- 2025-01-10 17:02:23常規(guī)分析型飛行時(shí)間質(zhì)譜儀
- 常規(guī)分析型飛行時(shí)間質(zhì)譜儀是一種高精度質(zhì)譜分析儀器,它通過測量離子從產(chǎn)生到檢測器所需飛行時(shí)間來確定離子的質(zhì)量/電荷比。該儀器具有分辨率高、分析速度快、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn),適用于多種復(fù)雜樣品的定性和定量分析。廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)藥、環(huán)境監(jiān)測、食品安全等領(lǐng)域,能夠進(jìn)行小分子化合物、蛋白質(zhì)、多肽等物質(zhì)的快速篩查和結(jié)構(gòu)解析。其高精度和多功能性使其成為科研和工業(yè)生產(chǎn)中不可或缺的分析工具。
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常規(guī)分析型飛行時(shí)間質(zhì)譜儀資訊
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- 2022 ASMS Waters新技術(shù)新應(yīng)用海報(bào)合集來了
- 在此,小編整理了一份2022年ASMS Waters技術(shù)應(yīng)用海報(bào)合集,一起來看看吧!
常規(guī)分析型飛行時(shí)間質(zhì)譜儀產(chǎn)品
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常規(guī)分析型飛行時(shí)間質(zhì)譜儀問答
- 2025-04-21 12:45:20飛行時(shí)間質(zhì)譜儀分析方法有哪些?
- 飛行時(shí)間質(zhì)譜儀分析方法 飛行時(shí)間質(zhì)譜儀(TOF-MS, Time-of-Flight Mass Spectrometry)是一種高效且精確的分析工具,廣泛應(yīng)用于化學(xué)、生命科學(xué)、環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域。其主要特點(diǎn)是通過測量離子飛行的時(shí)間來確定其質(zhì)量,具有高分辨率、快速掃描和廣泛的質(zhì)量范圍等優(yōu)勢。本文將詳細(xì)介紹飛行時(shí)間質(zhì)譜儀的分析方法,包括其工作原理、應(yīng)用領(lǐng)域及常見的分析技術(shù)。 飛行時(shí)間質(zhì)譜儀的工作原理是基于質(zhì)荷比(m/z)原理。當(dāng)樣品通過電噴霧或激光脫附等方式被離子化后,離子在電場作用下被加速。不同質(zhì)量的離子由于受到的力不同,飛行時(shí)間也會(huì)有所差異。通過測量離子從源頭到檢測器的飛行時(shí)間,結(jié)合已知的電場強(qiáng)度和加速電壓,就能計(jì)算出離子的質(zhì)量。這一過程無需分離離子,而是通過時(shí)間差異直接進(jìn)行質(zhì)量分析,從而實(shí)現(xiàn)快速、高效的質(zhì)量鑒定。 在TOF-MS分析中,離子源是關(guān)鍵組成部分,常見的離子源有激光解吸電離(LDI)、基質(zhì)輔助激光解吸電離(MALDI)和電噴霧電離(ESI)。MALDI通常用于大分子樣品的分析,如蛋白質(zhì)和聚合物,因?yàn)槠淇梢杂行У乇苊夥肿铀榱选6妵婌F電離則適用于液體樣品,特別是生物樣品中的小分子物質(zhì)。通過選擇適合的離子源,TOF-MS能夠應(yīng)對不同樣品的復(fù)雜性,提供準(zhǔn)確的質(zhì)量信息。 飛行時(shí)間質(zhì)譜儀的優(yōu)勢之一是其高分辨率。在傳統(tǒng)的質(zhì)譜儀中,分辨率受限于離子的分析時(shí)間和設(shè)備的精度,而TOF-MS通過大范圍的飛行時(shí)間差異,能夠?qū)崿F(xiàn)極高的質(zhì)量分辨率。這使得它在復(fù)雜樣品的分析中表現(xiàn)尤為突出,如環(huán)境樣品中微量污染物的檢測、藥物代謝產(chǎn)物的分析等。 飛行時(shí)間質(zhì)譜儀還具有較高的靈敏度和快速掃描能力。