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人結(jié)締組織生長因子(CTGF)檢測試劑盒
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本文由 上海信裕生物技術(shù)有限公司 整理匯編
2024-09-30 10:02 208閱讀次數(shù)
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人結(jié)締組織生長因子(CTGF)檢測試劑盒
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人結(jié)締組織生長因子(CTGF)檢測試劑盒
- 人結(jié)締組織生長因子(CTGF)檢測試劑盒[詳細]
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2024-09-30 10:02
期刊論文
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人結(jié)締組織生長因子(CTGF)ELISA試劑盒
- 人結(jié)締組織生長因子(CTGF)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-29 05:07
產(chǎn)品樣冊
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人結(jié)締組織生長因子(CTGF)ELISA試劑盒說明書
- 人結(jié)締組織生長因子(CTGF)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人CTGF單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的CTGF與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人CTGF,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,CTGF濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中CTGF濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):4ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。2.標準品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成4000pg/ml的溶液。設(shè)標準管8管,每管加入標本稀釋液300ul。在**管中加入4000pg/ml的標準品溶液300ul混勻后用加樣器吸出300ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出300ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標準品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)CTGF含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的CTGF檢測濃度小于16pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人CTGF。不與人其它細胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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大鼠結(jié)締組織生長因子(CTGF)ELISA試劑盒
- 大鼠結(jié)締組織生長因子(CTGF)ELISA試劑盒[詳細]
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2013-12-11 00:00
報價單
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人結(jié)締組織生長因子(CTGF)ELISA Kit文獻
- 人結(jié)締組織生長因子(CTGF)ELISA Kit文獻[詳細]
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2014-08-22 00:00
專利
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人結(jié)締組織生長因子(CTGF)ELISA Kit說明書
- 人結(jié)締組織生長因子(CTGF)ELISA Kit說明書[詳細]
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2014-08-22 00:00
操作手冊
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大鼠結(jié)締組織生長因子(CTGF)ELISA試劑盒說明書
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com大鼠結(jié)締組織生長因子(CTGF)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠CTGF單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的CTGF與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠CTGF,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,CTGF濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中CTGF濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):8ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。2.標準品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成8000pg/ml的溶液。設(shè)標準管8管,每管加入標本稀釋液300ul。在**管中加入8000pg/ml的標準品溶液300ul混勻后用加樣器吸出300ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出300ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標準品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)CTGF含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的CTGF檢測濃度小于30pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的大鼠CTGF。不與大鼠其它細胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊
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小鼠結(jié)締組織生長因子(CTGF)ELISA試劑盒說明書
- 小鼠結(jié)締組織生長因子(CTGF)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗小鼠CTGF單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的CTGF與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗小鼠CTGF,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,CTGF濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中CTGF濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):60ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。2.標準品液配制:使用前加入3ml蒸餾水混勻,配成20ng/ml的溶液。設(shè)標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標準品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)CTGF含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的CTGF檢測濃度小于16pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的小鼠CTGF。不與小鼠其它細胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標準曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠結(jié)締組織生長因子(CTGF)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
- 實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中大鼠結(jié)締組織生長因子(CTGF)水平。用純化的大鼠結(jié)締組織生長因子(CTGF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入大鼠結(jié)締組織生長因子(CTGF),再與HRP標記的結(jié)締組織生長因子(CTGF)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的結(jié)締組織生長因子(CTGF)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠結(jié)締組織生長因子(CTGF)濃度。[詳細]
