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電泳儀

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電泳儀的原理

更新時間:2025-10-19 08:16:11 類型:電泳儀的原理 閱讀量:3827
導(dǎo)讀:電泳儀于1937年研發(fā),常用支持物體有濾紙、醋酸纖維薄膜等。電泳技術(shù)是分子生物學(xué)研究不可缺少的重要分析手段,分為自由界面電泳和區(qū)帶電泳兩大類。

  電泳儀于1937年研發(fā),常用支持物體有濾紙、醋酸纖維薄膜等。電泳技術(shù)是分子生物學(xué)研究不可缺少的重要分析手段,分為自由界面電泳和區(qū)帶電泳兩大類。

電泳儀的原理

  所謂電泳,是指帶電粒子在電場中的運動,不同物質(zhì)由于所帶電荷及分子量的不同,因此在電場中運動速度不同,根據(jù)這一特征,應(yīng)用電泳法便可以對不同物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析,或?qū)⒁欢ɑ旌衔镞M(jìn)行組份分析或單個組份提取制備,這在臨床檢驗或?qū)嶒炑芯恐芯哂袠O其重要的意義。電泳儀正是基于上述原理設(shè)計制造的。

 電泳儀的原理.jpg

電泳儀的研發(fā)背景

  1937年,瑞典生化學(xué)家Tiselius集前人百余年探索電泳現(xiàn)象之大成,發(fā)明了Tiselius電泳儀,在此基礎(chǔ)上建立了研究蛋白質(zhì)的自由界面電泳方法,利用該法首次證明人血清是由白蛋白(A)、α、β、γ球蛋白組成,并因此于1948年獲得阿果獎。隨后電泳技術(shù)的發(fā)展突飛猛進(jìn),1949年,Ricketls等人證明人血清蛋白質(zhì)經(jīng)電泳分離可依次分為白蛋白,α1、α2、β、γ球蛋白五個組分,1957年Reiner對人血清五個組分蛋白進(jìn)行了定量分析。

  但自由界面電泳沒有固定支持介質(zhì),擴散和對流作用較強,影響分離效果,于是在50年代相繼出現(xiàn)了固相支持介質(zhì)電泳。Z初的支持介質(zhì)是濾紙和醋酸纖維素膜,目前這些介質(zhì)在實驗室已經(jīng)應(yīng)用較少。在很長一段時間里,小分子物質(zhì)如氨基酸、多肽、糖等通常用濾紙、纖維素或硅膠薄層平板作為介質(zhì)進(jìn)行電泳分離、分析,而對于復(fù)雜的生物大分子,以濾紙、硅膠或醋酸纖維素膜等作為支持介質(zhì)進(jìn)行電泳,其分離效果并不理想。

  1959年,Raymond和Weintraub,Davis和Ornstein先后利用人工合成凝膠作支持介質(zhì)建立了聚丙烯酰胺凝膠電泳系統(tǒng),從而大大提高了電泳的分辨率和分離效果,增強了電泳技術(shù)的發(fā)展、滲透及與其他技術(shù)結(jié)合配套的能力。致使各式各樣的電泳儀和電泳材料如雨后春筍、競相爭榮,成為當(dāng)代實驗科學(xué)技術(shù)中品種繁多、應(yīng)用廣泛、基礎(chǔ)與技術(shù)皆備的大技術(shù)。

電泳儀的現(xiàn)狀與發(fā)展

  我國在電泳技術(shù)臨床應(yīng)用上與國外相比,存在一定的差距。電泳項目國內(nèi)一般也只以血清蛋白為主,而國外所做項目包括血清蛋白、尿蛋白、CK、LD、ALP、GGT同功酶、各種脂蛋白的膽固醇/甘油三酯等。對于分析用的電泳試劑,歐美這幾年均以瓊脂糖凝膠電泳片占95%以上,國內(nèi)仍有40%市場采用醋酸纖維素薄膜電泳片,這也是與國外差距較大的地方。

  近年來一些在大專院校、科研院所使用的科研類電泳技術(shù),如GX毛細(xì)管電泳、毛細(xì)管電泳芯片、電泳-色譜-質(zhì)譜聯(lián)用等,已開始在臨床實驗室使用。

電泳儀的現(xiàn)狀與發(fā)展.jpg

  從目前臨床實驗室的要求來看電泳儀必須具有下列功能:

  1、全自動化:必須達(dá)到人員離機作業(yè),由點樣到出報告機器全能完成。

  2、速度快:所有項目應(yīng)在60min內(nèi)完成同時具備急診項目如CK、LD等同工酶及亞型項目。為臨床提供及時、準(zhǔn)確的診斷信息。

  3、項目齊全:除了血清蛋白、脂蛋白、血紅蛋白、CK、LD同工酶等傳統(tǒng)項目外必須還能完成尿蛋白、腦脊液蛋白、免疫固定(單克隆抗體)、堿性磷酸酶(ALP)和g-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)同工酶、膽固醇(高密度/極低密度/低密度脂蛋白)、脂蛋白(a)等Zxin檢驗項目。

  4、敏感度高:必須采用敏感度高的電泳片。如瓊脂糖凝膠系統(tǒng),才能得到準(zhǔn)確度高,分辨率高的電泳結(jié)果。

毛細(xì)管電泳儀

  近期發(fā)展起來的毛細(xì)管電泳儀是一種新型的區(qū)帶電泳,又稱毛細(xì)管帶電泳,它能檢測尿樣、血漿、血清、腦脊液、紅細(xì)胞、其他體液或組織,以及實驗動物活體等樣品。能對蛋白質(zhì)、多肽、氨基酸、糖、酶、DNA、寡核苷酸、病毒、小和生物活性分子、離子、藥物及其代謝產(chǎn)物等物質(zhì)分離。廣泛用于臨床疾病診斷、臨床蛋白質(zhì)分析、臨床藥物分析、代謝研究、病理研究、同工酶分析、PCR產(chǎn)物分析、DNA片段及序列分析等。

  由于毛細(xì)管電泳儀具有GX、快速、靈敏、應(yīng)用范圍廣、所需樣品少和可自動化等特點,正逐漸被廣大臨床實驗室所接受。隨著國際、國內(nèi)科技發(fā)展的日新月異和檢驗醫(yī)學(xué)發(fā)展的突飛猛進(jìn),電泳技術(shù)也在不斷發(fā)展和更新,相信隨著電泳技術(shù)的不斷發(fā)展,其在臨床醫(yī)學(xué)和分子生物學(xué)領(lǐng)域?qū)⒂袕V闊應(yīng)用前景。

 

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