光透明技術(shù)是一種讓生物組織具有光學(xué)透明性的新型技術(shù)。而正常的生物組織中成分復(fù)雜，如蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和血紅素等物質(zhì)對(duì)光的傳播造成阻礙。光透明技術(shù)就是使用一種試劑或幾種試劑組成的混合液通過(guò)浸泡、電泳或灌注等處理方式,使大塊組織或完整器官達(dá)到視覺下透明或光學(xué)儀器下可見的效果。

LSI VTC離體光透明法

通過(guò)結(jié)合多種熒光標(biāo)記手段及光片照明成像，LSI VTC方法可以實(shí)現(xiàn)小鼠全腦及胚胎的三維神經(jīng)結(jié)構(gòu)信息的獲取。同時(shí)，LSI VTC方法對(duì)脂溶性膜染料Dil良好的兼容性，使得其能夠?qū)崿F(xiàn)正常小鼠腦、脊髓、脾等多種組織器官的三維血管網(wǎng)的重構(gòu)，以及糖尿病小鼠腎小球病理結(jié)構(gòu)的三維可視化和定量統(tǒng)計(jì)分析。LSI VTC所具備的快速透明能力、對(duì)包括脂溶性染料在內(nèi)的多種熒光色團(tuán)的兼容性及良好的形態(tài)保持等優(yōu)勢(shì)，有望為多種組織器官的形態(tài)學(xué)與病理學(xué)研究提供重要的工具。

LSI VFC離體光透明法

LSI VFC方法結(jié)合光片照明成像可以實(shí)現(xiàn)小鼠全腦、肌肉、腎臟等多種完整器官的神經(jīng)與血管成像。由于其優(yōu)秀的透明及熒光保持能力，LSI VFC方法在大體積生物組織透明成像上具有顯著的優(yōu)勢(shì)，并且在透明生物組織的長(zhǎng)期重復(fù)成像和弱熒光信號(hào)成像上具有極大的應(yīng)用價(jià)值。

激光片層掃描成像方案

光片顯微鏡與傳統(tǒng)顯微鏡的不同在于激發(fā)光的照明方式。它的照明光是一張與成像面平行的薄薄的“光片”，只有焦平面的樣品被照亮，而其上下的樣品不受影響。

激光片層掃描成像技術(shù)優(yōu)勢(shì)：

提高了圖像和背景的反差(Signal-to-Background Ratio) 和軸向分辨率：光片照明技術(shù)保證了焦平面上下的樣品不會(huì)被激發(fā)，具備和共聚焦顯微鏡類似的光學(xué)切片功能；

減少了光漂白和光毒性：與傳統(tǒng)的熒光照明技術(shù)相比，光毒性可以被降低20-100倍，這樣就能在更接近生理狀態(tài)的條件下，對(duì)活體生物樣品進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間的三維成像；與激光共聚焦和雙光子顯微鏡使用低QE的PMT的點(diǎn)掃描成像相比，光片顯微鏡使用高QE的CCD或sCMOS相機(jī)進(jìn)行面成像，大大提高了成像速度和圖像的信噪比。共聚焦需要幾分鐘甚至幾小時(shí)才能拍完的樣品，用光片顯微鏡只需要幾秒到幾分鐘。因此，光片顯微鏡也特別適合用于大樣品成像。

微循環(huán)光透明成像應(yīng)用：

動(dòng)物胚胎：光透明介觀顯微技術(shù)在神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域的經(jīng)典應(yīng)用為外周神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育，同時(shí)可進(jìn)行亞細(xì)胞分辨率的完整哺乳動(dòng)物大腦及微循環(huán)三維介觀形態(tài)學(xué)圖譜等研究。

腦及微循環(huán)血管三維成像