細(xì)胞培養(yǎng)指的是在體外模擬體內(nèi)的環(huán)境（無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養(yǎng)條件等），讓它生存、生長、繁殖并且能夠維持主要的結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。細(xì)胞培養(yǎng)在生物學(xué)中又叫做細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。不論對于整個(gè)生物工程技術(shù)，還是其中之一的生物克隆技術(shù)來說，細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以通過一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)成為大量的單細(xì)胞或極少分化的多細(xì)胞，細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)研究方法中及其重要和常見的技術(shù)，由細(xì)胞培養(yǎng)不僅能夠獲取大量細(xì)胞，還能夠借此研究細(xì)胞其他的相關(guān)知識(shí)。

注意事項(xiàng)

（1）diyi次開始培養(yǎng)某種細(xì)胞時(shí)，需要了解該細(xì)胞的詳細(xì)信息，包括需要使用的培養(yǎng)基、血清、添加劑、通常的消化時(shí)間、傳代時(shí)間等

（2）進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，必須嚴(yán)格按照下列步驟操作：

①保證細(xì)胞操作用的所有溶液和耗材都已經(jīng)經(jīng)過消毒和檢測，不要使用不確定的溶液和耗材，除非情況特殊，不然不能夠用別人的溶液。

②卷起衣服的袖口和扎緊白大褂的袖口。

③保證酒精燈內(nèi)的酒精量充足，如果不夠，要及時(shí)補(bǔ)充

④保證把所有需要用到的溶液和耗材放在方便拿到的位置。實(shí)驗(yàn)開始前把所有瓶蓋旋松，方便單手開啟瓶蓋。

⑤盡量不要直接傾倒溶液，如果溶液粘在瓶口，請用噴過75%酒精的紙巾仔細(xì)清潔瓶口周圍（不要接觸到瓶口）然后在火焰上燒灼。

⑥操作時(shí)需要確保所用的耗材都是潔凈的。

⑦實(shí)驗(yàn)完成后要及時(shí)清理垃圾，維持工作區(qū)域清潔整齊。

（3）預(yù)防細(xì)胞污染

①要防止實(shí)驗(yàn)用品被污染。要徹底清洗、消毒細(xì)胞培養(yǎng)所用試劑、耗材、器材，各種溶液要認(rèn)真滅菌，且在無菌實(shí)驗(yàn)檢測陰性后方可以使用。要定期清潔、消毒、滅菌操作室及剩余的無菌器材。

②操作的過程要預(yù)防被污染。

③進(jìn)入細(xì)胞間要穿著白大褂，不能穿著容易起靜電或吸附灰塵的衣物。

④實(shí)驗(yàn)前需要檢查佩戴的手套，保證沒有問題，不能要接觸過生物安全柜之外的物品，，如果接觸過，就必須對手套進(jìn)行消毒。

⑤為了不影響生物安全柜的風(fēng)簾，在進(jìn)入細(xì)胞間后要關(guān)好門，盡量不要走動(dòng)。實(shí)驗(yàn)開始前，手和瓶蓋需要用75%酒精棉球擦拭消毒。為了避免對細(xì)胞造成污染，那么實(shí)驗(yàn)所需的器材、溶液和細(xì)胞要嚴(yán)格的進(jìn)行檢查。不能把沒有消毒的物品帶進(jìn)無菌室，更加不能使用未經(jīng)消毒的物品。

⑥細(xì)胞操作時(shí)動(dòng)作要輕，打開瓶口必須在火焰周圍無菌的位置，把瓶口放在火焰周圍簡單轉(zhuǎn)動(dòng)燒灼。

⑦在實(shí)驗(yàn)的時(shí)候要盡量放低生物安全柜的隔板，不要對著工作區(qū)打噴嚏或咳嗽，盡量不要說話。

⑧為了防止瓶蓋被誤操作所污染，瓶蓋需要倒放在離自己較遠(yuǎn)的地方。

⑨為了防止衣服上掉落不明物體對細(xì)胞的污染，盡量不要從敞開的容器口上方經(jīng)過。

⑩實(shí)驗(yàn)操作時(shí)要注意巴斯德吸管、移液槍槍頭和移液管應(yīng)該及時(shí)更換，。如果發(fā)現(xiàn)接觸了非潔凈或者無法確定潔凈的物品就必須直接丟棄。實(shí)驗(yàn)完畢后需要及時(shí)收拾，保持實(shí)驗(yàn)室清潔整齊，Z后用75%酒精清潔臺(tái)面。

（4）防止細(xì)胞交叉污染

①在進(jìn)行多種細(xì)胞培養(yǎng)操作時(shí)，為了方便辨認(rèn)實(shí)驗(yàn)所用的器具，Z好在器具上做好標(biāo)記，嚴(yán)格區(qū)分。Z好不要多種細(xì)胞多種操作一起進(jìn)行以免發(fā)生混亂，Z好一次一次只處理一種細(xì)胞，按順序進(jìn)行操作

②在進(jìn)行換液或傳代操作時(shí)，不要讓粘有細(xì)胞的移液槍頭和移液管和試劑瓶瓶口接觸，防止把細(xì)胞帶到培養(yǎng)基中污染其他細(xì)胞。

③所有細(xì)胞一旦購置必須及時(shí)凍存，如果發(fā)生污染必須重新復(fù)蘇細(xì)胞，繼續(xù)培養(yǎng)。