本文介紹了液相色譜儀的組成，對泵、色譜柱、檢測器等重要部件的使用和維護(hù)進(jìn)行闡述，對出現(xiàn)的異常故障進(jìn)行原因分析并找到解決辦法，對液相色譜儀的故障維修起到指導(dǎo)作用，確保儀器狀態(tài)良好保障學(xué)習(xí)科研工作的順利進(jìn)行。

一、液相色譜儀的組成與維護(hù)

液相色譜儀主要由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器等幾部分組成。

1、儲液器

儲液器主要用于流動相溶劑的儲存，流動相通常有甲醇-水體系、乙腈-水體系、異丙醇-水體系等，有機(jī)溶劑要求色譜純?nèi)軇?，使用前用抽濾裝置過濾，避免溶劑中的固體顆粒損傷儀器或者柱頭。

2、流動泵

流動泵是輸液系統(tǒng)的核心部件，將流動相從儲液器中泵入流路分離檢測系統(tǒng)，并保持穩(wěn)定的壓力和流速。流量的穩(wěn)定性一般波動要求在3%以內(nèi)，不正常波動通常會出現(xiàn)壓力過高和壓力過低兩種現(xiàn)象。

壓力過高產(chǎn)生的原因很多，如色譜柱進(jìn)口過濾芯被污染，沖洗閥過濾芯被污染，色譜柱被污染，連接管路毛細(xì)管堵塞，進(jìn)樣器轉(zhuǎn)子的凹槽被阻塞，其實歸根結(jié)底就一個字“堵”，可以使用分段法進(jìn)行檢查，對堵塞部位進(jìn)行清洗，排除故障。

壓力過低的原因主要有兩種，diyi種是溶劑進(jìn)口過濾芯堵塞，泵頭密封墊泄漏，溶劑或流速改變，六通閥密封不嚴(yán)，色譜柱失效造成固定相流失等造成的，也歸根結(jié)底一個字“漏”，對泄漏部位進(jìn)行配件的更換，保持系統(tǒng)的密封性。另外一種就是輸液管路中泵頭有氣泡造成壓力過低或者波動過大，打開放空閥，排除氣泡即可。

3、進(jìn)樣器

進(jìn)樣器分為手動進(jìn)樣和自動進(jìn)樣兩種進(jìn)樣方式，手動進(jìn)樣人為進(jìn)樣重復(fù)性差，自動進(jìn)樣精密度高，穩(wěn)定性好，進(jìn)樣器Zda問題就是出現(xiàn)交叉污染，當(dāng)樣品濃度高，有較強(qiáng)吸附能力時，會造成進(jìn)樣完畢后進(jìn)樣器清洗不徹底，樣品殘留會進(jìn)入下一次色譜分析，對結(jié)果產(chǎn)生影響，因此進(jìn)樣器使用后應(yīng)多次清洗。

4、色譜柱

色譜柱是液相色譜儀的核心部分，保持色譜柱的柱效和滲透性能，延長色譜柱的使用壽命。在色譜柱前面通常會加上一個保護(hù)柱，保護(hù)柱的填料應(yīng)與分析柱的填料一致，其目的是保護(hù)分析柱不受污染，使用完畢應(yīng)用流動相沖洗整個系統(tǒng)，除去系統(tǒng)中緩沖液，如果長時間不使用色譜柱，先用適當(dāng)溶劑充分清洗色譜柱，并保證色譜柱充滿溶劑后拆卸下來，用死堵頭將色譜柱兩端密封，防止色譜柱中的溶劑揮發(fā)造成色譜柱柱效的下降。

5、檢測器

檢測器就是gao效液相色譜儀的“眼睛”，將分離出來的樣品物質(zhì)組成和各組分濃度含量變化轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的信號進(jìn)行定性和定量檢測分析，常用檢測器主要有紫外檢測器、熒光檢測器等。

紫外檢測器是應(yīng)用Z廣泛的檢測器，其特點(diǎn)是具有較高靈敏度，線性范圍寬，基線噪聲低，適用于梯度脫洗，對強(qiáng)吸收物質(zhì)的檢測限可達(dá)到納克級別。適用于有紫外吸收的物質(zhì)，檢測后不破壞樣品結(jié)構(gòu)，可用于物質(zhì)的制備。

