資料庫(kù)
(PAP Kit),大鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物ELISA技術(shù)
本文由 上??茖W(xué)儀器有限公司 整理匯編
2018-10-23 10:30 321閱讀次數(shù)
文檔僅可預(yù)覽首頁(yè)內(nèi)容,請(qǐng)下載后查看全文信息!
立即下載
elisa實(shí)驗(yàn)測(cè)定(PAPKit),大鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物ELISA技術(shù)原理則采用酶聯(lián)免疫技術(shù),檢測(cè)生物學(xué)樣本PAPKit定量、PAPKit定性分析,大鼠elisa試劑盒說(shuō)明書,老師可以打電話詢要。試劑盒包裝:原裝進(jìn)口只有96孔的,國(guó)產(chǎn)的96孔48孔都有大鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物正常參考值,請(qǐng)來(lái)電詢問(wèn)(PAPKit),大鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物ELISA技術(shù)廣銳生物堅(jiān)守品質(zhì)、銳意進(jìn)取,質(zhì)量嚴(yán)控,品質(zhì)保障,希望長(zhǎng)期合作!免疫組化抗體稀釋液100ML價(jià)格人elisa試劑盒,人透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白ELISA試劑盒,(HABP)Elisa試劑盒HumanEpidermalgrowthfactor,EGFELISAKitAntic-erbB2雞可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)elisa試劑盒ER949人視黃醇結(jié)合蛋白(RBP)elisa試劑盒CAS:4197-24-4,石炭酸復(fù)紅,石炭酸品紅,卡寶品紅,CarbolfuchsinCAS:819-83-0,β-甘油磷酸二鈉水合物,β-甘油磷酸鈉水合物,甘油2-磷酸二鈉鹽水合物,2-甘油磷酸二鈉鹽水合物,β-磷酸甘油酯二鈉鹽水合物,BGP小鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)elisa試劑盒人空泡毒素相關(guān)蛋白Aelisa試劑盒VacA小鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)elisa試劑盒雞抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)elisa試劑盒ER1919
登錄或新用戶注冊(cè)
請(qǐng)用手機(jī)微信掃描下方二維碼 快速登錄 或注冊(cè)新賬號(hào)
微信掃碼,手機(jī)電腦聯(lián)動(dòng)
更多資料
(PAP Kit),大鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物ELISA技術(shù)
elisa實(shí)驗(yàn)測(cè)定(PAPKit),大鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物ELISA技術(shù)原理則采用酶聯(lián)免疫技術(shù),檢測(cè)生物學(xué)樣本PAPKit定量、PAPKit定性分析,大鼠elisa試劑盒說(shuō)明書,老師可以打電話詢要。試劑盒包裝:原裝進(jìn)口只有96孔的,國(guó)產(chǎn)的96孔48孔都有大鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物正常參考值,請(qǐng)來(lái)電詢問(wèn)(PAPKit),大鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物ELISA技術(shù)廣銳生物堅(jiān)守品質(zhì)、銳意進(jìn)取,質(zhì)量嚴(yán)控,品質(zhì)保障,希望長(zhǎng)期合作!免疫組化抗體稀釋液100ML價(jià)格人elisa試劑盒,人透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白ELISA試劑盒,(HABP)Elisa試劑盒HumanEpidermalgrowthfactor,EGFELISAKitAntic-erbB2雞可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)elisa試劑盒ER949人視黃醇結(jié)合蛋白(RBP)elisa試劑盒CAS:4197-24-4,石炭酸復(fù)紅,石炭酸品紅,卡寶品紅,CarbolfuchsinCAS:819-83-0,β-甘油磷酸二鈉水合物,β-甘油磷酸鈉水合物,甘油2-磷酸二鈉鹽水合物,2-甘油磷酸二鈉鹽水合物,β-磷酸甘油酯二鈉鹽水合物,BGP小鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)elisa試劑盒人空泡毒素相關(guān)蛋白Aelisa試劑盒VacA小鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)elisa試劑盒雞抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)elisa試劑盒ER1919[詳細(xì)]
2018-10-23 10:30
產(chǎn)品樣冊(cè)
大鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒
大鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
2024-09-30 07:52
課件
小鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒
小鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
2013-12-09 00:00
操作手冊(cè)
豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒
豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
2014-08-20 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
人纖溶酶-抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒說(shuō)明書
電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com人纖溶酶-抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人PAP單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的PAP與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人PAP,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測(cè)OD值,PAP濃度與OD值成正比,可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中PAP濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):2000ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液等盡早檢測(cè),2-8℃保存48小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清測(cè)定前用標(biāo)本稀釋液至少作1:20稀釋(取10ul,加標(biāo)本稀釋液190ul,稀釋20倍)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成2000ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入2000ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測(cè)程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品200、100、50、25、12.5、6.25、3.12、0ng/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)PAP含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的PAP檢測(cè)濃度小于1.5ng/ml。2.特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的人PAP。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見(jiàn)變異系數(shù)均小于10%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過(guò)程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開(kāi)封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊(cè)
小鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物 (PAP) ELISA 檢測(cè)試劑盒
