電泳(electrophoresis, EP)指的是帶電顆粒在電場(chǎng)作用下,向著與其電性相反的電極移動(dòng)。利用帶電粒子在電場(chǎng)中移動(dòng)速度不同而達(dá)到分離的技術(shù)叫做電泳技術(shù)。
歷史
在電場(chǎng)中帶電荷的粒子或分子移動(dòng)的現(xiàn)象,指的是電泳(Electrophoresis)。在電場(chǎng)中能夠作定向泳動(dòng)的物質(zhì)包括大分子的蛋白質(zhì),多肽,病毒粒子,甚至細(xì)胞或小分子的氨基酸,核苷等。1937年,能夠進(jìn)行血清蛋白電泳的界面電泳儀被成功地研制了出來(lái)。在1948年,Wielamd 和Kanig以濾紙條做載體成功地進(jìn)行了紙上電泳。從此以后,電泳技術(shù)越來(lái)越被人們所接受和越來(lái)越受到人們的重視,從而使得以濾紙,各種纖維素粉,淀粉凝膠,瓊脂和瓊脂糖凝膠,醋酸纖維素薄膜,聚丙烯酰胺凝膠等為載體,和如銀氨染色,考馬斯亮藍(lán)等增染試劑相結(jié)合能夠使得生物樣品著色與分辨能力大提高和促進(jìn)的電泳技術(shù)發(fā)展出來(lái)。另外,電泳分離結(jié)合免疫反應(yīng),發(fā)展出了微量和超微量(1ng~0.001ng)水平的分辨率,從而迅速推廣和應(yīng)用了電泳技術(shù)。

應(yīng)用
1.瓊脂或瓊脂糖凝膠免疫電泳
瓊脂或瓊脂糖凝膠免疫電泳可用于①對(duì)兩種抗原是否一致進(jìn)行檢驗(yàn)。②對(duì)抗某種已知抗原的抗體是否為抗血清制劑所具備進(jìn)行研究。③對(duì)蛋白質(zhì)混合物的組分進(jìn)行分析。④對(duì)蛋白質(zhì)制劑的純度進(jìn)行檢查。
2.聚丙烯酰胺凝膠電泳
聚丙烯酰胺凝膠電泳聚丙烯酰胺凝膠電泳,適用凝膠掃描儀對(duì)電泳后的凝膠進(jìn)行掃描,從而獲得定量的結(jié)果。掃描樣品單向電泳后的區(qū)帶和雙向電泳后的斑點(diǎn)為凝膠掃描儀的主要用途。
3.SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳
SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳能夠?qū)Φ鞍踪|(zhì)分子量進(jìn)行測(cè)定。蛋白質(zhì)分子結(jié)合帶大量電荷的SDS,使得蛋白質(zhì)分子原有電荷的影響消除了,從而使恒定的荷/質(zhì)比得到。測(cè)定時(shí)間短,分辨率高,所需樣品量極少(1~100μg)是這種方法的優(yōu)點(diǎn),然而其僅僅對(duì)
球形或基本上呈球形的蛋白質(zhì)適用。如木瓜蛋白酶,核糖核酸酶等一些蛋白質(zhì)與SDS結(jié)合相對(duì)比較困難,這個(gè)時(shí)候就不能夠得到準(zhǔn)確的測(cè)定結(jié)果。
4.聚丙烯酰胺凝膠電泳
聚丙烯酰胺凝膠電泳能夠被用來(lái)鑒定蛋白質(zhì)純度。電荷效應(yīng)和分子篩效應(yīng)同時(shí)為聚丙烯酰胺凝膠電泳所具備,不但能夠分離開(kāi)分子大小相同而帶不同數(shù)量電荷的物質(zhì),而且還能夠分離開(kāi)帶相同數(shù)量電荷而分子大小不同的物質(zhì)。和一般層析方法和電泳方法,其分辨率要高出很多。其的重復(fù)性好,沒(méi)有電滲作用。
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