一、應用概述

對可重復使用的Teledyne ISCO RediSep Silver反相C18和RediSep Gold?高性能C18、C18Aq及C8色譜柱進行適當?shù)念A處理、清洗和儲存，有助于延長柱子壽命并提高其一致性和可靠性。

二、通用方法

初始預處理

在使用前，用六倍柱體積（CV）的1:1水：乙腈沖洗柱子。或者，通過柱子泵入兩倍柱體積的100%乙腈，然后蓋上蓋子存放一小時后再使用。有關柱體積數(shù)據，請參見表1。

表1：色譜柱數(shù)據

樣品負載能力

色譜柱上的樣品負載應為柱介質重量的0.1%到2%。

運行后維護

在適當?shù)木S護下，RediSep C18色譜柱可以使用三十次或更多。反相方法應該編寫成在分離結束時，用2-4倍柱體積（CV）的高比例（100%）有機溶劑（B溶劑）沖洗柱子。經過2-4 CV的沖洗后，可以將有機溶劑的比例恢復到初始條件并沖洗2-3 CV，以準備下一次運行的柱子平衡條件（見圖1）。或者，可以將有機溶劑的比例改為80%，以便為色譜柱存儲做準備。

圖1. 運行后色譜柱沖洗

三、存儲

C18色譜柱可以長時間存儲而不會損失性能。以下是反相C18色譜柱存儲的一些通用規(guī)則：

? 一旦潤濕后，切勿讓反相色譜柱干燥。這將由于固定相的膨脹和收縮而導致通道效應。如果Flash色譜系統(tǒng)上有空氣吹掃功能，應關閉該功能。

? 將色譜柱濕潤并蓋好，存儲在含有10-30%水和70-90%有機溶劑（如乙腈、甲醇或乙醇）的環(huán)境中。

四、總結

在使用前預處理色譜柱。用高比例（100%）有機溶劑清潔色譜柱。切勿讓色譜柱干燥，并以70-90%有機溶劑濕潤和蓋好存儲。

標簽：反相色譜柱C18預處理步驟