手工測(cè)序以及自動(dòng)測(cè)序均屬于DNA序列測(cè)定，手工測(cè)序可分為maxam-gilbert化學(xué)降解法與sanger雙脫氧鏈終止法，事實(shí)上，目前dna序列分析的主流是自動(dòng)測(cè)序。373型、377型、310型、3700和3100型等多種型號(hào)DNA測(cè)序儀均已經(jīng)被美國(guó)pe abi公司生產(chǎn)出來(lái)了，在這幾款DNA測(cè)序儀中，臨床檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室使用Z多的一種型號(hào)要屬310型。

DNA模板、困難模板以及機(jī)器對(duì)測(cè)序質(zhì)量的影響

1、DNA模板

（1）雜合子

和正常峰值相比，雜合子信號(hào)處只有其一半的強(qiáng)度大小，同時(shí)大小相等。

（2）非單克隆

特點(diǎn)：右邊全部如同雜合子，左邊非常清晰。

原因：挑克隆的時(shí)，混合了兩個(gè)質(zhì)粒。

方法：將克隆重新挑，將DNA重新制作。

（3）儀碼突變

由于點(diǎn)突變導(dǎo)致在450bp的地方儀碼，又由于點(diǎn)突變?cè)?28bp的地方恢復(fù)。

（4）模板不純

現(xiàn)象：有其它顏色位于每個(gè)峰下面。

原因；測(cè)序時(shí)pcr助貸混合雜帶。

方法：凝膠電泳將主帶回收，將測(cè)序重新進(jìn)行。

（5）點(diǎn)突變

若有堿基在模板上突變，那么測(cè)序圖像中其它位點(diǎn)通常均是單一峰形，然后有重疊峰突然出現(xiàn)在某一位點(diǎn)。

2、機(jī)器影響

（1）毛細(xì)管

（2）其它

3、困難模板

（1）重復(fù)序列

（2）回文結(jié)構(gòu)

（3）高GC

（4）特殊結(jié)構(gòu)

（5）Ploy結(jié)構(gòu)

當(dāng)今世界，如果要評(píng)說(shuō)哪個(gè)地方會(huì)誕生傳奇，那么必定是高科技領(lǐng)域，從前DNA測(cè)序還作為一個(gè)前沿技術(shù)令人高山仰止，如今卻成為一個(gè)生命科學(xué)常規(guī)技術(shù)，迅速地得到普及，目前為止，能夠和電腦芯片運(yùn)算能力增強(qiáng)的速度相媲美的也就只有DNA測(cè)序成本下降的速度，DNA測(cè)序的發(fā)展除了在降低成本方面得到了體現(xiàn)，還在高通量測(cè)序大幅度提高了工作效率方面得以表現(xiàn)，其鋪平了DNA測(cè)序產(chǎn)業(yè)化的道路。

從前將致病相關(guān)基因從數(shù)萬(wàn)個(gè)人類(lèi)基因中篩選出來(lái)猶如大海撈針。為了對(duì)這個(gè)基因究竟在何處想方設(shè)法的定位，科學(xué)家需要對(duì)同一個(gè)家族的多位患者的標(biāo)本進(jìn)行獲取。設(shè)計(jì)高通量藥物，致病或抑病基因的鑒定、疾病易感人群的篩查甚至個(gè)性化YL由于具備了如今快速測(cè)序技術(shù)和SNPs這個(gè)強(qiáng)有力的工具而不再是需要向往的事。