紫外可見分光光度計(jì)是現(xiàn)代分子生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器,常用于有機(jī)物、無機(jī)物、蛋白、核酸及細(xì)菌生長濃度的定量、定性分析,在科研、化工、制藥、環(huán)保、衛(wèi)生、防疫等領(lǐng)域發(fā)揮重要的作用??梢姡贤饪梢姺止夤舛扔?jì)就是類似天平或尺子那樣的重要工具,凡是有化驗(yàn)、分析的地方都需要它。那么,如何正確選購紫外可見分光光度計(jì)呢?
紫外可見分光光度計(jì)選購需要注意儀器在以下幾個(gè)方面的重要指標(biāo)或參數(shù):
1、儀器的光度準(zhǔn)確度
光度準(zhǔn)確度指實(shí)際測量的光度讀數(shù)值與真值之差。它是用戶對(duì)紫外可見分光光度計(jì)的關(guān)鍵要求,需要優(yōu)先考慮。
2、儀器的雜散光
它指不應(yīng)該有光的地方有了光。它是光譜測量中誤差的主要來源,一般這個(gè)值越小越好。
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3、儀器的光譜帶寬
是指從單色器射出的單色光譜線強(qiáng)度輪廓曲線的1/2高度處的譜帶寬度。體現(xiàn)儀器的光譜分辨率。按照比耳定律,一般情況下光譜帶寬應(yīng)該是越小越好,但如果儀器的光源能量弱,光學(xué)傳感器的靈敏度低時(shí),光譜帶寬小了,也得不到理想的測量結(jié)果的。所以,選擇和使用儀器時(shí)一定注意多方面考慮。
4、儀器的穩(wěn)定性
穩(wěn)定性是用戶關(guān)注的核心指標(biāo)了,性能穩(wěn)定可靠是基本的要求。
5、儀器的噪聲
噪聲也是紫外可見分光光度計(jì)的重要參數(shù)指標(biāo),它體現(xiàn)了儀器的做稀溶液的能力。噪音指標(biāo)無疑越小越好。
6、儀器波長的準(zhǔn)確度及重復(fù)性
紫外可見分光光度計(jì)的每個(gè)值都是在一定的波長下測得的,如果所示的波長和實(shí)際波長偏差過大,那么測出的值和真值的同樣相差很大,就談不上準(zhǔn)確了,所以說準(zhǔn)確度這個(gè)指標(biāo)非常重要。
綜上所述,以上指標(biāo)都是相互獨(dú)立又相互關(guān)聯(lián)的,每個(gè)指標(biāo)對(duì)紫外可見分光光度計(jì)的使用都有很大影響。所以在選購紫外可見分光光度計(jì)時(shí),多做觀察和比較,多做了解和判斷,確保找到一個(gè)質(zhì)量和性能都滿意的優(yōu)良產(chǎn)品。
1、紫外可見分光光度計(jì)光源選擇
紫外可見分光光度計(jì)Z常見的電源為鎢燈或者氘燈。鎢燈發(fā)射波長為325~2500nm,適宜使用波長為320~1000nm,因此,鎢燈也可作近紅外光源。鎢燈工作電壓是12V,也可使用12V直流電源供電,電源電壓的微小波動(dòng)都會(huì)引起鎢光強(qiáng)度的很大變化,使用過程中必須穩(wěn)壓電源供電,鎢燈工作時(shí)間為10000小時(shí)以上。
氘燈發(fā)射波長為190~400nm,適宜使用波長為190~360nm,使用中也需提供穩(wěn)壓電源,氘燈的使用壽命:國產(chǎn)的一般為500~800小時(shí),進(jìn)口的一般為1000小時(shí),少數(shù)的能達(dá)到2000小時(shí)。Zxin的紫外可見分光光度計(jì)采用高強(qiáng)度和高單色性的激光作為紫外光源。
2、紫外可見分光光度計(jì)單色器選擇
單色器是將連續(xù)光譜分解成單色光,并能夠準(zhǔn)確發(fā)射目標(biāo)所需要的單一波長的光,是整個(gè)儀器Z關(guān)鍵的部件。單色器由狹縫、色散元件和透鏡系統(tǒng)組成,關(guān)鍵部件為色散元件,常用為棱鏡、光柵,或者是兩者的組合?,F(xiàn)階段,光柵以及組合使用頻率Zgao。
棱鏡單色器由玻璃或石英制成,玻璃棱鏡存在吸收紫外光,不宜用于紫外光區(qū)。石英棱鏡工作波長為185~4000nm,波長越短,色散程度越好,越趨向長波,色散程度越差。石英棱鏡在紫外光區(qū)可達(dá)到0.2nm,而在長波段,只能達(dá)到5nm。光柵單色器為一系列等寬、等距離的平行狹縫,光柵單色器的分辨率精確到0.2nm且波長范圍比棱鏡單色器范圍寬。
3、紫外可見分光光度計(jì)吸收池選擇
吸收池,又稱比色皿,用于盛裝待測液并決定待測溶液透光液層厚度的器皿,常為長方體,也有圓形或其他形狀。底面和兩側(cè)為毛玻璃,另外兩側(cè)為光學(xué)透明面。比色皿材質(zhì)為石英,吸收池規(guī)格包括:0.5cm、1.0cm、2.0cm、3.0cm、5.0cm等。
4、紫外可見分光光度計(jì)檢測器選擇
將光信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)裝置稱為檢測器。測量吸光度并不是測量透過吸收池的光強(qiáng)度,而是將光強(qiáng)度轉(zhuǎn)換成電流進(jìn)行測量,此種光電轉(zhuǎn)換器件稱為檢測器,又叫接受器。常用的檢測器有光電池、光電管、光電倍增管及光電二極管陣列檢測器等。
目前,高 檔紫外可見分光光度計(jì)中一般采用光電倍增管作為檢測器。光電二極管陣列檢測器是紫外可見分光光度計(jì)檢測的一個(gè)重要進(jìn)展,代表了Zxin的發(fā)展水平。
5、紫外可見分光光度計(jì)信號(hào)顯示系統(tǒng)選擇
將檢測器輸出的信號(hào)放大,并顯示出來的裝置。舊型號(hào)紫外可見分光光度計(jì)采用檢流計(jì)、微安表作顯示裝置,直接讀出吸光度或透光率;現(xiàn)階段紫外可見分光光度計(jì),多采用數(shù)字電壓表等顯示,并用記錄儀直接繪制出吸收(或透射)曲線,并配有計(jì)算機(jī)數(shù)據(jù)處理器等。
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