紫外可見分光光度計(jì)
熒光檢測(cè)分析用干涉濾光片的透光率

摘要:熒光檢測(cè)分析用干涉濾光片包括激發(fā)濾光片(exciter filter,EX)、發(fā)射濾光片(emission filter,EM)、分色鏡(dichroic mirror,DM)等。本文依據(jù)《JB T 13360-2018 熒光檢測(cè)分析用干涉濾光片》使用普析T10紫外可見分光光度計(jì)對(duì)濾光片、發(fā)射濾光片等進(jìn)行透過率和背景截止度的測(cè)定。結(jié)果表明:T10測(cè)試結(jié)果穩(wěn)定、重復(fù)性好,滿足熒光檢測(cè)分析用濾光片的鑒定測(cè)試要求。
關(guān)鍵詞:紫外可見分光光度計(jì);熒光濾光片;透過率;截止度
熒光檢測(cè)分析用干涉濾光片是熒光檢測(cè)器中的最重要的光學(xué)器件,濾光片組合對(duì)信噪比起至關(guān)重要的作用。同時(shí)濾光片的質(zhì)量、優(yōu)劣也影響了儀器整體的性能,所用對(duì)熒光檢測(cè)分析用干涉濾光片的質(zhì)量測(cè)試成為生產(chǎn)制造熒光檢測(cè)設(shè)備必要的環(huán)節(jié)。
本文依據(jù)《JB T 13360-2018 熒光檢測(cè)分析用干涉濾光片》使用T10紫外可見分光光度計(jì)及可變角度附件對(duì)熒光分析用干涉濾光片進(jìn)行檢定,可以用于對(duì)熒光分析用干涉濾光片光學(xué)性能的檢驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)方法
1.1儀器設(shè)備
T10紫外可見分光光度計(jì)
附件:可變角度樣品架
1.2測(cè)試條件
1.2.1通帶透過率測(cè)試條件
波長(zhǎng)范圍:300nm~900nm
測(cè)試模式:T%
光譜帶寬:0.2nm
掃描間隔:0.2nm
掃描速度:中速
分色鏡:測(cè)試光入射角45°
1.2.2截止帶背景截止度條件
波長(zhǎng)范圍:300nm~900nm
測(cè)試模式:Abs
光譜帶寬:0.5nm
掃描間隔:2nm
掃描速度:中速
1.3樣品
激發(fā)濾光片(長(zhǎng)8.0mm寬5.5mm厚0.6mm);

發(fā)射濾光片(長(zhǎng)8.0mm寬5.4mm厚0.6mm);

分色鏡(長(zhǎng)8.0mm寬6.4mm厚0.6mm)

結(jié)果與分析
2.1透光率測(cè)試
(1)激發(fā)濾光片0°角透過率譜圖(圖2-1):
透過率>90%范圍:378.4nm~583.8nm
50%截止波長(zhǎng):586nm
中心波長(zhǎng):481.1nm

圖2-1 激發(fā)濾光片使用T10掃描0°角透過率譜圖
(2)發(fā)射濾光片0°角透過率譜圖(圖2-2)
透過率>90%范圍 :610.2nm~860nm ;
50%截止波長(zhǎng):607.2nm

圖2-2 發(fā)射濾光片使用T10掃描0°角透過率譜圖
(3)分色鏡45°角透過率譜圖(圖2-2)
平均透過率>85%范圍 :670nm~820nm ;
50%截止波長(zhǎng):638.8nm

圖2-3 分色鏡使用T10掃描45°角透過率譜圖
2.2截止帶背景截止度測(cè)試
(1)激發(fā)濾光片吸光值譜圖(圖2-4):
OD大于4范圍:596nm~855nm

圖2-4激發(fā)濾光片使用T10掃描吸光值譜圖
(2)發(fā)射色濾光片吸光值譜圖(圖2-5):
OD大于4范圍:475nm~590nm

圖2-5 藍(lán)綠色濾光片使用T10掃描吸光值譜圖
2.3重復(fù)性測(cè)試
(1)濾光片透過率重復(fù)性測(cè)數(shù)據(jù)(表2-1)


圖2-6 發(fā)射濾光片掃描透過率重復(fù)性譜圖
(2)濾光片背景截止度重復(fù)性測(cè)數(shù)據(jù)(表2-2)


圖2-7 發(fā)射濾光片掃描吸光值重復(fù)性譜圖
討論
本文依據(jù)《JB T 13360-2018 熒光檢測(cè)分析用干涉濾光片》,使用低雜散光紫外可見分光光度計(jì)T10及可變角度附件對(duì)I型熒光分析用干涉濾光片的通帶透過率(要求激發(fā)濾光片和發(fā)射濾光片0°入射透過率>90%;分色鏡45°入射透過率>85%)、截止帶背景截止度(要求OD值>4)進(jìn)行檢定,結(jié)果準(zhǔn)確,重復(fù)性好。在0.2nm光譜帶寬的條件下噪音小,在OD值大于4時(shí)的結(jié)果依然準(zhǔn)確,可以有效滿足對(duì)熒光分析用干涉濾光片光學(xué)性能的檢驗(yàn)的要求。
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