液相色譜儀因其自身具有的分析分離能力，在國(guó)內(nèi)的許多科研、計(jì)量以及生產(chǎn)單位得到了大量的推廣使用。尤其是Z近二、三十年，在相關(guān)科學(xué)技術(shù)水平的帶動(dòng)下液相色譜儀有了更大的發(fā)展，本文針對(duì)該如何科學(xué)合理的利用液相色譜儀進(jìn)行檢定展開(kāi)了深入的分析與研究，比較詳細(xì)的介紹了一些在具體操作中需要注意的事項(xiàng)。

一、正確了解液相色譜儀的數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)

在檢定過(guò)程中通常是由液相色譜儀自身所配置的記錄儀、積分儀或者是色譜數(shù)據(jù)工作站進(jìn)行色譜峰面積的記錄與計(jì)算等工作，在此基礎(chǔ)上利用記錄到的峰面積、峰高或其他色譜圖數(shù)據(jù)對(duì)基線漂移、基線噪音、檢測(cè)器的Z小檢測(cè)濃度等展開(kāi)具體的分析。

然而在實(shí)際操作中因?yàn)樯V數(shù)據(jù)工作站與積分儀的生產(chǎn)廠家或者產(chǎn)品型號(hào)不同，采集到的峰面積就會(huì)存在比較大的差異，進(jìn)而就會(huì)造成由此求得的檢測(cè)器的Z小檢測(cè)濃度同樣存在很大的差異，這種差異有時(shí)候甚至?xí)_(dá)數(shù)倍或者是十幾倍。

有些學(xué)者專門就此展開(kāi)了一些試驗(yàn)，Z終結(jié)果顯示：HP3392積分儀記錄的峰面積是C-R6A在相同條件下的7.94倍;SP4290M積分儀記錄的峰面積是C-R6A在相同條件下的2倍，這樣對(duì)Z小檢測(cè)濃度的判定影響極大。因此，我們?cè)跈z定過(guò)程中必須正確區(qū)分不同的色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)記錄的積分峰面積、峰高的差異，同時(shí)還要進(jìn)行認(rèn)真仔細(xì)的校對(duì)。

二、正確檢定輸液系統(tǒng)性能——泵流量設(shè)定值誤差

液相色譜儀流量設(shè)定值誤差檢定的相關(guān)步驟以及計(jì)算公式在JJG705-2002《液相色譜儀檢定規(guī)程》中都有十分明確的規(guī)定與要求，此處就不再贅述。對(duì)于整個(gè)測(cè)量、分析過(guò)程中誤差一般是由兩個(gè)原因所引起的：被測(cè)量物質(zhì)在不同溫度下的密度會(huì)發(fā)生改變以及其是否具有較強(qiáng)揮發(fā)性。現(xiàn)以純甲醇流量的測(cè)定為例對(duì)這兩個(gè)原因進(jìn)行分析，預(yù)設(shè)流量值為1.000mL/min。

1、純甲醇在不同溫度下密度發(fā)生改變所造成的誤差

純甲醇在20℃下的密度是0.7917g/mL，而它在20℃附近范圍內(nèi)的密度ρ是按照式進(jìn)行變化的，

ρ=0.7917-(T-20)×0.00079        式1

式中，T表示溫度。由此可見(jiàn)，溫度對(duì)純甲醇的密度有著什么明顯的影響，表1中列舉了25-30℃溫度下甲醇的密度。

有些工作人員在實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中所采用的純甲醇密度始終為0.7917g/mL，卻未曾意識(shí)到溫度變化對(duì)其密度的所造成的影響，如此以來(lái)求得的結(jié)果與真實(shí)的情況便會(huì)存在明顯的差異。例如，假定某一次檢定過(guò)程中容量瓶在五分鐘內(nèi)收集了3.8225g的甲醇，當(dāng)時(shí)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的溫度是30℃，若工作人員沒(méi)有把溫度對(duì)甲醇密度的影響計(jì)算在內(nèi)，則流量實(shí)測(cè)值Fm=3.8225/(0.7917×5)=0.9659mL/min，流量設(shè)定值誤差Ss為-3.41%，無(wú)法滿足規(guī)程對(duì)Z小誤差值的規(guī)定。

