(fù)性情況的檢測,但一般只用于復(fù)性研究中的過程檢測。色譜方法:如IEX、RP-HPLC、CE等,由于兩種狀態(tài)的蛋白色譜行為不同。生物學(xué)活性及比活測定:一般用細(xì)胞方法或生化方法進(jìn)行測定,較好的反映了復(fù)性蛋白的活性,值得注意的是,不同的測活方法測得的結(jié)果不同,而且常常不能完全反映體內(nèi)活性。黏度和濁度測定:復(fù)性后的蛋白溶解度增加,變性狀態(tài)時(shí)由于疏水殘基暴露,一般水溶性很差,大多形成可見的沉淀析出。免疫學(xué)方法:如ELISA、WESTERN等,特別是對結(jié)構(gòu)決定簇的抗體檢驗(yàn),比較真實(shí)的反映了蛋白質(zhì)的折疊狀態(tài)。 ⑨變性的融合蛋白可以制備多抗或者單抗嗎?變性蛋白只是天然蛋白伸直的產(chǎn)物,用來免疫動物具有更強(qiáng)的抗原性。只是天然蛋白中被包在內(nèi)部的抗原決定簇也會暴露出來,如果用該變性抗原制備的抗體來檢測變性抗原是可以的,如果用來檢測天然蛋白,可能會有假陽性。做單抗也可以,同樣道理,篩選出的單抗可能對抗的抗原決定簇處于天然抗原的內(nèi)部,是否能用還要看將來該單抗用來干什么。 ⑩純化后的可溶性融合蛋白可以直接用于制備多抗嗎?免疫動物要求抗原體種盡量小。在這種小體積的情況下,緩沖液里的小分子成分只要沒毒影響就不大,可以不用考慮。 更多蛋白復(fù)體詳情可以上義翹神州網(wǎng)咨詢!
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2025-01-13 18:00:16熔體流動速率儀多少錢
熔體流動速率儀(MFR儀)是一種廣泛應(yīng)用于塑料行業(yè)的測試設(shè)備,主要用于測定塑料在熔融狀態(tài)下的流動性能。熔體流動速率儀的價(jià)格受多種因素的影響,包括品牌、性能、精度、功能等。熔體流動速率儀到底多少錢呢?本文將對其價(jià)格影響因素進(jìn)行分析,并為您提供市場上的價(jià)格參考,幫助您做出更明智的購買決策。 熔體流動速率儀的價(jià)格會受到品牌的影響。市場上有很多不同品牌的熔體流動速率儀,知名品牌如Instron、Zwick和Tinius Olsen等通常會定價(jià)較高,主要因?yàn)槠湓诋a(chǎn)品質(zhì)量、技術(shù)支持和售后服務(wù)方面具備優(yōu)勢。相對而言,國內(nèi)品牌和一些小品牌的設(shè)備價(jià)格會更具競爭力。 熔體流動速率儀的價(jià)格與其性能和功能直接相關(guān)。普通的基礎(chǔ)型熔體流動速率儀一般價(jià)格較低,但它們只能提供較為基本的流動速率測量功能。隨著設(shè)備的技術(shù)更新和功能增強(qiáng),如自動化程度的提高、更高的精度、更強(qiáng)的數(shù)據(jù)處理能力等,這些高端設(shè)備的價(jià)格會顯著上升。例如,某些高精度型號或帶有自動測試程序的設(shè)備,價(jià)格可能會達(dá)到幾萬元甚至更高。 設(shè)備的測量范圍和應(yīng)用領(lǐng)域也影響其定價(jià)。如果是用于高端科研或特殊行業(yè)的設(shè)備,如需要測量更廣泛的溫度和壓力范圍的熔體流動速率儀,其價(jià)格自然會更高。設(shè)備的配件和額外功能,如數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)、溫控系統(tǒng)等,也會增加成本。 根據(jù)市場調(diào)研,目前市場上的熔體流動速率儀價(jià)格大致在幾千元到幾萬元之間。普通的入門級設(shè)備價(jià)格大約在5000元至15000元之間,而一些高端、精密型設(shè)備則可達(dá)到30000元以上,甚至接近50000元。價(jià)格差異主要取決于設(shè)備的技術(shù)規(guī)格、品牌和功能需求。 選擇合適的熔體流動速率儀時(shí),除了關(guān)注價(jià)格,還需要綜合考慮設(shè)備的技術(shù)參數(shù)、應(yīng)用場景、售后服務(wù)等多方面的因素。