試驗(yàn)原理:PAP試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知PAP濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將PAP和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中PAP的濃度呈比例關(guān)系。小鼠(Mouse)纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA檢測(cè)試劑盒試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品:800ng/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說(shuō)明書進(jìn)行稀稀空白對(duì)照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶(4.0ml)1瓶(2.0ml)即用型生物素標(biāo)記的抗PAP抗體1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說(shuō)明書進(jìn)行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型標(biāo)本稀釋液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。小鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA檢測(cè)試劑盒安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。2.實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項(xiàng)1.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。2.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。9.按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液5、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。小鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA檢測(cè)試劑盒試劑的準(zhǔn)備1.標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行:800ng/ml(6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。400ng/ml(5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液200ng/ml(4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100ng/ml(3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ng/ml(2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液25ng/ml(1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0ng/ml(空白對(duì)照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入60ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。9.在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。建議使用的實(shí)驗(yàn)方案標(biāo)準(zhǔn)品濃度(ng/ml)A800800樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F2525樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的PAP標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的PAP含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測(cè)值范圍:0-800ng/ml4、敏感度:1.0ng/ml[詳細(xì)]
2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
人纖溶酶/抗纖溶酶復(fù)合體(PAP)ELISA試劑盒
人纖溶酶/抗纖溶酶復(fù)合體(PAP)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
2015-03-18 00:00
專利
大鼠纖溶YZ因子/凝血酶激活的纖溶YZ物(TAFI)ELISA試
大鼠纖溶YZ因子/凝血酶激活的纖溶YZ物(TAFI)ELISA試[詳細(xì)]
2013-12-10 00:00
專利
人纖溶酶原物因子 pai elisa試劑盒說(shuō)明
人纖溶酶原物因子 pai elisa試劑盒說(shuō)明本生生物公司供應(yīng):ELISA試劑盒,動(dòng)物血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進(jìn)口凍存管,細(xì)胞培養(yǎng)皿,培養(yǎng)板,培養(yǎng)瓶,進(jìn)口吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過(guò)濾器等。[詳細(xì)]
2022-10-25 14:58
應(yīng)用文章
小鼠2纖溶酶YZ物(2-PI)ELISA試劑盒
小鼠2纖溶酶YZ物(2-PI)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
2024-09-17 19:46
標(biāo)準(zhǔn)
Human Plasmin 人纖溶酶HPlasmin 說(shuō)明書
HumanPlasminHPlasminHumanPlasminPreparedfromGlu-Plasminogenusingurokinase,whichisnotremovedafteractivation.PurityisjudgedbySDS-PAGE.Plasminisatwo-chainserineproteaselinkedby2disulfidebonds.Amongotherroles,plasminisresponsibleforthelysisofthefibrinclot,thusproducingfibrindegradationproducts(FDP's).Buffercomposition=0.1MHEPES-HCl/0.1MSodiumAcetate/pH8.5*ExtinctionCoefficient(1%)=17.0MolecularWeight=83,000daltons[詳細(xì)]
2018-09-29 10:03
產(chǎn)品樣冊(cè)
大鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA試劑盒
大鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
2013-12-10 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
大鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA試劑盒
大鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
2024-09-30 02:36
操作手冊(cè)
大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒
大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
2013-12-11 00:00
應(yīng)用文章
大鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA) ELISA試劑盒
大鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA) ELISA試劑盒[詳細(xì)]
2013-12-11 00:00
專利
大鼠纖溶酶原激活物YZ因子(PAI)ELISA試劑盒
大鼠纖溶酶原激活物YZ因子(PAI)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
2024-09-29 00:38
標(biāo)準(zhǔn)
大鼠纖溶酶原激活劑YZ物-1 (PAI-1)ELISA試劑盒
大鼠纖溶酶原激活劑YZ物-1(PAI-1)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠PAI-1單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的PAI-1與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠PAI-1,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測(cè)OD值,PAI-1濃度與OD值成正比,可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中PAI-1濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):600ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè),2-8℃保存48小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清可能需要稀釋,請(qǐng)先做預(yù)實(shí)驗(yàn),以確定稀釋倍數(shù)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成1200ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入1200ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測(cè)程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品120、60、30、15、7.5、3.75、1.875、0ng/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)PAI-1含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的PAI-1檢測(cè)濃度小于1ng/ml。2.特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的大鼠PAI-1。不與大鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見(jiàn)變異系數(shù)均小于10%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過(guò)程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開(kāi)封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
大鼠纖溶酶原激活物YZ因子1(PAI-1)ELISA試劑盒
大鼠纖溶酶原激活物YZ因子1(PAI-1)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
2024-09-19 05:37
課件
兔子纖溶酶原(Plg)ELISA試劑盒
兔子纖溶酶原(Plg)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
2024-09-29 13:23
期刊論文
人凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)ELISA Kit說(shuō)明書
人凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)ELISA Kit說(shuō)明書[詳細(xì)]
2014-08-21 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
Copyright 2004-2026 yiqi.com All Rights Reserved , 未經(jīng)書面授權(quán) , 頁(yè)面內(nèi)容不得以任何形式進(jìn)行復(fù)制
參與評(píng)論
登錄后參與評(píng)論