核酸提取儀是應(yīng)用配套的核酸提取試劑來使得樣本核酸提取工作自動完成的儀器。其在環(huán)境微生物檢測、食品安全檢測、輸血安全、法醫(yī)學(xué)鑒定、疾病控制ZX、臨床疾病診斷、生物學(xué)研究以及畜牧業(yè)等多種領(lǐng)域得到廣泛地應(yīng)用。下面就讓小編帶你了解一下SDS法。

SDS法原理：

SDS為一種陰離子去垢劑，在高溫（55-65攝氏度）條件下可以使細(xì)胞裂解，使染色體離析，蛋白質(zhì)變性，從而使核酸釋放出。將高鹽（NH4Ac或者KAc）的濃度提高并且將溫度（冰?。┙档?，沉淀蛋白質(zhì)以及多糖雜質(zhì)，離心后將沉淀去除。使用酚或者氯仿對上清液中的DNA抽提，反復(fù)抽提以后使用乙醇將水相中的DNA沉淀。

SDS提取緩沖液的配方以及作用

1、終濃度50mM Tris-HCL(pH 8.0)

作用：為了避免核酸被破壞，Tris-HCL(pH 8.0)提供了一個緩沖環(huán)境。

2.終濃度20mM EDTA(pH 8.0)

作用：EDTA螯合錳離子或者鎂離子，使DNase活性得以YZ。

3.終濃度0.4M NaCl

作用：NaCl提供了一個高鹽環(huán)境，充分溶解DNP，在液相中存在。

4.終濃度2％SDS

作用：SDS在高溫（55-65攝氏度）條件下裂解細(xì)胞，使蛋白質(zhì)變性，釋放出核酸。

SDS法實驗流程

動物組織-液氮研磨或者勻漿-細(xì)胞裂解-抽提-上層溶液-酒精沉淀-離心洗滌-干燥溶解-DNA溶液

SDS法應(yīng)用

SDS法對于如動物組織、細(xì)胞、全血、細(xì)菌以及酵母等大部分實驗材料基因組DNA提取。