購買時(shí),建議根據(jù)自身需求選擇性價(jià)比高的設(shè)備,避免盲目追求低價(jià)或高價(jià)。購買前一定要與供應(yīng)商進(jìn)行充分溝通,確保設(shè)備的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性,保障測試結(jié)果的可靠性。 總而言之,熔體流動速率儀的價(jià)格因品牌、功能、精度等多種因素而有所不同,市場上的價(jià)格區(qū)間也較為廣泛。在選購時(shí),了解設(shè)備的各項(xiàng)技術(shù)指標(biāo)及自己的實(shí)際需求,才能做出理智的購買決策。
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2025-01-13 18:00:16熔體流動速率儀怎樣加熱
熔體流動速率儀怎樣加熱 熔體流動速率儀(Melt Flow Rate, MFR)是塑料行業(yè)常用的一種測試儀器,用于測量塑料熔融狀態(tài)下的流動性能。測試結(jié)果不僅能幫助判斷塑料的加工性能,還能為材料的選用和工藝優(yōu)化提供依據(jù)。為了確保測量數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和儀器的穩(wěn)定性,熔體流動速率儀的加熱過程至關(guān)重要。本文將詳細(xì)探討熔體流動速率儀的加熱方式及其在操作中的重要性。 熔體流動速率儀的加熱方式 熔體流動速率儀的加熱系統(tǒng)通常包括加熱元件、溫控系統(tǒng)以及熱平衡設(shè)計(jì)。這些加熱系統(tǒng)的作用是確保在測試過程中,熔體保持在規(guī)定的溫度范圍內(nèi),從而保證測試結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。加熱過程通常分為以下幾個(gè)步驟: 預(yù)熱階段:在進(jìn)行測量前,首先需要將熔體流動速率儀的測試腔體加熱至規(guī)定的溫度。這個(gè)階段的加熱方式通常采用電加熱,通過溫控系統(tǒng)對加熱元件的溫度進(jìn)行精確調(diào)節(jié)。為了確保溫度穩(wěn)定,通常會對加熱元件進(jìn)行隔熱設(shè)計(jì),避免外界溫度的干擾。 恒溫階段:達(dá)到預(yù)設(shè)溫度后,儀器會進(jìn)入恒溫階段,持續(xù)維持恒定的加熱溫度。這一階段需要溫控系統(tǒng)能夠精確控制溫度的波動,通常通過PID溫控算法實(shí)現(xiàn),以確保溫度穩(wěn)定并減少實(shí)驗(yàn)誤差。 熱平衡設(shè)計(jì):為了實(shí)現(xiàn)均勻加熱,熔體流動速率儀的設(shè)計(jì)通常會加入熱平衡裝置,使得整個(gè)加熱腔體內(nèi)的溫度分布均勻。這能有效避免溫度梯度導(dǎo)致的誤差,從而提高測試的精確度。 熔體流動速率儀加熱中的關(guān)鍵因素 在熔體流動速率儀的加熱過程中,有幾個(gè)關(guān)鍵因素對測試結(jié)果產(chǎn)生直接影響。首先是溫度的均勻性,任何溫度分布的不均衡都會導(dǎo)致熔體流動速率的測量誤差。設(shè)備的加熱速度也很重要,快速加熱有時(shí)可能會導(dǎo)致儀器過熱或不穩(wěn)定,因此控制加熱速率至關(guān)重要。溫控系統(tǒng)的精度也直接影響測試數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。良好的溫控系統(tǒng)能有效保持溫度波動在極小范圍內(nèi),確保實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性。 總結(jié) 熔體流動速率儀的加熱過程涉及到精確的溫控技術(shù)與設(shè)計(jì),通過精確的加熱和溫度控制,確保測量結(jié)果的可靠性。了解加熱過程中的關(guān)鍵因素,能有效避免誤差,提高測試的準(zhǔn)確度和效率。正確操作并合理維護(hù)加熱系統(tǒng),是確保熔體流動速率儀高效工作的基礎(chǔ)。
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