由于離子在飛行管中的速度較高,TOF-MS能夠在短時(shí)間內(nèi)捕捉到大量的質(zhì)譜數(shù)據(jù),提供豐富的分析信息。尤其在液質(zhì)聯(lián)用(LC-MS)中,飛行時(shí)間質(zhì)譜儀與液相色譜技術(shù)的結(jié)合使得復(fù)雜樣品的分離和定性分析更加高效,能夠?qū)旌衔镏械某煞诌M(jìn)行精確鑒定。 TOF-MS在多個(gè)領(lǐng)域中的應(yīng)用也日益廣泛。在生命科學(xué)領(lǐng)域,它被用于蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)和藥物開發(fā)中,通過精確的質(zhì)量分析為疾病機(jī)制的研究和新藥的開發(fā)提供數(shù)據(jù)支持。在環(huán)境監(jiān)測領(lǐng)域,TOF-MS能夠檢測空氣、水質(zhì)和土壤中的微量污染物,為環(huán)境保護(hù)提供技術(shù)保障。TOF-MS在食品安全檢測、法醫(yī)鑒定等方面也發(fā)揮著重要作用。 盡管飛行時(shí)間質(zhì)譜儀具備眾多優(yōu)點(diǎn),但其分析過程中仍然存在一些挑戰(zhàn)。例如,高精度的儀器需要高昂的投資和維護(hù)成本,而且數(shù)據(jù)分析過程較為復(fù)雜。隨著技術(shù)的不斷發(fā)展,未來TOF-MS的性能有望得到進(jìn)一步提升,同時(shí)在更加多樣化的領(lǐng)域中得到應(yīng)用。 飛行時(shí)間質(zhì)譜儀作為一項(xiàng)成熟的分析技術(shù),憑借其高分辨率、高靈敏度和快速掃描的特點(diǎn),在多個(gè)學(xué)科領(lǐng)域中展現(xiàn)了廣泛的應(yīng)用前景。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步,它將在更加精細(xì)化的分析任務(wù)中發(fā)揮重要作用,推動(dòng)科學(xué)研究和工業(yè)應(yīng)用的不斷發(fā)展。
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- 2025-04-21 12:45:19飛行時(shí)間質(zhì)譜儀的作用是什么?
- 飛行時(shí)間質(zhì)譜儀的作用 飛行時(shí)間質(zhì)譜儀(TOF-MS,Time-of-Flight Mass Spectrometer)是一種高精度的分析儀器,廣泛應(yīng)用于化學(xué)、生物、環(huán)境、藥物等領(lǐng)域。它通過測量離子從源到檢測器所需的時(shí)間來確定離子的質(zhì)量與電荷比,從而實(shí)現(xiàn)對物質(zhì)成分的精確分析。飛行時(shí)間質(zhì)譜儀因其高分辨率、快速分析的特點(diǎn),成為現(xiàn)代科學(xué)研究中不可或缺的重要工具。本文將深入探討飛行時(shí)間質(zhì)譜儀的工作原理、作用及其在各個(gè)領(lǐng)域的應(yīng)用,揭示其在現(xiàn)代科學(xué)中的重要地位。 飛行時(shí)間質(zhì)譜儀的核心原理是基于質(zhì)量與電荷比(m/z)的關(guān)系。離子通過電場加速后進(jìn)入飛行管,在無外力作用的情況下,離子將按照不同的飛行速度到達(dá)檢測器。較輕的離子飛行速度較快,而較重的離子飛行速度較慢。通過檢測離子到達(dá)檢測器的時(shí)間,計(jì)算出離子的質(zhì)量與電荷比,從而實(shí)現(xiàn)對樣品中成分的分析。這一原理使得飛行時(shí)間質(zhì)譜儀在分析復(fù)雜樣品時(shí)具備了高靈敏度和高分辨率的優(yōu)勢。 飛行時(shí)間質(zhì)譜儀的應(yīng)用非常廣泛。在藥物研發(fā)和分析中,TOF-MS能夠幫助科學(xué)家快速分析藥物分子的結(jié)構(gòu),識別不同的同分異構(gòu)體,進(jìn)而加速新藥的研發(fā)進(jìn)程。TOF-MS可以為藥物代謝研究提供關(guān)鍵信息,識別體內(nèi)藥物的代謝產(chǎn)物,從而為藥物安全性評估提供數(shù)據(jù)支持。TOF-MS還能夠進(jìn)行生物標(biāo)志物的篩選,輔助醫(yī)學(xué)的發(fā)展。 在環(huán)境監(jiān)測領(lǐng)域,飛行時(shí)間質(zhì)譜儀也發(fā)揮著重要作用。