蜂膠楊樹葉及楊樹芽中水楊苷和蘆丁6種用量比較 蜂膠是意蜂采集楊樹等植物的新生枝芽和愈傷組織的分泌物，并混入蜂蠟等其自身分泌物所形成的一種黏性物質(zhì)2005版ZG藥典開始收錄蜂膠市場(chǎng)上有人將楊樹葉芽等粉末摻人蜂膠中，得到的劣質(zhì)蜂膠在顏色氣味形狀上都與真蜂膠十分相似，給蜂膠的鑒定工作帶來(lái)了困難本文對(duì)蜂膠及楊樹葉芽中的水楊苷和蘆丁兩種糖苷的含量進(jìn)行了HPLC測(cè)定和比較 一儀器與試藥 GX液相色譜儀；超聲波清洗儀；對(duì)照品，蘆丁(ZG藥品生物制品鑒定所)，水楊苷乙醇，甲醇；水(純凈水) 蜂膠樣品10個(gè)，農(nóng)業(yè)科學(xué)院蜜蜂研究所提供楊樹芽樣品4個(gè)，分別為楊柳科植物毛白楊PopulustomentosaCarr．北京楊Populusxbei極ngensis銀白楊PopulusalbaLinn．和加拿大楊PopulusCanadensisMoench的葉，楊樹芽為加拿大楊的新生芽，采自藥植所植物園，本所標(biāo)本館米泰康先生鑒定 二方法與結(jié)果 1．供試品溶液制備 蜂膠楊樹芽樣品：取0．5g，精密稱定，置于100mL容量瓶中，加入50％L醇，超聲提取30rain，靜置，以50％L醇稀釋至刻度，過(guò)濾，備用 楊樹葉樣品：取1g，精密稱定，置于100mL容量瓶中，加入50％乙醇，超聲提取30rain，靜置，以50％乙醇稀釋至刻度精密吸取上清液10mL于蒸發(fā)皿中，水浴揮干，殘?jiān)蒙倭?0％乙醇溶解轉(zhuǎn)移，定溶至lmL，過(guò)濾，備用 2．對(duì)照品溶液的制備 分別精密稱取水楊苷和蘆丁對(duì)照品12．3mg和10．0mg置于10mL容量瓶中，加50％乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，備用 3．色譜條件 KromasilC185250x4．9mm；檢測(cè)波長(zhǎng)：268nm；柱溫：25；流速：lmL／min流動(dòng)相：甲醇-1．5％磷酸梯度洗脫時(shí)間(min)[甲醇％(v／v)]如下：0[9]，30[1]]，40[35]，70[35]，71[100]，85[100] 4．線性關(guān)系考察 分別精密吸取對(duì)照品溶液1，3，5，7，10／l注入GX液相色譜儀，按照上述色譜條件測(cè)定色譜峰面積(A)與進(jìn)樣量(C)有良好的線性關(guān)系水楊苷的線性方程為： Y=81497x+9606．6，r=0．9996蘆丁的線性方程為：Y=699220x+117415，r=0．9998結(jié)果表明，水楊苷和蘆丁分別在1．23~12．3~g和1．O~lO．O／xg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好 5．精密度試驗(yàn) 精密吸取對(duì)照品溶液10tzl注入GX液相色譜儀中，重復(fù)5次，結(jié)果水楊苷和蘆丁的峰面積平均值分別為1．003×106和7．083X106，RSD分別為1．6％和2．0％表明該方法精密度較好 6．重復(fù)性試驗(yàn) 平行制備5份加拿大楊樹葉樣品溶液，按照上述方法測(cè)定含量，3次測(cè)定的水楊苷和蘆丁的平均值分別為：4．5％和3．8％，RSD分別為1．4％和1．8％，該結(jié)果表明本法具有很好的重復(fù)性 7．回收率實(shí)驗(yàn) 精密稱取5份加拿大楊葉樣品各0．5g，分別置于lOOmL量瓶中，加入水楊苷和蘆丁對(duì)照品適量，加50％乙醇超聲溶解并稀釋至刻度，搖勻準(zhǔn)確吸取樣品溶液101xl，注入GX液相色譜儀中(見表1表2) 8．含量測(cè)定 精密吸取10種蜂膠樣品4種楊樹葉樣品及1種楊樹芽樣品溶液各lOtxl，注入GX液相色譜儀，記錄峰面積，按外標(biāo)法計(jì)算水楊苷和蘆丁含量在10個(gè)蜂膠樣品中均未檢出水楊苷和蘆丁楊樹葉楊樹芽樣品中檢出水楊苷和蘆丁 三結(jié)果與討論 本試驗(yàn)對(duì)蜂膠及楊樹葉芽中的水楊苷和蘆丁兩種糖苷的含量進(jìn)行了HPLC測(cè)定結(jié)果，在蜂膠樣品中均沒有檢測(cè)出這兩種糖苷 在毛膠中直接摻入楊樹葉或楊樹芽粉末是一種比較常見的蜂膠摻假方法本試驗(yàn)方法可用于檢出直接摻有楊樹葉或者芽粉末的摻假蜂膠 通過(guò)前期文獻(xiàn)調(diào)研，發(fā)現(xiàn)在幾乎所有(僅1個(gè)例外)的蜂膠化學(xué)成分研究的文獻(xiàn)中，均沒有從蜂膠中分離得到苷類化合物的報(bào)道因此我們提出，在蜂膠中可能不含有苷類物質(zhì)本文從實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)上支持了上述觀點(diǎn)此外，有文獻(xiàn)報(bào)道f21從蜜蜂咽下腺和蜂蜜中均分離得到糖苷酶綜合分析上述情況，我們認(rèn)為，在蜜蜂采集加工蜂膠的過(guò)程中，膠原植物中的苷類物質(zhì)被其分泌的糖苷酶水解成了苷元 在我國(guó)蜂膠的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中，對(duì)蜂膠中黃酮類物質(zhì)的測(cè)定，采用了比色法和GX液相色譜法，都以蘆丁(槲皮素一3一蕓香糖苷)作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)這些方法值得商榷 EX1600液相色譜儀