核酸提取儀是應(yīng)用配套的核酸提取試劑來(lái)使得樣本核酸提取工作自動(dòng)完成的儀器。其在、輸血安全、法醫(yī)學(xué)鑒定、疾病控制ZX、臨床疾病診斷、生物學(xué)研究等多種領(lǐng)域得到廣泛地應(yīng)用。

經(jīng)典核酸純化技術(shù)

細(xì)胞裂解后將含核酸的水相離心分離，并且將等體積的酚∶氯仿∶異戊醇(25∶24∶1體積)混合液加入其中。按照應(yīng)用目的，兩相通過(guò)簡(jiǎn)單顛倒混勻(適用于分離高分子量核酸)或者漩渦振蕩混勻(適用于分離小分子量核酸)之后離心分離，核酸被留于上層水相，而疏水性的蛋白質(zhì)被分配至有機(jī)相。酚是一種有機(jī)溶劑，為了防止未飽和的酚會(huì)吸收水相而將一部分核酸帶走，因而需要預(yù)先用STE緩沖液將其飽和。酚也容易被氧化，而被氧化的酚會(huì)導(dǎo)致核酸鏈交聯(lián)或者會(huì)使核酸鏈中磷酸二酯鍵斷裂，所以在制備酚飽和液時(shí)需要將一特殊物質(zhì)加入，從而避免酚被氧化。

氯仿能夠?qū)⒅救コ垢嗟鞍踪|(zhì)變性，從而使提取效率提高。異戊醇則能夠使操作過(guò)程中產(chǎn)生的氣泡減少。一些有機(jī)溶劑能夠?qū)⒑怂猁}沉淀,，通過(guò)沉淀能夠使核酸濃縮，使核酸溶解緩沖液的種類發(fā)生改變和將某些雜質(zhì)分子去除。在酚、氯仿抽提后用乙醇沉淀，將pH5.0～5.5，終濃度為0.3M的NaAc或KAc加入到含核酸的水相中之后，核酸磷酸骨架上的負(fù)電荷會(huì)被鈉離子中和，在酸性環(huán)境中，會(huì)對(duì)核酸的疏水復(fù)性起促進(jìn)作用，然后將2～2.5倍體積的乙醇加入，經(jīng)一定時(shí)間的孵育，能夠有效地使核酸沉淀就是典型的離子。核酸的沉淀也能夠使用其他的一些有機(jī)溶劑（異丙醇、聚乙二醇(PEG)等）和鹽類(10.0mol/L醋酸銨、8.0mol/L的氯化鋰、氯化鎂和低濃度的氯化鋅等)。

肝糖元、淀粉及粘多糖的去除

因?yàn)楦翁窃?、淀粉及粘多糖與核酸有許多相似的物理化學(xué)性質(zhì)，因此常常會(huì)在取液中殘留。將它們?nèi)コ姆椒ㄈ缦拢?/span>

1.在濃磷酸鹽存在下，使用2-甲氧基乙醇對(duì)核酸提取液進(jìn)行抽提，使核酸在上面有機(jī)層中，多糖溶于下層水相。

2.DNA使用鈣鹽沉淀，再使用草酸鉀處理，從而使DNA鉀鹽形成，回收，之后使用離子交換法對(duì)DNA進(jìn)行吸附，分離其和多糖。

3.取材前盡量使組織中多糖的含量減少。

4.將淀粉酶加入，使大分子多糖分解為小分子，在以后純化步驟中逐漸除去。