通過TOF-MS,科學(xué)家可以檢測水體、空氣和土壤中的污染物,實(shí)時(shí)監(jiān)控環(huán)境污染情況。例如,TOF-MS可以用于分析重金屬、農(nóng)藥殘留、揮發(fā)性有機(jī)化合物等污染物,從而幫助環(huán)保部門制定有效的污染治理策略,保障環(huán)境質(zhì)量。 飛行時(shí)間質(zhì)譜儀在食品安全檢測中的應(yīng)用也越來越廣泛。隨著食品安全問題的日益嚴(yán)重,TOF-MS能夠快速、準(zhǔn)確地檢測出食品中的有害物質(zhì),包括農(nóng)藥殘留、添加劑和毒素等,確保食品的質(zhì)量和安全。由于TOF-MS能夠提供高通量分析,極大提高了食品安全檢測的效率和準(zhǔn)確性。 在生命科學(xué)領(lǐng)域,飛行時(shí)間質(zhì)譜儀的作用更是舉足輕重。它可以用于蛋白質(zhì)組學(xué)研究,通過精確測量蛋白質(zhì)的質(zhì)量,幫助研究人員揭示蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能。TOF-MS還可用于基因組學(xué)和代謝組學(xué)研究,揭示生物體內(nèi)的代謝過程,推動(dòng)疾病機(jī)制的研究及策略的制定。 飛行時(shí)間質(zhì)譜儀的優(yōu)勢不僅僅體現(xiàn)在其高分辨率、高靈敏度和快速分析上,還體現(xiàn)在其靈活的應(yīng)用范圍和較低的操作成本上。它能夠與其他分析技術(shù),如液相色譜(LC)或氣相色譜(GC)聯(lián)用,形成強(qiáng)大的分析平臺,進(jìn)一步擴(kuò)展其應(yīng)用領(lǐng)域。 飛行時(shí)間質(zhì)譜儀在科學(xué)研究和工業(yè)應(yīng)用中的作用越來越突出,特別是在生命科學(xué)、藥物研發(fā)、環(huán)境監(jiān)測和食品安全等領(lǐng)域,它都發(fā)揮了至關(guān)重要的作用。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步,飛行時(shí)間質(zhì)譜儀的性能將進(jìn)一步提高,其應(yīng)用領(lǐng)域也將不斷擴(kuò)展,成為科學(xué)技術(shù)發(fā)展的重要助力。
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- 2026-01-07 13:45:24能散型X射線熒光光譜儀怎么分析
- 能散型X射線熒光光譜儀(例如能散型XRF儀)在材料分析中的應(yīng)用愈發(fā)廣泛,已成為現(xiàn)代材料科學(xué)、環(huán)境檢測、地質(zhì)勘探和工業(yè)生產(chǎn)中不可或缺的分析工具。其核心優(yōu)勢在于非破壞性、快速、多元素同時(shí)檢測能力,極大地提高了分析效率與準(zhǔn)確性。本文將詳盡闡述能散型X射線熒光光譜儀的工作原理、分析流程、關(guān)鍵參數(shù)以及在實(shí)際應(yīng)用中的操作技巧,幫助用戶全面了解其在元素分析中的效能及應(yīng)用價(jià)值。 理解能散型XRF光譜儀的工作原理是掌握其分析過程的關(guān)鍵。該設(shè)備利用高能激發(fā)源對樣品發(fā)出X射線的方式,使樣品中的元素產(chǎn)生特征性的熒光X射線。能散型(或稱為強(qiáng)散型)表示儀器采用特殊的散射方式來優(yōu)化信號收集和背景,從而實(shí)現(xiàn)高靈敏度和高分辨率的元素檢測。這種散射技術(shù)能顯著減少背景噪聲,提高微量元素的檢測能力。其核心組成包括X射線管、樣品臺、探測器和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng),從激發(fā)到檢測全過程高度自動(dòng)化,確??焖佟?zhǔn)確的結(jié)果輸出。 在實(shí)際分析中,操作流程包括樣品準(zhǔn)備、儀器校準(zhǔn)、測量及數(shù)據(jù)處理。樣品應(yīng)盡可能均勻、干燥,表面平整,以保證熒光信號的穩(wěn)定性。校準(zhǔn)階段一般需使用標(biāo)準(zhǔn)樣品,建立元素濃度與信號強(qiáng)度的對應(yīng)關(guān)系,從而確保后續(xù)分析的性。