紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)具有較多的用途，能夠完成實(shí)驗(yàn)室內(nèi)化學(xué)測(cè)定、醫(yī)學(xué)分析、生物檢測(cè)、環(huán)境標(biāo)物的追蹤檢測(cè)等，對(duì)我國(guó)醫(yī)學(xué)、刑偵、化學(xué)、食品等領(lǐng)域的促進(jìn)作用不言而喻。其準(zhǔn)確性是實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)與化驗(yàn)結(jié)果可靠性的保證。因此，定期對(duì)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)進(jìn)行檢定是對(duì)該儀器的正常保養(yǎng)與維護(hù)，使其保持Z佳性能，延長(zhǎng)使用壽命，更好的進(jìn)行維護(hù)。

紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)檢定方法

　　一、波長(zhǎng)準(zhǔn)確度及其檢定方法

　　波長(zhǎng)的實(shí)際測(cè)定值和理論值相減，就是紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的波長(zhǎng)的準(zhǔn)確度。它在測(cè)試不同的儀器時(shí)，作用非常大，是非常關(guān)鍵的技術(shù)指標(biāo)。在我國(guó)，計(jì)量檢定工作，波長(zhǎng)準(zhǔn)確度是很重要的。檢定紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的波長(zhǎng)準(zhǔn)確度有很多的方式，下面將通過(guò)兩種方法進(jìn)行壽命說(shuō)明：汞燈和氘燈的利用。

　　1、汞燈

　　我國(guó)在對(duì)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)波長(zhǎng)準(zhǔn)確度進(jìn)行檢定時(shí)，很多的生產(chǎn)廠(chǎng)一般都廣泛利用汞燈進(jìn)行測(cè)試。具體的操作流程就是：將原光源拆下來(lái)，采用標(biāo)準(zhǔn)燈，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)光源燈各條的特征譜線(xiàn)進(jìn)行測(cè)試，波長(zhǎng)準(zhǔn)確度就是測(cè)量值和理論值做差。自利用汞燈進(jìn)行測(cè)試的過(guò)程中，能量測(cè)量作為測(cè)量的方式，波段的范圍設(shè)置在245-560nm范圍之內(nèi)，空氣作為樣品的參考系，光譜帶的寬設(shè)置為2nm，再通過(guò)波長(zhǎng)掃描。波長(zhǎng)準(zhǔn)確度就是汞燈的各特征波長(zhǎng)的測(cè)量值和其相應(yīng)的理論值之差。為了確保準(zhǔn)確度，可以重復(fù)進(jìn)行3次，波長(zhǎng)準(zhǔn)確度就選擇3次的平均值。

　　2、氘燈

　　在對(duì)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的波長(zhǎng)準(zhǔn)確度進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，通常人們?cè)谶x用標(biāo)準(zhǔn)燈時(shí)用氘燈。在儀器紫外區(qū)，由于氘燈的連續(xù)光譜優(yōu)勢(shì)，就會(huì)在紫外區(qū)作為光源。在可見(jiàn)區(qū)，由于光譜中波長(zhǎng)為656.1nm和為486.0nm是很容易分離的，而且具有高的強(qiáng)度，譜線(xiàn)特征非常明顯，所以對(duì)儀器波長(zhǎng)準(zhǔn)確度進(jìn)行檢定時(shí)可以利用譜線(xiàn)。在我國(guó)，對(duì)于儀器進(jìn)行計(jì)量檢定都會(huì)用波長(zhǎng)準(zhǔn)確度較為高的標(biāo)準(zhǔn)燈-氘燈。

　　二、波長(zhǎng)重復(fù)性及其檢定方法

　　多次測(cè)試波長(zhǎng)之后數(shù)據(jù)符合程度，也就是多次測(cè)試波長(zhǎng)的數(shù)據(jù)離散性就是波長(zhǎng)的重復(fù)性。檢定波長(zhǎng)的重復(fù)性方法，操作簡(jiǎn)單。diyi種方法，測(cè)試波長(zhǎng)的準(zhǔn)確度之后，測(cè)試三次取平均值，波長(zhǎng)重復(fù)性就是通過(guò)和3次測(cè)試中Z小值或者Zda值做的差;第二種，測(cè)試波長(zhǎng)的準(zhǔn)確度，要經(jīng)過(guò)3次測(cè)試，波長(zhǎng)重復(fù)性就是Zda值與Z小值之差。

