用來(lái)進(jìn)行蛋白質(zhì)、肽及其他藥物制劑的氨基酸組成或含量的測(cè)定的儀器，稱為氨基酸分析儀。必須先蛋白質(zhì)及肽水解成單個(gè)氨基酸，然后再進(jìn)行氨基酸分析。其是以陽(yáng)離子交換柱分離、柱后茚三酮衍生、光度法測(cè)定為基準(zhǔn)的離子交換色譜儀。下面就讓小編帶你了解一下氨基酸分析儀的洗脫過(guò)程和故障解決。

洗脫過(guò)程

1.在ph2.2的條件下，氨基酸都帶正電荷，都會(huì)被吸附在陽(yáng)離子交換樹(shù)脂上，然而具有各不相同的結(jié)合強(qiáng)度。

2.氨基酸隨著緩沖液在離子交換柱上流動(dòng)不斷地附,解吸附，因?yàn)榘被崴釅A性、極性、分子大小等性質(zhì)的不同，就會(huì)產(chǎn)生不同的吸附強(qiáng)度。

3.氨基酸不同，其離子交換樹(shù)脂的親和力也不一樣：酸性氨基酸及羥基氨基酸＜中性氨基酸＜芳香族氨基酸＜城性氨基酸。

4.當(dāng)流動(dòng)相PH值提高的時(shí)候，就會(huì)減少氨基酸的正電荷，減弱吸附力，Z后從離子交換柱上洗脫下來(lái)。酸性和帶羥基氨基酸、中性氨基酸、堿性氨基酸為依次洗脫的順序。

5.氨基酸標(biāo)準(zhǔn)液中各種氨基酸在氨基酸自動(dòng)分析儀上被洗脫的順序一定;標(biāo)準(zhǔn)液各種氨基酸的濃度一定,洗脫峰的面積一定;通過(guò)這能夠?qū)悠分懈鞣N氨基酸的含量計(jì)算出來(lái)。

故障解決

故障現(xiàn)象1:基線漂移

產(chǎn)生原因1:管路漏液

判斷方法1:用濾紙?jiān)嚶?/span>

解決方法1:修復(fù)

產(chǎn)生原因2:分析柱被污染

判斷方法2:分離度下降

解決方法2:長(zhǎng)時(shí)間用緩沖液5(氫氧化鈉溶液)再生或重新填充柱子

產(chǎn)生原因3:緩沖液不純

判斷方法3:緩沖液B1~B5逐個(gè)與茚三酮反應(yīng),對(duì)基線狀況進(jìn)行觀察。

解決方法3:緩沖液和反應(yīng)液使用優(yōu)質(zhì)試劑和超純水配置。

產(chǎn)生原因4:除氨柱劣化。

判斷方法4:氨峰很高

解決方法4:對(duì)氨柱重新填充。

故障現(xiàn)象2:泵1泵2壓力都高

產(chǎn)生原因:反應(yīng)柱被堵塞

判斷方法:取下泵1泵2通往混合器的連接管路,此時(shí)若兩個(gè)壓力下降明顯就能夠斷定

解決方法:取下反應(yīng)柱往干凈的容器中放入，并且將蒸餾水注入，利用超聲波凊洗器凊洗半個(gè)小時(shí)，之后反裝回原位利用泵2走水(用R3),根據(jù)壓力對(duì)流量進(jìn)行設(shè)定，從小到大一直到壓力正常為止，Z后恢復(fù)反應(yīng)柱到原狀。