不同的物質(zhì)在一定的電場強(qiáng)度下,因?yàn)樗鶐щ姾刹煌?,所以受到的引力不同,往相反的電極泳動的速度不同從而達(dá)到分離的目的。利用帶電粒子在電場中移動速度不同而達(dá)到分離目的的技術(shù),稱為電泳技術(shù)。
使用方法
1.使用去污劑反復(fù)擦洗并曬干凝膠玻璃板,再使用無水乙醇將其表面插干凈。
2.在對膠進(jìn)行制備時,根據(jù)凝膠厚度來挑選合適的電泳玻璃,在平板內(nèi)芯外側(cè)的方向,順著內(nèi)芯一側(cè)的緊固側(cè)板小心地將凹形玻璃板放入。
3.操作臺面必須平整,當(dāng)在內(nèi)芯內(nèi)放入玻璃后,在對凹、平板的底部邊緣都和臺面對齊進(jìn)行確認(rèn)后,再將旋鈕旋緊。值得注意的是,密封的重要條件就是使凹、平板的底部邊緣都和臺面對齊。

4.在制膠底座上安裝裝好玻璃板的內(nèi)芯,再將吊扣壓緊。
5.緩慢地往凝膠腔內(nèi)注入配制好的分離膠溶液,注意要避免氣泡產(chǎn)生。
6.在灌完分離膠后,為了確保分離膠的無氧聚合,使用滴管將一層正丁醇溶液或蒸餾水注在分離膠表面。
7.當(dāng)分離膠聚合后,倒出并且用吸紙吸干表面的正丁醇溶液或蒸餾水。
8.在分離膠表面注入高度距離凹板下沿2-3mm或者和其平齊的濃縮膠。
9.將相應(yīng)的加樣梳插入到凝膠內(nèi)。
10.當(dāng)凝膠聚合后,將梳子取出,將搭鉤打開,在電泳槽底槽中放入由制膠器中取出的內(nèi)芯,制膠過程結(jié)束。
注意事項(xiàng)
1.在對玻璃板進(jìn)行組裝時,沒有必要將下部的兩個螺栓擰得過緊。
2,對于小分子量蛋白質(zhì),濃度高的膠效果更佳,對于大分子量蛋白質(zhì),濃度低的膠效果更好。
3.TEMED為促進(jìn)聚丙烯酰胺聚合的加速劑,在配置分離膠時,每個膠板滴兩滴會有不錯的效果。
4.電極緩沖液配制麻煩,占體積,用量多。
5.丙烯酰胺是神經(jīng)性毒劑,能刺激皮膚,操作時應(yīng)當(dāng)將手套戴上。
6.為了防止鋁板的表面長期堆積污垢不能充分接觸玻璃板,需要在使用完后及時的清理。
7.產(chǎn)品是易碎物,需要輕拿輕放。
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