化學(xué)發(fā)光又叫做冷光(cold ligh),是因?yàn)榛瘜W(xué)反應(yīng)而產(chǎn)生的光輻射?;瘜W(xué)發(fā)光分析為一種新型的分析方法。它有比較快的分析速度,簡(jiǎn)便的操作,良好的選擇性,它線性范圍可寬達(dá)幾個(gè)數(shù)量級(jí),靈敏度極高。越來(lái)越廣泛應(yīng)用于環(huán)境、生命、醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域。
介紹
體系產(chǎn)SF光 ( 光輻射 ) 所吸收的能量來(lái)源不同是化學(xué)發(fā)光與其它發(fā)光分析的本質(zhì)區(qū)別。必須有一個(gè)可一次提供導(dǎo)致發(fā)光現(xiàn)象足夠能量的單獨(dú)反應(yīng)步驟的化學(xué)反應(yīng)和一個(gè)產(chǎn)生可檢信號(hào)的光輻射反應(yīng)為體系化學(xué)發(fā)光所具備。

化學(xué)發(fā)光Western 雜交檢測(cè)靈敏度很高,被用來(lái)替代同位素檢測(cè)。放射性標(biāo)記抗體由酶標(biāo)記抗體所取代。當(dāng)它在底物作用時(shí),有光信號(hào)產(chǎn)生。大多數(shù)特異抗原檢測(cè)方法是基于堿性磷酸酶(AP) 或辣根過(guò)氧化物酶(HRP)二級(jí)抗體 耦聯(lián)物。專用的成像設(shè)備或者感光膠片被用來(lái)采集信號(hào)。已經(jīng)有十幾年在免疫印跡技術(shù)中使用化學(xué)發(fā)光底物的歷史,化學(xué)發(fā)光技術(shù)被用來(lái)在大部分實(shí)驗(yàn)室做轉(zhuǎn)印時(shí)進(jìn)行檢測(cè)。隨著冷CCD化學(xué)發(fā)光檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展,冷CCD的凝膠成像系統(tǒng)被越來(lái)越多的實(shí)驗(yàn)室采用來(lái)進(jìn)行化學(xué)發(fā)光的檢測(cè)。和自然發(fā)光法相比,盡管膠片成像有更高的靈敏度,然而它也有許多的缺點(diǎn)。耗費(fèi)時(shí)間,暗房,顯影劑和膠片均需要具備,并且膠片價(jià)格不便宜并且需要持續(xù)購(gòu)買。同時(shí)因?yàn)槟z片具有比較窄的線性范圍,所以幾乎不可能使用膠片上的條帶(尤其是表達(dá)量較低的條帶)進(jìn)行定量。和X膠片對(duì)比
冷CCD技術(shù)有很廣的動(dòng)力范圍,分辨率高、靈敏度高,能夠瞬時(shí)對(duì)影響進(jìn)行處理,所以能夠精確的定量條帶。當(dāng)然為了確保冷CCD的凝膠成像系統(tǒng)捕獲的到信號(hào),這樣技術(shù)有高強(qiáng)度長(zhǎng)持續(xù)時(shí)間的信號(hào)能夠由底物產(chǎn)生的要求。
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