ELISA即酶聯(lián)免疫吸附試驗,是一種常用的固相酶免疫測定方法Engvall 和Perlmann于1971年Zxian應用該法進行了IgG定量測定,并命名為"enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)" ELISA的基本原理是:
使抗原(或抗體)結合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性;
使抗原(或抗體)與某種酶聯(lián)結成酶標抗原(或抗體),而且此酶標抗原(或抗體)既保留其免疫活性,又保留其酶活性;
測定時將受檢標本(抗體或抗原)和酶標抗原(或抗體)按不同步驟與固相載體表面的抗原或抗體進行反應,再用洗滌方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與其它物質分開,Z后結合在固相載體上的酶量與標本中受檢的抗體或抗原量成一定比例;再加入酶反應底物后,底物被酶催化后變?yōu)橛猩a物,根據(jù)其顏色反應的深淺進行定性或定量分析,以了解被測標本中抗體或抗原含量
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在臨床檢驗中除正常反應外,有時??梢姷揭恍╁e誤結果(即假陽性或假陰性結果)引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:
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