精彩回顧

上期分享我們深度探討了聚維酮中雜質(zhì) N-乙烯-2-吡咯烷酮的解決方案，了解到 2025 版《中國(guó)藥典》、USP、EP 中 N-乙烯-2-吡咯烷酮分析方法完全一致，而 USP、EP 方法中最大的特點(diǎn)是通過(guò)閥切換對(duì)樣品進(jìn)行在線預(yù)處理，從而實(shí)現(xiàn)樣品在線凈化。

本期我們將繼續(xù)以 2025 版《中國(guó)藥典》更新的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)為基礎(chǔ)，同時(shí)參考 USP 和 EP 標(biāo)準(zhǔn)方法，探討聚維酮中另一液相檢查項(xiàng) 2-吡咯烷酮解決方案。

各國(guó)藥典標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比

對(duì)比各國(guó)藥典中 2-吡咯烷酮檢測(cè)方法，我們發(fā)現(xiàn) USP 和 EP 的色譜條件完全一致，并且均采用在線自動(dòng)閥切換方案反沖預(yù)柱（Online SPE）；相比之下，中國(guó)藥典色譜條件差異較大：未提及預(yù)柱反沖方案，其流動(dòng)相組成、系統(tǒng)適應(yīng)性要求略有不同，對(duì)照液濃度、進(jìn)樣體積等條件不同。

中國(guó)藥典、USP 和 EP 具體方法對(duì)比如下：

方案一：參照 25 版《中國(guó)藥典》方法，設(shè)置如下液相分析方法：

分析系統(tǒng)：

色譜條件：

在此條件下，運(yùn)行 2-吡咯烷酮對(duì)照溶液和聚維酮樣品溶液，結(jié)果如下：對(duì)照溶液 2-吡咯烷酮（2-VP）連續(xù)運(yùn)行 6 針，峰面積 RSD% 為 0.08%，符合藥典 2.0% 以?xún)?nèi)的限度要求；對(duì)照系列溶液在（10.06-120.60）μg/mL 濃度范圍內(nèi)線性良好（r>0.9999）。

圖 1. 2-吡咯烷酮對(duì)照溶液色譜圖和精密度結(jié)果

圖 2. 2-吡咯烷酮線性溶液色譜圖和標(biāo)準(zhǔn)曲線（r=0.99991）

圖 3. 2025 版藥典聚維酮樣品溶液色譜圖

綜合上述數(shù)據(jù)得出：按照 25 版中國(guó)藥典方法測(cè)試聚維酮樣品，可有效分析雜質(zhì) 2-吡咯烷酮。

在 USP、EP 收載的標(biāo)準(zhǔn)方法中，2-吡咯烷酮采用 OnlineSPE 功能，先將主成分聚維酮保留在預(yù)柱中，通過(guò)閥切換，實(shí)現(xiàn)分析柱測(cè)試樣品中雜質(zhì)組分，主成分聚維酮被流動(dòng)相反沖至廢液，有效保護(hù)了色譜柱。

方案二：USP、EP OnlineSPE 色譜方法：

分析系統(tǒng)：

清洗系統(tǒng)：

色譜條件：

圖 4. 閥切換示意圖（切閥時(shí)間：2 分鐘）

在 USP、EP 方法條件下，運(yùn)行 2-吡咯烷酮對(duì)照溶液和聚維酮樣品溶液，結(jié)果如下：2-吡咯烷酮（2-VP）對(duì)照液連續(xù)運(yùn)行 6 針，其峰面積和保留時(shí)間的精密度均在 0.2% 以?xún)?nèi)，峰拖尾因子 1.4，符合藥典要求。

圖 5. 對(duì)照溶液色譜圖和精密度結(jié)果

圖 6. OnlineSPE 法聚維酮樣品溶液色譜圖

按照 USP、EP 標(biāo)準(zhǔn)方法測(cè)試聚維酮樣品（不切閥），在 2-吡咯烷酮雜質(zhì)出峰后，流動(dòng)相設(shè)置為梯度洗脫，如下圖色譜圖所示，在高比例有機(jī)相條件下，可將吸附在色譜柱中的主成分洗脫出來(lái)，由此證明：在當(dāng)前藥典條件下，沒(méi)有 OnlineSPE 樣品在線處理時(shí)，色譜柱中吸附了高濃度的低極性組分，長(zhǎng)此以往使用，將會(huì)嚴(yán)重?fù)p害色譜柱壽命。

圖 7. 聚維酮樣品色譜圖

以聚維酮樣品 K25 為例，采用 USP、EP 不切閥方案和 OnlineSPE 方案對(duì)比研究發(fā)現(xiàn)：相同樣品，兩種方案所得雜質(zhì)峰面積一致，證明 OnlineSPE 方案對(duì)雜質(zhì)分析無(wú)損失，結(jié)果真實(shí)可靠；同時(shí)，采用在線自動(dòng)閥切換方案對(duì)樣品進(jìn)行 OnlineSPE 處理，去除不需要的主成分至廢液，保留雜質(zhì)組分進(jìn)行分析測(cè)試，真正達(dá)到了降低液相分析系統(tǒng)和色譜柱損耗的效果。

結(jié)語(yǔ)

采用《中國(guó)藥典》收載方法，搭配 Agilent XDB-C18 色譜柱，對(duì)聚維酮中雜質(zhì) 2-吡咯烷酮進(jìn)行測(cè)試，結(jié)果符合藥典規(guī)定。

USP、EP 中的 OnlineSPE 聯(lián)合分析測(cè)試方案，可將預(yù)柱中聚維酮組分反沖至廢液。該方案在不改變藥典既定方法的基礎(chǔ)上，增加 OnlineSPE 樣品處理步驟，其分析方法和藥典要求完全一致。OnlineSPE 方案的優(yōu)勢(shì)在于，既能保護(hù)液相分析系統(tǒng)免受污染，又能精準(zhǔn)重現(xiàn)藥典方法的分析結(jié)果，真正實(shí)現(xiàn)了凈化系統(tǒng)和有“法”可依的雙贏效果。

標(biāo)簽：1260 Infinity III 四元泵