紫外可見分光光度計(jì)檢定規(guī)程適用于新制造、使用中和修理后的波長(zhǎng)范圍為190~850nm或以上述區(qū)域?yàn)橹饕V區(qū)的單光束紫外可見分光光度計(jì)進(jìn)行檢定，以保證其測(cè)試結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

紫外可見分光光度計(jì)檢定程序

　　根據(jù)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，為快速可靠地檢定紫外可見分光光度計(jì)，可按以下程序進(jìn)行檢定：

　　外觀→絕緣電阻→穩(wěn)定度→電源電壓影響→基線平直度→噪聲→波長(zhǎng)準(zhǔn)確度與重復(fù)性→靈敏度、Z小光譜通帶→吸收池配套性→雜散輻射率→透射比準(zhǔn)確度與透射比重復(fù)性

　　先將紫外可見分光光度計(jì)預(yù)熱20min，在通電預(yù)熱的同時(shí)，可進(jìn)行外觀檢查。必須注意，波長(zhǎng)準(zhǔn)確度與波長(zhǎng)重復(fù)性的檢定，一定要在儀器穩(wěn)定度合格的條件下進(jìn)行，接著可進(jìn)行靈敏度或Z小光譜帶寬的檢定。

　　當(dāng)用標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)透射比準(zhǔn)確度與透射比重復(fù)性以及雜散輻射率進(jìn)行檢定前，需對(duì)吸收池配套性進(jìn)行檢定，因?yàn)槲粘夭慌涮拙蛯⒔o透射比正確度的檢定帶來誤差，所以這種順序Z好不要倒置。當(dāng)然也有的計(jì)量部門用自己的洗后吃給用戶檢定儀器，這樣做的結(jié)果檢定誤差較小，但與實(shí)際使用情況有所脫節(jié)。所以應(yīng)該將用戶的吸收池檢定后，誤差大的一只裝空白溶液，其余裝待測(cè)溶液，這樣檢定的透射比準(zhǔn)確度與透射比重復(fù)性才準(zhǔn)確可靠，對(duì)用戶使用紫外可見分光光度計(jì)也更具有實(shí)際意義。

紫外可見分光光度計(jì)檢定方法

　　紫外可見分光光度計(jì)具體檢定過程如下：

　　1、外觀及初步檢查

　　紫外可見分光光度計(jì)各調(diào)節(jié)器應(yīng)調(diào)節(jié)自如。鎢燈和氘燈應(yīng)能正常啟輝，儀器的波長(zhǎng)度盤置于580nm處，在樣品室內(nèi)應(yīng)能觀察到光亮均勻、邊緣均勻的黃色光斑，光斑的亮度應(yīng)隨狹縫寬度的增大而增強(qiáng)。

　　2、波長(zhǎng)準(zhǔn)確度與波長(zhǎng)重復(fù)性的檢定

　　首先開啟氘燈，將光源選擇開關(guān)轉(zhuǎn)到氘燈位置，量程選擇開關(guān)調(diào)至0~1**%T，靈敏度開關(guān)轉(zhuǎn)向低(LOW)位置，波長(zhǎng)調(diào)至486.00nm譜線。

　　調(diào)節(jié)調(diào)零旋鈕，使數(shù)字表顯示0000.0，關(guān)閉樣品室蓋，調(diào)節(jié)光亮旋鈕，使數(shù)字表顯示050.0。調(diào)節(jié)波長(zhǎng)旋鈕，從短波方向緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)到486.00nm附近，觀察數(shù)字表顯示Zda值時(shí)的波長(zhǎng)，重復(fù)三次。

　　然后關(guān)閉氘燈，開啟鎢燈，用標(biāo)準(zhǔn)鐠釹濾光片的529.8nm和807.7nm的吸收峰做參考波長(zhǎng)，再次測(cè)量波長(zhǎng)準(zhǔn)確度。接著關(guān)閉氘燈和鎢燈，打開光源室蓋，設(shè)法將汞燈的窗口對(duì)準(zhǔn)光源入射孔，臨時(shí)固定好。

　　Z后開啟汞燈光源，預(yù)熱至發(fā)光穩(wěn)定，即可對(duì)波長(zhǎng)進(jìn)行檢定。如數(shù)字表顯示很小的數(shù)字，則說明石英汞燈光亮不夠，應(yīng)重新對(duì)準(zhǔn)。確實(shí)對(duì)準(zhǔn)后，數(shù)字表的數(shù)字值若仍然很小，應(yīng)提高紫外可見分光光度計(jì)的靈敏度，即將靈敏度開關(guān)撥向“HIGH”(高)位置。

　　3、靈敏度

　　將棱鏡式紫外可見分光光度計(jì)波長(zhǎng)分別置于200.0nm、625nm處，調(diào)節(jié)暗電流為零后，打開光門，調(diào)節(jié)狹縫寬度，使透射比示值為1**%，讀取相應(yīng)的狹縫寬度。

　　Z小光譜帶寬光柵型紫外可見分光光度計(jì)用汞燈435.83nm或儀器固有的氘燈的特征譜線，如656.1nm(656.3nm)。該儀器為自動(dòng)掃描式儀器，可直接掃描譜圖，也可手動(dòng)操作，將儀器波長(zhǎng)度盤由短波向長(zhǎng)波方向移動(dòng)，記錄ZX波長(zhǎng)兩側(cè)透射比值下降50%時(shí)的波長(zhǎng)讀書λ之差，即為紫外可見分光光度計(jì)實(shí)際光譜帶寬。

　　4、10mm石英吸收池配套檢定

　　取兩只清洗干凈的吸收池，外邊用干凈的綢布擦干，內(nèi)裝蒸餾水，放入比色槽中(吸收池的箭頭指向光電管方向)。波長(zhǎng)調(diào)至220nm光源，關(guān)閉樣品室蓋，調(diào)節(jié)光量旋鈕置000.0，拉出一檔，使另一只吸收池對(duì)準(zhǔn)光軸，記下數(shù)字表讀數(shù)，兩只吸收池透射比之差若小于0.2%，則可視為一套。

　　5、透射比準(zhǔn)確度與透射比重復(fù)性

　　用透射比標(biāo)稱值分別為10%、20%、30%的光譜中性濾光片，分別在440、546、635nm處，以空氣為參比，分開測(cè)量各濾光片的透射比。