表面等離子共振技術(shù),簡稱SPR,是從20世紀(jì)90年代發(fā)展起來的一種新技術(shù),對在生物傳感芯片(biosensor chip)上配位體與分析物之間的相互作用情況的檢測是SPR應(yīng)用原理。在各個領(lǐng)域得到廣泛地應(yīng)用。
檢測原理
表面等離子共振(SPR)為一種光學(xué)現(xiàn)象,能夠用于天然狀態(tài)下生物分子間的相互作用的實時跟蹤。這種方法不僅對生物分子沒有任何損傷,而且不需要任何標(biāo)記物。

首先在生物傳感器表面鍵合上一種生物分子(靶分子),然后再在生物傳感器表面注入含有另一種能與靶分子產(chǎn)生相互作用的生物分子(分析物)的溶液并使其流經(jīng)生物傳感器表面。生物傳感器表面質(zhì)量由于生物分子間的結(jié)合而增加,從而使得折射指數(shù)按同樣的比例增強,就能夠觀察到生物分子間反應(yīng)的變化。使用應(yīng)用反應(yīng)單位(RU)[1 RU = 1pg 蛋白/mm2 = 1 x 10-6 RIU(折射指數(shù)單位)]來衡量這種反應(yīng)。
在注入分析物的過程中,由于經(jīng)過對流和擴散流的相互作,使得復(fù)合物通過表面和靶分子而形成,從而改變了分析物濃度。這種濃度的改變因為微射流系統(tǒng)內(nèi)nL數(shù)量級流動通道的應(yīng)用而降至Zdi點,使高傳質(zhì)系數(shù)(Mass Transport Coefficient,km)得到保證。鍵合在生物傳感器表面的靶分子濃度必須比較低以便使分析物的傳質(zhì)性不受到限制得以保證。當(dāng)注入分析物的時候,在生物傳感器表面形成了分析物-靶分子復(fù)合物,使得反應(yīng)增強。而當(dāng)結(jié)束注入分析物后,分析物-靶分子復(fù)合物解離,使得反應(yīng)減弱。動力學(xué)常數(shù)能夠通過結(jié)合式相互作用模型擬合的這種反應(yīng)曲線得以確定。通過參照曲線減除功能能夠驅(qū)除非特異性結(jié)合和總折射指數(shù)移相等效應(yīng)。
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