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ELISA法檢測時滿板顯色或者滿板白,陽性對照不顯色原因及解決方法

更新時間:2025-10-23 07:07:04 類型: 閱讀量:4598
導(dǎo)讀:酶聯(lián)免疫吸附實驗即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行的技術(shù)。該技術(shù)可用于檢測大分子抗原和特異性抗體等,具有快速、靈敏、簡便、載體易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點。

酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA) 即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行的技術(shù)。該技術(shù)可用于檢測大分子抗原和特異性抗體等,具有快速、靈敏、簡便、載體易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點。


問題:滿板顯色

原因1:樣品的放置時間過長,樣品受到了污染

解決方法:樣品應(yīng)當(dāng)保持新鮮,應(yīng)當(dāng)在-20攝氏度的溫度下長期保存,避免污染。

原因2:重復(fù)使用吸嘴,吸嘴沒有洗干凈就用來加底物或者酶

解決方法:吸嘴應(yīng)當(dāng)清潔干凈

原因3:洗滌不充分,有酶殘留在反應(yīng)孔中

解決方法:洗滌要洗充分。

原因4:蒸餾水受到污染

解決方法:將蒸餾水換掉


03.jpg


原因5:反應(yīng)板受到次氯酸鈉的污染

解決方法:換成新的反應(yīng)板。

原因6:底物受到污染或者失效

解決方法:將底物換掉

原因7:將底物加好后保溫的時候,受到強(qiáng)光或者紫外線的照射

解決方法:顯色保溫的時候應(yīng)當(dāng)避免強(qiáng)光或者紫外線的照射

原因8:反應(yīng)時間過長

解決方法:準(zhǔn)確地定時

原因9:水箱的溫度過高

解決方法:將水箱的溫度調(diào)節(jié)準(zhǔn)確。

原因10:加酶量過多

解決方法:要準(zhǔn)確地進(jìn)行稀釋和加液。


問題:滿板白,陽性對照不顯色

原因

1.試劑漏加

2.將終止液當(dāng)做底物或者酶結(jié)合物使用

解決方法:根據(jù)試劑說明書嚴(yán)格執(zhí)行操作,加液的時候需要將標(biāo)簽看準(zhǔn),對洗滌液正確的稀釋,試劑不要漏加

原因3:洗滌液桶受到污染,有YZ酶活性的物質(zhì)存在或者蒸餾水受到污染

解決方法:保持瓶子潔凈,換用合格的蒸餾水


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