測量時(shí),調(diào)整儀器參數(shù),比如激發(fā)電壓、管電流、測量時(shí)間,依據(jù)目標(biāo)元素的濃度范圍進(jìn)行優(yōu)化。數(shù)據(jù)采集完成后,軟件會(huì)對譜圖進(jìn)行分析,提取元素峰值、背景及其相關(guān)系數(shù),終得出元素含量。 影響能散型XRF分析準(zhǔn)確性的因素主要涉及儀器的校準(zhǔn)狀態(tài)、樣品的物理特性、測量環(huán)境以及分析軟件的算法。使用經(jīng)驗(yàn)豐富的操作者會(huì)通過反復(fù)校準(zhǔn)和樣品預(yù)處理取得更穩(wěn)定的結(jié)果。近年來,結(jié)合多語言數(shù)據(jù)處理和智能算法,設(shè)備的分析速度和精度進(jìn)一步提升,為復(fù)雜樣品的多元素同時(shí)檢測提供了技術(shù)保障。 在應(yīng)用方面,能散型XRF光譜儀尤其適合于礦產(chǎn)資源勘查、環(huán)境污染監(jiān)測、金屬材料分析和工業(yè)過程控制等領(lǐng)域。在礦產(chǎn)業(yè),能快速判別礦石中有價(jià)值的元素含量,指導(dǎo)采礦決策。在環(huán)境檢測中,可以有效探測土壤、水體中的重金屬污染,為環(huán)境治理提供重要依據(jù)。在制造業(yè),能監(jiān)控產(chǎn)品中的合金元素比例,確保質(zhì)量控制。該設(shè)備還廣泛作為科研工具,用于材料性能研究和新材料開發(fā)。 值得注意的是,能散型XRF光譜儀的未來發(fā)展趨勢在于硬件的微型化與智能化,配備更高靈敏度的探測器和多功能分析軟件,以適應(yīng)更加復(fù)雜的樣品分析需求。結(jié)合人工智能技術(shù),儀器將實(shí)現(xiàn)更智能的自動(dòng)校準(zhǔn)和誤差修正,極大地提升數(shù)據(jù)的可靠性和分析效率??缃缂?,如與手持式設(shè)備結(jié)合,將使現(xiàn)場檢測變得更加便捷靈活。 總結(jié)而言,能散型X射線熒光光譜儀以其快速、非破壞性、元素多樣性檢測能力在眾多行業(yè)中展現(xiàn)出巨大潛力。理解其工作原理和操作要領(lǐng),合理配置參數(shù),以及結(jié)合實(shí)際應(yīng)用需求進(jìn)行深入分析,是實(shí)現(xiàn)元素檢測與數(shù)據(jù)應(yīng)用的關(guān)鍵。隨著科技的不斷進(jìn)步,未來的能散型XRF儀器將會(huì)在性能、便攜性和智能化方面持續(xù)突破,為科研、工業(yè)與環(huán)境保護(hù)提供更強(qiáng)有力的技術(shù)支持。
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- 2024-08-14 09:42:36闊口吸頭與常規(guī)移液器吸頭的區(qū)別
- 闊口吸頭與常規(guī)移液器吸頭的區(qū)別 在實(shí)驗(yàn)室操作中都是不可或缺的工具,但它們在設(shè)計(jì)和使用上存在著一些顯著的區(qū)別。這些區(qū)別主要體現(xiàn)在吸頭的形狀、功能、使用范圍以及在某些特定應(yīng)用場景下的優(yōu)勢。下面跟隨BUNSEN本生技術(shù)小編來了解下: 1、從形狀上來看 闊口吸頭與常規(guī)移液器吸頭有著明顯的差異。常規(guī)移液器吸頭通常是的,這種設(shè)計(jì)使得吸頭能夠更地吸取和釋放液體,尤其在需要控制液體量的實(shí)驗(yàn)中,如PCR、凝膠電泳等。而闊口吸頭則具有更寬的開口,這種設(shè)計(jì)使得吸頭在吸取粘稠或顆粒物較多的液體時(shí)更為方便,能夠減少液體在吸頭內(nèi)部的殘留,從而提高實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和效率。 2、在功能上 闊口吸頭與常規(guī)移液器吸頭也各有側(cè)重。常規(guī)移液器吸頭主要用于液體的轉(zhuǎn)移和分配,適用于大多數(shù)常規(guī)實(shí)驗(yàn)。而闊口吸頭則更適用于吸取粘稠液體、顆粒物或細(xì)胞等,如細(xì)胞培養(yǎng)、蛋白質(zhì)沉淀等實(shí)驗(yàn)。在這些實(shí)驗(yàn)中,闊口吸頭能夠更有效地避免液體在吸頭內(nèi)部的殘留,從而減少對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾?! ?