樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心胸腹水腦脊液參照實行
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)仔細收集上清檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右通過反復(fù)凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)仔細收集上清保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量加入一定量的PBS,PH7.4用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆脴?biāo)本融化后仍然保持2-8的溫度加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)仔細收集上清分裝后一份待檢測,其余冷凍備用
6. 標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性
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