熒光檢測器可檢測能產(chǎn)生熒光的物質(zhì)，其Z小檢測濃度可達(dá)到0.1ng/mL，適用于痕量分析，其靈敏度比紫外檢測器高2個數(shù)量級，但是線性范圍比紫外檢測器窄，使用過程中要注意不能使用可熄滅、yi制和吸收熒光的流動相，選擇強(qiáng)極性的溶劑有利于熒光的增強(qiáng)，熒光物質(zhì)的熒光效率和強(qiáng)度也會隨著溫度的升高而降低。

二、液相色譜儀的故障維修

液相色譜儀，在分析儀表中具有g(shù)ao效、快速、靈敏等特點(diǎn)，應(yīng)用于生物化學(xué)、生物醫(yī)學(xué)、環(huán)境化學(xué)、石油化工等部門。但是在使用過程中由于多方面因素的影響，液相色譜儀出現(xiàn)故障問題。液相色譜儀常見的故障問題主要有如下幾種：

1、流動相不能流動或輸液管中有較多連續(xù)的氣泡產(chǎn)生

吸濾頭堵塞，將吸濾頭用異丙醇(或百分之五稀硝酸)，超聲波清洗，再用蒸餾水清洗。

2、壓力波動大或泵不送液

單向閥堵塞，拆下單向閥，把它放入異丙醇(甲醇)或水中，用超聲波清洗15min。注意不要將單向閥倒置。否則內(nèi)部的閥心可能會掉落。

3、壓力波動并伴隨泵頭處漏液

(1)柱塞桿密封磨損，更換密封圈；

(2)柱塞桿磨損或折斷，更換柱塞桿。

4、壓力很高，泵后無負(fù)載流速1ml/min 時，壓力超過1Mpa

在線過濾器堵塞，拆下過濾器用超聲清洗，先用5%稀硝酸浸泡30min，再用水清洗，然后再用甲醇清洗15min。如果清洗效果不佳，更換在線過濾片。

5、排液閥漏液：排液閥O型圈磨損，更換O型圈

6、系統(tǒng)壓力很高，同時泵本身壓力不高。

混合器后無負(fù)載流速1ml/min，壓力超過1Mpa?；旌掀鞫氯?，清洗或更換混合器。

7、手動進(jìn)樣閥針孔處向外倒液。

可按壓閥口的針導(dǎo)管來加強(qiáng)密封，如果未見效果，需要更換進(jìn)樣閥的定子和轉(zhuǎn)子。

8、樣品池污染。

用針筒注入異丙醇，清洗樣品池；如污染嚴(yán)重，拆開樣品池，將透鏡等放入異丙醇中清洗。

9、保留時間不穩(wěn)定

吸濾頭臟；泵輸液不正常(壓力波動、氣泡等);流動相組分變化；流動相緩沖能力不夠；色譜柱平衡時間不夠；柱溫的變化；柱子問題。

10、噪音大

流動相污染、變質(zhì)或由低品質(zhì)溶劑配成；漏液；流動相、泵、檢測器流通池內(nèi)有氣泡；流動相各溶劑不相溶或混和不均勻；檢測池能量不足；流通池被污染；溫度影響(檢測器和柱溫差別太大)；其他電子設(shè)備的影響或電源、地線等。

11、基線漂移

流動相污染，變質(zhì)或由低品質(zhì)溶劑配成；流動相不均勻(脫氣，使用純度更高的溶劑)；溫度波動；系統(tǒng)平衡時間不夠；流通池被污染或有氣泡；流通池窗口破裂。

12、峰形問題

死體積太大；柱子被污染或堵塞；色譜柱塌陷；色譜柱化學(xué)或次級保留(硅羥基效應(yīng)或重金屬污染)；流動相緩沖不足或不合適；樣品溶劑選擇不當(dāng)，與流動相之間極性差異太大；樣品過載(濃度或體積)；柱溫過低。

13、鬼峰

流動相被污染；進(jìn)樣閥殘余峰；樣品中有未知物；色譜柱中的污染物。

液相色譜儀是我們?nèi)粘９ぷ骺蒲袑W(xué)習(xí)的好幫手，如何使用和維護(hù)好儀器是至關(guān)重要的，遇到問題和故障要做到有的放矢才能解決好，延長儀器的使用壽命，確保儀器性能得到Zda程度的發(fā)揮，確?？蒲袛?shù)據(jù)結(jié)果的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。本文對液相色譜儀在使用中出現(xiàn)的故障做的以上分析總結(jié)及排除方法，可以廣泛應(yīng)用于不同類型的檢測器和品牌的液相色譜儀。