、在使用范圍上 闊口吸頭與常規(guī)移液器吸頭也有所不同。常規(guī)移液器吸頭通常適用于大多數(shù)移液器,具有廣泛的通用性。而闊口吸頭則可能需要根據(jù)不同的移液器型號進(jìn)行選擇,以確保其能夠適配并正常工作?! ≡谀承┨囟☉?yīng)用場景下,闊口吸頭相較于常規(guī)移液器吸頭具有顯著的優(yōu)勢。例如,在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中,由于細(xì)胞生長需要特殊的培養(yǎng)基和環(huán)境,因此液體的粘稠度和顆粒物含量較高。在這種情況下,使用闊口吸頭能夠更有效地吸取和轉(zhuǎn)移細(xì)胞懸液,減少對細(xì)胞的損傷和污染風(fēng)險(xiǎn)。同時(shí),闊口吸頭還能夠更好地適應(yīng)不同形狀和大小的容器,使得實(shí)驗(yàn)操作更為靈活和方便?! ∪欢@并不意味著闊口吸頭可以取代常規(guī)移液器吸頭。在某些需要控制液體量的實(shí)驗(yàn)中,如PCR、凝膠電泳等,常規(guī)移液器吸頭仍然是不可或缺的工具。因此,在選擇使用闊口吸頭還是常規(guī)移液器吸頭時(shí),需要根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)需求和應(yīng)用場景進(jìn)行判斷和選擇?! 】傊?,闊口吸頭與常規(guī)移液器吸頭在形狀、功能、使用范圍以及在某些特定應(yīng)用場景下的優(yōu)勢等方面存在著明顯的區(qū)別。了解這些區(qū)別并根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行選擇,有助于提高實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和效率,從而更好地推動(dòng)科研工作的進(jìn)展。
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- 2023-02-23 17:08:16分析型超速離心(AUC)文獻(xiàn)快報(bào)-2月刊
- Development of a SARS-CoV-2 Vaccine Candidate Using Plant-Based Manufacturing and a Tobacco Mosaic Virus-like Nano-Particle使用基于植物制造和煙草花葉病毒樣納米顆粒開發(fā)SARS-CoV-2候選疫苗發(fā)表日期:17 November 2021DOI:https://doi.org/10.3390/vaccines9111347摘要:穩(wěn)定、有效、易于制造的疫苗對于阻止由冠狀病毒 SARS-CoV-2 引起的 COVID-19 大流行至關(guān)重要。我們構(gòu)建了一種候選疫苗 CoV-RBD121-NP,它由刺突糖蛋白 (S) 的 SARS-CoV-2 受體結(jié)合域 (RBD) 與人 IgG1 Fc 域 (CoV-RBD121) 融合并結(jié)合到改良的煙草花葉病毒 (TMV) 納米顆粒上。在體外,CoV-RBD121與宿主病毒受體ACE2和單克隆抗體 CR3022 結(jié)合,CR3022 是一種阻斷S與 ACE2 結(jié)合的中和抗體。CoV-RBD121-NP候選疫苗保留了關(guān)鍵的SARS-CoV-2刺突蛋白表位,具有一致的安全性、一致性和強(qiáng)度,并且在 2–8°C 或 22–28°C下儲存 12 個(gè)月時(shí)顯示出穩(wěn)定的效力。免疫原性研究表明,在使用非佐劑或佐劑 (7909 CpG)后,C57BL/6小鼠產(chǎn)生了強(qiáng)烈的抗體反應(yīng)。非佐劑疫苗誘導(dǎo)了平衡的 Th1/Th2 反應(yīng)和識別 SARS2-CoV-2 的 S1 結(jié)構(gòu)域和完整 S 蛋白的抗體,而佐劑疫苗誘導(dǎo)了 Th1 偏向反應(yīng)。佐劑和非佐劑疫苗均誘導(dǎo)病毒中和滴度,如通過三種不同的測定法所測量的??偟膩碚f,這些數(shù)據(jù)表明,通過 SARS-CoV-2 RBD 與 TMV 樣納米顆粒的結(jié)合,可以生產(chǎn)穩(wěn)定的 COVID-19 候選疫苗。