手工測序以及自動測序均屬于DNA序列測定，手工測序可分為maxam-gilbert化學(xué)降解法與sanger雙脫氧鏈終止法，事實上，目前dna序列分析的主流是自動測序。373型、377型、310型、3700和3100型等多種型號DNA測序儀均已經(jīng)被美國pe abi公司生產(chǎn)出來了，在這幾款DNA測序儀中，臨床檢測實驗室使用Z多的一種型號要屬310型。

454焦磷酸法平臺

邊合成邊測序為454焦磷酸法平臺使用的技術(shù)，使Sanger法存在的宿主菌克隆問題得以避免，其為較早上市的循環(huán)微陣列法平臺。

1、首先打斷待測的目的DNA分子，使其成為300-800bp的片段，之后將一個磷酸基團(tuán)加在DNA片段的 5′ 端，使其變成平端，將44 bp的A、B 兩個銜接子分別加在兩端，使得目的DNA 的樣品文庫組成，在生物素和鏈霉親和素的作用下，其與含有過量鏈霉親和素的磁珠特異性結(jié)合為將兩個銜接子 A、B加上的目的。

2、在一個磁珠上固定目的 DNA 片段以后，在單個油水混合小滴(乳滴)里獨立的擴(kuò)增被包被的磁珠，而且不會受到其他的污染性或競爭性序列的影響，從而使平行擴(kuò)增乳滴 PCR所有目的 DNA片段得以實現(xiàn)，經(jīng)過富集之后，大約有107個克隆的DNA片段位于每一個磁珠上。

3、之后往PTP反應(yīng)板中放入DNA片段進(jìn)行之后的測序，有160多萬個由光纖組成的孔位于PTP平板上，有化學(xué)發(fā)光反應(yīng)所需的各種酶和底物在這160多萬個由光纖組成的孔中。

4、開始進(jìn)行測序的時候，按照 T、A、C、G 的順序往 PTP 板中依次循環(huán)將放置在四個單獨的試劑瓶里的四種堿基放入，每次只有一種堿基進(jìn)入。若有堿基配對發(fā)生，就會有一個焦磷酸鹽分子釋放出來。

5、儀器配置的高靈敏度CCD對此反應(yīng)釋放出的光信號進(jìn)行實時捕獲，有一個堿基和測序模板進(jìn)行配對，就會有一分子的光信號被捕獲到，由此一一對應(yīng)，就能夠?qū)Υ郎y模板的堿基序列進(jìn)行準(zhǔn)確、快速地確定。

從前將致病相關(guān)基因從數(shù)萬個人類基因中篩選出來猶如大海撈針。為了對這個基因究竟在何處想方設(shè)法的定位，科學(xué)家需要對同一個家族的多位患者的標(biāo)本進(jìn)行獲取。設(shè)計高通量藥物，致病或抑病基因的鑒定、疾病易感人群的篩查甚至個性化YL由于具備了如今快速測序技術(shù)和SNPs這個強有力的工具而不再是需要向往的事。

在業(yè)內(nèi)，DNA測序有著高貴的出身，其將堿基序列這一基因密碼破解，融合了IT技術(shù)與基因組學(xué)，將生物信息學(xué)這一新興學(xué)科開創(chuàng)和發(fā)展了出來。傳統(tǒng)的生物學(xué)技術(shù)被以生物信息學(xué)為代表的基因技術(shù)徹底顛覆了，對生命科學(xué)未來發(fā)展潮流起到引ling作用，在YL健康、環(huán)境保護(hù)、新能源、新材料、現(xiàn)代農(nóng)業(yè)等熱門領(lǐng)域以它為代表的基因工程得到了廣泛地應(yīng)用。