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2018-10-03 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠結(jié)締組織生長因子試劑盒使用步驟
- 大鼠結(jié)締組織生長因子試劑盒使用步驟[詳細]
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2015-03-16 00:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠結(jié)締組織生長因子試劑盒使用說明書
- 實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中大鼠結(jié)締組織生長因子(CTGF)水平。用純化的大鼠結(jié)締組織生長因子(CTGF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入大鼠結(jié)締組織生長因子(CTGF),再與HRP標記的結(jié)締組織生長因子(CTGF)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的結(jié)締組織生長因子(CTGF)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠結(jié)締組織生長因子(CTGF)濃度。[詳細]
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2018-10-03 10:00
產(chǎn)品樣冊
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結(jié)締組織生長因子與瘢痕
- 結(jié)締組織生長因子與瘢痕[詳細]
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2012-03-20 00:00
其它
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人結(jié)締組織活化肽(CTAP)檢測試劑盒
- 人結(jié)締組織活化肽(CTAP)檢測試劑盒[詳細]
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2024-09-18 18:09
標準
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人肝細胞生長因子(HGF)檢測試劑盒
- 人肝細胞生長因子(HGF)檢測試劑盒[詳細]
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2024-09-29 09:37
報價單
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人結(jié)締組織活化肽(CTAP)ELISA試劑盒
- 人結(jié)締組織活化肽(CTAP)ELISA試劑盒[詳細]
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2013-12-09 00:00
應(yīng)用文章
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人結(jié)締組織活化肽(CTAP)ELISA試劑盒
- 人結(jié)締組織活化肽(CTAP)ELISA試劑盒[詳細]
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2014-08-21 00:00
產(chǎn)品樣冊
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人角化細胞生長因子(KGF)檢測試劑盒
- 人角化細胞生長因子(KGF)檢測試劑盒[詳細]
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2015-03-06 00:00
課件
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人腫瘤血管生長因子(TAF)檢測試劑盒
- 人腫瘤血管生長因子(TAF)檢測試劑盒[詳細]
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2015-03-10 00:00
選購指南
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96T人胎盤生長因子ELISA檢測試劑盒
- 人胎盤生長因子ELISA檢測試劑盒 本試劑僅供研究使用試驗原理: PLGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知PLGF濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將PLGF和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中PLGF的濃度呈比例關(guān)系。自備材料蒸餾水。加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。人胎盤生長因子ELISA檢測試劑盒操作注意事項試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。人胎盤生長因子ELISA檢測試劑盒操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入60ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。人胎盤生長因子ELISA檢測試劑盒結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應(yīng)的PLGF標準品濃度為橫坐標(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的PLGF含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlPhospho-Dab1(Tyr220)磷酸化Disabled1抗體0.1mlELK1細胞轉(zhuǎn)錄因子ELK1抗體0.2mlElastin抗彈性蛋白抗體0.2mlELAVL1/HuR(ELAV-likeprotein1/Hu-antigenR)ELAVL1抗體0.2mlEmp1(epithelialmembraneprotein1)表皮膜蛋白1抗體0.2mlsFRP-4抗子宮內(nèi)膜抗體0.2mlEndostatin內(nèi)皮抑素/內(nèi)皮他丁抗體0.1mlPhospho-Dab1(Ser491)磷酸化Disabled1抗體0.1mlPhospho-DARPP32(Thr34)磷酸化多巴胺/cAMP調(diào)節(jié)神經(jīng)磷蛋白抗體0.1mlPhospho-DARPP32(Thr75)磷酸化多巴胺/cAMP調(diào)節(jié)磷蛋白抗體0.1mlPhospho-DBC1(Thr454)磷酸化膀胱癌缺失基因10.1mlEndostatin內(nèi)皮抑素/內(nèi)皮他丁抗體0.2mlbetaendorphin(β-endorphin)抗β內(nèi)啡肽抗體0.1mlbetaendorphin(β-endorphin)抗β內(nèi)啡肽抗體0.2mlenvelopeglycoproteinYellowfevervirus抗黃熱病毒包膜糖蛋白抗體0.2mlENPP1/PC-1(ectonucleotidepyrophosphatase/phosphodiesterase1)抗核苷酸內(nèi)焦磷酸酶/磷酸二酯酶1抗體0.2mlENPP3/CD203c(ectonucleotidepyrophosphatase/phosphodiesterase3)抗ENPP3抗體0.2mlphospho-DNAPK(Thr2609)磷酸化DNA依賴性蛋白激酶抗體0.1mlPhospho-p56Dok2(Tyr351)磷酸化D酪氨酸激酶衰減蛋白2抗體0.1mlPhospho-p56Dok2(Tyr299)磷酸化D酪氨酸激酶衰減蛋白2抗體0.1ml[詳細]
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2018-09-14 10:01
產(chǎn)品樣冊
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人肝細胞生長因子(HGF)ELISA檢測試劑盒
- 人肝細胞生長因子(HGF)樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。6.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。人肝細胞生長因子(HGF)操作步驟1.標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔,在**、第二孔中分別加標準品100μl,然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為1200ng/L,800ng/L,400ng/L,200ng/L,100ng/L)。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。[詳細]
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2018-09-19 10:00
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