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多肽合成儀的檢測方法

更新時間:2025-10-22 23:52:41 類型: 閱讀量:1387
導(dǎo)讀:合成肽技術(shù)用化學(xué)手段將氨基酸依次定向地縮合成多肽或蛋白質(zhì)的技術(shù)。大多數(shù)天然多肽和蛋白質(zhì)都由a-氨基酸構(gòu)成。氨基酸分子內(nèi)可有3個化學(xué)活潑的基團(tuán)即側(cè)鏈、氨基及羧基,與α-碳原子共價連接。

在1963年,美國洛克菲勒大學(xué)教授Bruce Merrifield 發(fā)明的多肽固相合成技術(shù)(SPPS)是多肽合成領(lǐng)域的一個重大突破,對化學(xué),生化,醫(yī)藥,免疫和基因科學(xué)等學(xué)科和領(lǐng)域都起了巨大的促進(jìn)作用。 他本人也因此項發(fā)明榮獲1984諾貝爾化學(xué)獎。


合成肽技術(shù)(techniques for peptide synthesis)用化學(xué)手段將氨基酸依次定向地縮合成多肽或蛋白質(zhì)的技術(shù)。大多數(shù)天然多肽和蛋白質(zhì)都由a-氨基酸構(gòu)成。氨基酸分子內(nèi)可有3個化學(xué)活潑的基團(tuán)即側(cè)鏈、氨基及羧基,與α-碳原子共價連接。


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檢測方法

1. UV Monitor

多肽合成儀中,如UV Monitor的在線檢測耦合效果的裝置通常是選配裝置,客戶對于多肽合成儀的選購應(yīng)當(dāng)按照實驗的需要。多肽合成的每一部氨基酸偶聯(lián)效果使操作者能夠直觀的看到,從而針對特定的序列調(diào)整合成設(shè)置,從而使得效果Z終達(dá)到Z佳。UV Monitor對于不熟悉多肽合成儀操作的用戶來說具有相當(dāng)重要的作用。


2.試劑檢測

如果用戶選購的多肽合成儀沒有在線檢測附件,也能夠通過試劑檢測方法做基本的耦合效果測定實驗。固相多肽合成中,主要通過對樹脂上游離氨基的檢測來對連接效率進(jìn)行判斷。檢測方法叫做Kaiser方法,若有游離氨基,則呈蘭色,或紅褐色(pro,ser,His)顯示。Kaiser試劑包含(1)2% 0.001M KCN的吡啶溶配制中的吡啶需要經(jīng)過茚三酮處理后,重蒸后再使用(2)80% 苯酚的乙醇溶液(3)6% 茚三酮的乙醇溶液。在檢測的過程中將少量樹脂取出,將A,B,C各加入2-3滴,100℃下加熱1-2min,如果樹脂呈現(xiàn)紅褐色,蘭色或者溶液有蘭色,那么說明還有游離氨基存在,不然就表示完全連接。


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