儀器型號:ProteomeLab XL-A 分析超速離心機(jī)、AN-50Ti轉(zhuǎn)子CoV-RBD121-NP 的物理特性(A)TMV Ntk病毒體和CoV-RBD121-NP(與抗原結(jié)合后的病毒體)的透射電子顯微鏡結(jié)果。黃色箭頭表示結(jié)合抗原的位置)。比例尺 = 200 納米。(B) CoV-RBD121-NP 在釋放時(shí)以及在 2–8 °C下儲存后1個(gè)月和3個(gè)月的大小分布。根據(jù)分析超速離心(AUC)后的曲線下面積計(jì)算分布。(C) CoV-RBD121-NP在2-8 °C或22-28 °C下儲存后6個(gè)月或12個(gè)月的尺寸分布?;贏UC分析的百分含量。AUC實(shí)驗(yàn)條件:將 TMV NtK 和結(jié)合疫苗稀釋至目標(biāo)濃度,并使用光程為12 mm的2通道樹脂中心件,將樣品加載到樣品池中。加載的樣品池被放置在AN-50Ti轉(zhuǎn)子中,并在Beckman-Coulter ProteomeLab XL-A 分析超速離心機(jī)中以 9000rpm 的速度分離。每 4 分鐘記錄一次掃描,持續(xù)4 小時(shí)(每個(gè)樣本 60 次掃描)。數(shù)據(jù)使用 SEDFIT (vs. 11.3) 軟件(美國國立衛(wèi)生研究院,貝塞斯達(dá),馬里蘭州,美國)進(jìn)行分析。勾選f/f0 值擬合,以找到每個(gè)樣本數(shù)據(jù)最適合的擬合結(jié)果。使用的置信區(qū)間為0.683,勾選擬合time-invariant noise。使用 OriginLab Origin vs. 9.0.0(OriginLab, Northampton, MA, USA)繪制所得尺寸分布圖,并對峰積分。REFERENCERoyal JM, Simpson CA, McCormick AA, Phillips A, Hume S, Morton J, Shepherd J, Oh Y, Swope K, DeBeauchamp JL, Webby RJ, Cross RW, Borisevich V, Geisbert TW, Demarco JK, Bratcher B, Haydon H, Pogue GP. Development of a SARS-CoV-2 Vaccine Candidate Using Plant-Based Manufacturing and a Tobacco Mosaic Virus-like Nano-Particle. Vaccines (Basel). 2021 Nov 17;9(11):1347.Subunit Flexibility of Multimeric von Willebrand Factor/Factor VIII Complexes多聚血管性血友病因子/因子VIII復(fù)合物的亞基柔韌性作者:Ernest T. Parker, Sandra L. Haberichter, and Pete Lollar發(fā)表日期:25 August 2022DOI: https://doi.org/10.1021/acsomega.2c03389摘要:血管性血友病因子(VWF)是一種參與血小板粘附和聚集的血漿糖蛋白,是凝血因子VIII (blood coagulation factor VIII, fVIII)的載體。血漿VWF由多聚體組成,分子量從~ 0.55 MDa到10 MDa以上。VWF多聚物由一個(gè)可變數(shù)量的二硫連接~ 275 kDa的子基組成。本文在pH為7.4的條件下,用色譜法對血漿源性人VWF/fVIII配合物進(jìn)行分離,并對其進(jìn)行凝膠電泳、沉降速率法分析超離心(SV AUC)、動(dòng)態(tài)光散射(DLS)和多角度光散射(MALS)檢測。本研究結(jié)果與非流動(dòng)條件下VWF多聚物模型的結(jié)果一致,在非流動(dòng)條件下,多聚物具有顯著的靈活性。對于同源系列聚合物,如VWF多聚體的分布,分子質(zhì)量與回轉(zhuǎn)半徑、沉降系數(shù)或用擴(kuò)散系數(shù)作為大分子的診斷指標(biāo)構(gòu)象。