免疫印跡（immunoblotting）又叫做蛋白質(zhì)印跡（Western blotting），是通過抗原抗體的特異性結(jié)合來對復雜樣品中的某種蛋白進行檢測的方法。此方法是一種新的免疫生化技術，其是基于凝膠電泳和固相免疫測定技術發(fā)展出來的。如今免疫印跡已經(jīng)成為蛋白分析的一種常規(guī)技術，因為其既具備固相免疫測定的高特異性和敏感性，又具備SDS-PAGE 的高分辨力。某種蛋白的鑒定一般使用免疫印跡，并且可以定性和半定量分析蛋白。和化學發(fā)光相結(jié)合進行檢測，能夠同時對多個樣品同種蛋白的表達量差異進行比較。

優(yōu)點

免疫印跡法是一項對抗原、抗體進行分析的技術。其具備如下優(yōu)點。

1.孵育、洗滌的時間減短非常明顯。

2.為了用于多種分析和鑒定，能夠同時制作多個拷貝。

3.以圖譜形式顯示結(jié)果，能夠長期保存結(jié)果。

4.免疫探針能夠利用將PH值降低等方法抹掉探針，用第二探針替換來進行進行分析檢測。

5.濕的固定化基質(zhì)膜柔韌，操作簡單便捷。

6.固定化的生物大分子能夠均一地接近各種免疫探針，孔徑不會對其起阻隔作用。

7.免疫印跡分析所需的試劑量較少。

基本原理

在凝膠板上單向或雙向電泳分離混合抗原樣品，之后取固定化基質(zhì)膜與凝膠相貼。凝膠中的單一抗原組在印跡紙的自然吸附力、電場力或其它外力作用下往印跡紙上轉(zhuǎn)移并且固相化，Z后應用如免疫同位素探針或免疫酶探針等免疫覆蓋液技術檢測和分析抗原固定化基質(zhì)膜。

基本步驟

抗原分離、抗原印跡和抗原檢定為免疫印跡法（ 以抗原分析為例）的三個基本步驟。因為每一步采用不同的實驗方法，能夠使多種免疫印跡分析系統(tǒng)構(gòu)成。