但是操作人員沒(méi)有忽略溫度影響的話，則求得的實(shí)測(cè)值應(yīng)該是Fm=3.8225/(0.7825×5)=0.9770 mL/min，此時(shí)的誤差值Ss則是-2.30%，就滿足了規(guī)程的有關(guān)規(guī)定。通過(guò)這個(gè)簡(jiǎn)單的算例就可以發(fā)現(xiàn)溫度對(duì)檢定結(jié)果有著十分重要的影響。

2、純甲醇揮發(fā)性對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響

相比其他物質(zhì)純甲醇有著很強(qiáng)的揮發(fā)性，在室溫下十分鐘內(nèi)甲醇能揮發(fā)1-2mg，即便容量瓶的瓶塞擰緊也難以阻止其揮發(fā)。所以，在操作中一定要使用封口膜密封良好的容量瓶收集被測(cè)量氣體，同時(shí)還要做到收集完一瓶就馬上對(duì)其進(jìn)行稱重，以免氣體揮發(fā)而使檢定結(jié)果失準(zhǔn)。

三、儀器的柱溫性能的檢定應(yīng)該注意的環(huán)境因素

不少實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的液相色譜儀在色譜柱溫控制方面一般只會(huì)用到恒溫操作，因此在具體的檢定過(guò)程中應(yīng)該合理控制實(shí)驗(yàn)室的溫度變化，溫度變化需要嚴(yán)格控制在3℃以內(nèi)，對(duì)于那些折光率性能不好的儀器更是應(yīng)該嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)室的溫度，理論上溫度變化不允許多于2℃。同樣，實(shí)驗(yàn)室的濕度也應(yīng)該調(diào)整到一個(gè)合理的范圍，一般規(guī)定的是在20%—85%之間。只有做到這些方面才能保證檢定結(jié)果不會(huì)受到環(huán)境因素的干擾。

四、不同檢測(cè)器波長(zhǎng)示值誤差檢定中需注意問(wèn)題

紫外波長(zhǎng)檢測(cè)器與二極管陣列檢測(cè)器是現(xiàn)在在國(guó)內(nèi)應(yīng)用Z廣泛的兩類，按照檢測(cè)規(guī)程的相關(guān)要求，對(duì)于二極管陣列檢測(cè)器使用其波長(zhǎng)掃描功能便能夠比較方便且準(zhǔn)確的測(cè)得儀器特征波長(zhǎng)；不過(guò)對(duì)于紫外檢測(cè)器則需要將重鉻酸鉀溶液注入其中并通過(guò)人工來(lái)不斷調(diào)整波長(zhǎng)值，利用波長(zhǎng)值改變后其吸收值也會(huì)隨之有所變化來(lái)求得真實(shí)的特征吸收波長(zhǎng)。

這種操作方法目前尚可以在那些比較老式的儀器上開(kāi)展，不過(guò)現(xiàn)在新生產(chǎn)的儀器以及從國(guó)外進(jìn)口的基本上都是裝備了原廠工作站，于是工作人員也就無(wú)法再通過(guò)手動(dòng)來(lái)調(diào)整波長(zhǎng)，對(duì)于那些改變波長(zhǎng)后能夠自動(dòng)回零的儀器，就需要工作人員通過(guò)連續(xù)進(jìn)樣的手段開(kāi)展測(cè)試。

然而重鉻酸鉀溶液是一種無(wú)機(jī)溶液，但是液相色譜儀工作中經(jīng)常使用的流動(dòng)相一般是甲醇或者乙腈這些有機(jī)溶液，如此以來(lái)重鉻酸鉀溶液不能通過(guò)色譜柱，只能注入檢測(cè)室，仍會(huì)對(duì)儀器造成一定的污染，如果在操作的過(guò)程中出現(xiàn)什么意外則極有可能使儀器損壞。同時(shí)重鉻酸鉀的特征峰相比而言比較平緩因而并不十分容易確定其Zgao或者Zdi吸收值，如果能夠?qū)ふ业狡渌梢蕴娲臏y(cè)試手段那么是具有十分重要意義的。

五、結(jié)論

總的來(lái)講，液相色譜儀屬于高精度、比較貴重的分析測(cè)量?jī)x器，在日常使用中必須由專業(yè)技術(shù)人員嚴(yán)格按照相關(guān)的操作規(guī)程來(lái)使用，以免不正規(guī)的操作造成測(cè)試結(jié)果失準(zhǔn)或者儀器損壞。本文針對(duì)日常工作中液相色譜儀檢定的幾個(gè)方面進(jìn)行了一定分析與討論，以供有關(guān)工作人員可以更加科學(xué)、準(zhǔn)確的使用該儀器。