　　三、光度準(zhǔn)確度及其檢定方法

　　光度的實(shí)際測(cè)定值和理論值之差就是光度準(zhǔn)確度。它倆之間的差越小，測(cè)量就會(huì)更準(zhǔn)確，光度的準(zhǔn)確度就會(huì)更高。一般，表示紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)光度的準(zhǔn)確度有以下兩種方式：①透射比誤差或者透射比準(zhǔn)確度，表示用TA(或△T);②吸光度誤差或者是吸光度準(zhǔn)確度，在表示用AA(或△A)時(shí)，要注意測(cè)量時(shí)具體的吸光度情況。

紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)檢定常見(jiàn)問(wèn)題

　　一、雜散光的問(wèn)題

　　雜散光的出現(xiàn)使得紫外可見(jiàn)光純度降低，導(dǎo)致檢測(cè)誤差增大。如雜散光在紫外可見(jiàn)分光中所占的比例為0.9%，那么雜散光所發(fā)生的誤差增大也幾乎為0.9%。雜散光的存在標(biāo)示著紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的準(zhǔn)確性已經(jīng)不符合檢測(cè)要求。其產(chǎn)生與光學(xué)元件老化、不清潔、錯(cuò)位、損壞有關(guān)，也與整臺(tái)機(jī)械光敏部位的密封不嚴(yán)有直接關(guān)系。

　　二、透射比的問(wèn)題

　　透射比對(duì)樣品吸光度具有較強(qiáng)的影響，兩者關(guān)系式是A=-logT，A代表著樣品吸光度，T代表著透射比，T存在較大的誤差時(shí)，A的誤差會(huì)更大。因此，一旦透射比不準(zhǔn)確，紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)檢測(cè)得到的數(shù)據(jù)就更不準(zhǔn)確。透射比的影響因素有波長(zhǎng)、比色皿托盤(pán)不正、光密封不到位、光譜帶寬變化等等，這些都會(huì)使透射比誤差超差，造成儀器測(cè)量不準(zhǔn)確。

　　三、基線(xiàn)平直度的問(wèn)題

　　紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)各參數(shù)中基線(xiàn)平直度非常重要。作為主要技術(shù)參數(shù)，基線(xiàn)平直度、噪聲和漂移三者綜合作用，使紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)性能突出。雖然基線(xiàn)平直度也是噪聲，但它是全波波長(zhǎng)點(diǎn)的噪聲，而紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的噪聲僅是250nm和500nm這兩處的光度噪聲。兩者區(qū)別還是很大的。一旦基線(xiàn)平直度的誤差超出范圍，光度計(jì)圖譜就會(huì)出現(xiàn)扭曲或假峰值，使分光光度計(jì)的測(cè)量準(zhǔn)確度大大降低。

　　四、其他需要注意的問(wèn)題

　　1、檢定員綜合素質(zhì)提升是前提。檢定人員只有素質(zhì)增強(qiáng)，才能提高服務(wù)質(zhì)量，嚴(yán)格按規(guī)程要求進(jìn)行檢定。工作責(zé)心增強(qiáng)、耐心細(xì)致，減少人為檢定誤差，及時(shí)總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，主動(dòng)提高檢定技術(shù)，保證檢定效果。

　　2、檢定環(huán)境及條件要滿(mǎn)足紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)檢定。因此，檢定前，要對(duì)環(huán)境進(jìn)行定期監(jiān)控，掌握環(huán)境參數(shù)，滿(mǎn)足條件方可檢定。當(dāng)發(fā)觀(guān)條件不允許時(shí)，不可強(qiáng)行進(jìn)行檢定操作。

　　3、紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)各參數(shù)檢定方法選擇要科學(xué)正確，嚴(yán)格按規(guī)程進(jìn)行，防止方法的錯(cuò)選導(dǎo)致誤差的超標(biāo)。

　　4、紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)是用電敏感元件，使用前需要預(yù)熱。在檢定時(shí)，同樣要充分預(yù)熱，使儀器內(nèi)部各系統(tǒng)穩(wěn)定，降低檢定誤差，保證檢定效果和質(zhì)量可靠。

　　5、紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)安裝和調(diào)試要有正規(guī)技術(shù)員輔導(dǎo)，避免人為損壞。而且要制定保養(yǎng)維護(hù)制度，設(shè)專(zhuān)人管理。此外，環(huán)境應(yīng)清潔無(wú)塵、干燥且無(wú)其它電磁干擾等，并定期開(kāi)機(jī)除濕。