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這篇由云南師范大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院的研究學(xué)者完成,討論脂肪酶生物印跡與交聯(lián)的研究的論文,發(fā)表在重要期刊《工業(yè)催化》上。
該文以脂肪酶為印跡對象,首先對脂肪酶進行了生物印跡,然后對印跡的脂肪酶進行了乙 ?;徒宦?lián),用三硝基苯磺酸( TNBS)法檢測?;徒宦?lián)的程度。結(jié)果表明,?;徒宦?lián)后游離氨 基數(shù)減少,說明有部分氨基參與了乙?;褂≯E酶的交聯(lián)成為可能,同時交聯(lián)酶結(jié)構(gòu)穩(wěn)定、不易失活、活性明顯高于乙?;?。

圖1/2↑

圖2/2↑
結(jié)論
通過本實驗發(fā)現(xiàn)交聯(lián)印跡能降低酶的柔韌性,提高酶的剛性,增加酶對溫度的耐受能力,同時交聯(lián)―印跡酶活性明顯高于乙?;?,推測可能是交聯(lián)印跡后酶的構(gòu)象被固定,結(jié)構(gòu)穩(wěn)定、不易失活,從而使交聯(lián)―印跡酶的酶促反應(yīng)速率大大加快。
15 mg 脂肪酶溶于0.5 mL 己烷溶液中,振蕩得懸液,在懸液中依次加入 0.25 mL 交聯(lián)劑 EDMA 和 4 mg 引發(fā)劑偶氮二異 丁 腈(AIBN),在4℃,366 nm 紫外光照5 h,使其發(fā)生共聚作用。用 0.5 mL 己烷洗滌共聚物 3 次,ZH將交聯(lián)印跡酶真空干燥 2 小時,即得交聯(lián)印跡酶(CLIE)。
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