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大分子相互作用儀

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表面等離子共振儀調(diào)和方法

更新時(shí)間:2025-10-18 16:15:36 類(lèi)型:大分子相互作用儀方法 閱讀量:1211
導(dǎo)讀:表面等離子共振技術(shù),簡(jiǎn)稱(chēng)SPR,是從20世紀(jì)90年代發(fā)展起來(lái)的一種新技術(shù),對(duì)在生物傳感芯片上配位體與分析物之間的相互作用情況的檢測(cè)是SPR應(yīng)用原理。在各個(gè)領(lǐng)域得到廣泛地應(yīng)用。

表面等離子共振技術(shù),簡(jiǎn)稱(chēng)SPR,是從20世紀(jì)90年代發(fā)展起來(lái)的一種新技術(shù),對(duì)在生物傳感芯片(biosensor chip)上配位體與分析物之間的相互作用情況的檢測(cè)是SPR應(yīng)用原理。在各個(gè)領(lǐng)域得到廣泛地應(yīng)用。


原料

有如下幾種親和分子:

1.凝集素–聚糖/糖蛋白(Lectin–Polysacharride/Glycoprotein)

2.蛋白質(zhì)–小分子(Protein–Small Molecule)

3.蛋白質(zhì)–核酸(Protein–Nucleic Acid)

4.細(xì)胞–配體(Cell–Ligand)


6.jpg


5.蛋白質(zhì)–蛋白質(zhì)(Protein–Protein)

6.多肽–受體(Peptide–Receptor)

7.抗體–抗原(Antibody–Antigen)

8.膜受體–配體(Membrane Receptor–Ligand)


調(diào)和方法

任何一對(duì)親和分子,一個(gè)(分析物)在溶液中放置,另一個(gè)(靶分子)在生物傳感器表面鍵合。如果在靶分子鍵合的生物傳感器表面有含有分析物的溶液流經(jīng)。就會(huì)生成親和性復(fù)合物。

雙通道流動(dòng)注射分析式微射流系統(tǒng)為SensiQ所配備,有85nL流動(dòng)池在其內(nèi)。一次性的SPR生物傳感器為SensiQ所使用,能夠簡(jiǎn)便地裝卸。有單層的羧基化寡聚環(huán)氧乙烷(Carboxylated Oligoethyleneoxide)基質(zhì)包被于生物傳感器表面,能夠?qū)Χ喾N生物分子進(jìn)行鍵合,并且對(duì)非特異性結(jié)合及變性進(jìn)行有效地阻止。靶生物分子既能夠在固相生物傳感器表面鍵合,又能夠在液相中存在,這種方式使兩種親和分子間的接觸性得以增進(jìn),同時(shí)使由于人為因素所造成的動(dòng)力學(xué)分析的復(fù)雜化得以避免。


SensiQ關(guān)于實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的改進(jìn)具備多種鍵合方案,從而對(duì)生物分子的附著起支持作用。用EDC/NHS進(jìn)行胺偶聯(lián)是Z常用的偶聯(lián)方式。亦可使用例如順丁烯二酰亞胺-硫醇(Maleimide-thiol),還原胺化,酰肼-醛(Hydrazide-aldehyde),親和力捕獲等其它鍵合方式。適當(dāng)?shù)膮⒄涨€(xiàn)能夠通過(guò)SensiQ雙通道檢測(cè)中的一個(gè)通道來(lái)生成。當(dāng)固定好表面化學(xué)物之后,將Z多250 μl的樣品加入,緩沖液流經(jīng)生物傳感器表面時(shí)會(huì)有穩(wěn)定的基線(xiàn)產(chǎn)生,通過(guò)自動(dòng)化控制完成樣品注入和計(jì)時(shí)。用戶(hù)能夠通過(guò)實(shí)驗(yàn)設(shè)置向?qū)Чδ苡涗浂啻巫⑸渲芷冢⒕邆涓咧貜?fù)性。


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