目的:表征VWF多聚物型號:Beckman?Coulter XLI實(shí)驗(yàn)條件:20°C,上樣量400uL, 吸光度280nm, 使用sedfit進(jìn)行分析,置信區(qū)間設(shè)置0.68實(shí)驗(yàn)結(jié)果:圖1:sepacryl S-1000 VWF/FVIII樣品, 280 nm處從左到右的吸光度掃描原始數(shù)據(jù)圖2:c(s) 模型擬合后得數(shù)據(jù),樣品1 (藍(lán)色), 9 (綠色), 13 (紅色)圖3:VWF/fVIII Complexes 的SV AUC數(shù)據(jù)匯總BibliographyParker, E.T., Heritier, S.L. and Lollar, P., 2022. Subunit flexibility of multimeric von Willebrand factor/factor VIII complexes. ACS omega, 7(35), pp.31183-31196.SV-AUC as a stability-indicating method for the characterization of mRNA-LNPsSV-AUC作為一種表征mRNA-LNPs穩(wěn)定性的可行方法發(fā)表日期:14 November 2022DOI:doi.org/10.1016/j.ejpb.2022.11.014摘要:在SARS-CoV2大流行期間,以包裹mRNA的脂質(zhì)納米顆粒(LNPs)形式生產(chǎn)的mRNA疫苗,開創(chuàng)了一個(gè)新的疫苗領(lǐng)域。對于LNPs大小和結(jié)構(gòu)變化進(jìn)行定量分析是至關(guān)重要的,因?yàn)檫@些參數(shù)的變化可能對疫苗的效價(jià)產(chǎn)生影響。本項(xiàng)研究中,我們使用分析超離心機(jī),以沉降速度 (SV-AUC)的方法對mRNA-LNP疫苗在相關(guān)應(yīng)激因素(凍融、熱、機(jī)械應(yīng)力等)作用下的結(jié)構(gòu)變化進(jìn)行了穩(wěn)定性定量分析,同時(shí)對比了DLS的相關(guān)數(shù)據(jù)。DLS能夠準(zhǔn)確的對mRNA-LNPs的大小和均一性進(jìn)行表征。在壓力因素下,如凍融和機(jī)械應(yīng)力的作用下,DLS和SV-AUC都能檢測到顆粒粒徑和大顆粒物含量的增加。而50℃熱應(yīng)力的變化僅通過SV-AUC浮選的速率的變化被檢測到。此外,SV-AUC可以觀察到顆粒密度的變化,這是DLS無法檢測到的。總之,SV-AUC是一種很有價(jià)值的mRNA-LNPs穩(wěn)定性定量表征方法。目的:表征mRNA-LNPs的應(yīng)激穩(wěn)定性儀器型號:Optima AUC,AN-50 Ti轉(zhuǎn)子SV-AUC對mRNA-LNPs進(jìn)行表征數(shù)據(jù)不同應(yīng)激條件下,通過SV-AUC對主峰和高分子量峰1進(jìn)行量化。實(shí)驗(yàn)條件:20℃下,將樣品和buffer溶液放入帶藍(lán)寶石窗口的雙區(qū)中心件,在AN 50-Ti 轉(zhuǎn)子上以每分鐘 10,000 轉(zhuǎn)下進(jìn)行離心,檢測260 nm and 280 nm吸收峰,檢測間隔120 s,檢測間隔10 μm。使用UltraScan III對前95條數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,使用2DSA模型,對時(shí)間和徑向噪音進(jìn)行擬合。在最 終的擬合計(jì)算中,使用CSA-SL-MC模型,選擇范圍:1 S到 200 S (主峰), 200 S到1200 S(高分子量峰1) ,1200 S到2000 S (高分子量峰2)。通過計(jì)算得到加權(quán)平均沉降系數(shù)和摩擦系數(shù)比(f/f0),以及相對含量。REFERENCEE. Brookes, W. Cao, B. Demeler, A two-dimensional spectrum analysis for sedimentation velocity experiments of mixtures with heterogeneity in molecular weight and shape, Eur. Biophys. J. 39 (3) (2010) 405–414.
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