實時熒光定量PCR (Quantitative Real-time PCR)是一種在DNA擴增反應(yīng)中,以熒光化學物質(zhì)測每次聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)循環(huán)后產(chǎn)物總量的方法。通過內(nèi)參或者外參法對待測樣品中的特定DNA序列進行定量分析的方法。下面就讓小編帶你了解一下實時熒光PCR儀的分類、性能以及應(yīng)用。
分類
各孔獨立控溫的定量PCR儀
不同樣品槽的智能升降溫系統(tǒng)相對獨立,各孔控溫獨立,對于多指標快速檢測非常的合適。
六個樣品模塊能夠同時由一臺儀器操作,不但使得高速批量的要求得到了滿足,而且能夠靈活運用,還能夠使任意的梯度反應(yīng)得以實現(xiàn)。
但其和傳統(tǒng)方法相比,上樣不是太方便,需要獨特的扁平反應(yīng)管,有很高的使用成本。

離心式實時定量PCR儀
離心式實時定量PCR儀溫度有較好的均一性,使用的是相同的檢測器和激發(fā)光源,能夠隨時對旋轉(zhuǎn)到跟前的樣品進行檢測。使得系統(tǒng)的誤差得到了有效的減少。
金屬板式實時定量PCR儀
金屬板式實時定量PCR儀能夠被當做普通的PCR儀使用,能夠帶梯度功能,不需要特殊的耗材,能夠?qū)Υ髷?shù)量的樣本進行容納。溫度不能夠做到很好的均衡。有邊緣效應(yīng)。很難做到和樣品完全相同的標準曲線的反應(yīng)條件。
性能
溫度控制:溫度的準確性、溫度的均一性、升降溫的速度、不同模式下相同溫度特性。
熒光檢測系統(tǒng):激發(fā)光源(鹵鎢燈光源和發(fā)光二極管)以及檢測器(超低溫CCD和光電倍增管)。
軟件:設(shè)計簡單,人性化,容易學習和使用,具備和能夠免費升級實時信息顯示、記憶存儲、自動、自動斷電保護等功能。
應(yīng)用
感染性疾病的分子診斷和研究;遺傳性疾病的分子診斷和研究;惡性腫瘤的分子診斷和研究;PCR擴增儀在移植配型上的應(yīng)用;PCR擴增儀在法醫(yī)學上的應(yīng)用;PCR擴增儀在分子生物學其他領(lǐng)域的應(yīng)用。
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