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蛋白質(zhì)提取與制備的原理和方法
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本文由 上海士鋒生物科技有限公司 整理匯編
2015-03-19 00:00 364閱讀次數(shù)
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蛋白質(zhì)提取與制備的原理和方法
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蛋白質(zhì)提取與制備的原理和方法
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2015-03-19 00:00
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提取蛋白質(zhì)的方法
- 植物組織蛋白質(zhì)提取方法:1、根據(jù)樣品重量(1g樣品加入3.5ml提取液,可根據(jù)材料不同適當加入),準備提取液放在冰上。2、把樣品放在研缽中用液氮研磨,研磨后加入提取液中在冰上靜置(3-4小時)。3、用離心機離心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃4、提取上清夜,樣品制備完成。蛋白質(zhì)提取液:300ml1、1Mtris-HCl(PH8)45ml2、甘油(Glycerol)75ml3、聚乙烯吡咯烷酮(Polyvinylpolypyrrordone)6g這種方法針對SDS-PAGE,垂直板電泳!三氯醋酸丙酮沉淀法1、在液氮中研磨葉片2、加入樣品體積3倍的提取液在-20℃的條件下,然后離心(4℃8000rpm以上1小時)棄上清。3、加入等體積的冰浴丙酮(含0.07%的β-巰基乙醇),搖勻后離心(4℃8000rpm以上1小時),然后真空干燥沉淀,備用。4、上樣前加入裂解液,室溫放置30分鐘,使蛋白充分溶于裂解液中,然后離心(15℃8000rpm以上1小時或更長時間以沒有沉淀為標準),可臨時保存在4℃待用。5、用Brandford法定量蛋白,然后可分裝放入-80℃?zhèn)溆谩?a href="/doc/detail_87a108bac081a029.html" target="_blank">[詳細]
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2018-09-27 10:00
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2011-12-08 00:00
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蛋白質(zhì)提取與純化技術(shù)
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2013-04-09 00:00
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蛋白質(zhì)提取與純化技術(shù)
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2024-09-19 23:59
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2013-11-01 00:00
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- 一、植物組織蛋白質(zhì)提取方法1、根據(jù)樣品重量(1g樣品加入3.5ml提取液,可根據(jù)材料不同適當加入),準備提取液放在冰上。2、把樣品放在研缽中用液氮研磨,研磨后加入提取液中在冰上靜置(3-4小時)。3、用離心機離心8000rpm,40min,4℃或11000,rpm,20min,4℃。4、提取上清夜,樣品制備完成。蛋白質(zhì)提取液:300ml1、1Mtris-HCl(PH8)45ml2、甘油(Glycerol)75ml3、聚乙烯吡咯烷酮6g[詳細]
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2018-10-02 10:03
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制備洗滌液的方法與注意事項介紹
- [導(dǎo)讀]在實驗室分析工作中,洗滌玻璃儀器不僅是一項必須做的實驗前的準備工作,也是一項技術(shù)性的工作。儀器洗滌是否符合要求,對檢驗結(jié)果的準確和精密度均有影響。在今天的資料下載內(nèi)容中,上海恒遠生物公司來為大家介紹制備洗滌液的方法與注意事項。一、純酸純堿洗液根據(jù)器皿污垢的性質(zhì),直接用濃硫酸(HCL)或濃硫酸(H2SO4)、濃硝酸(HNO3)浸泡或浸煮器皿(溫度不宜太高,否者濃酸揮發(fā)刺激人)。純堿洗液多采用10%以上的濃燒堿(NaOH)、氫氧化鉀(KOH)或碳酸鈉(Na2CO3)液浸泡或浸煮器皿(可以煮沸)。二、有機溶劑帶有脂肪性污物的器皿,可以用汽油、甲苯、二甲苯、丙酮、酒精、、等有機溶劑擦洗或浸泡。但用有機溶劑作為洗液浪費較大,能用刷子洗刷的大件儀器盡量采用堿性洗液。只有無法使用刷子的小件或特殊形狀的儀器才使用有機溶劑洗滌,如活塞內(nèi)孔、移液管尖頭、滴定管尖頭、滴定管活塞孔、滴管、小瓶等。三、強酸氧化劑洗液是用重鉻酸甲(K2Cr2O7)和濃硫酸(H2SO4)配成。K2Cr2O7在酸性溶液中,有很強的氧化能力,對玻璃儀器又及少有侵蝕作用。所以這種洗液在實驗室內(nèi)使用Z廣泛。 配制濃度各有不同,從5~12%的各種濃度都有。配制方法大致相同:取一定量的K2Cr2O7(工業(yè)品即可),先用約1~2倍的水加熱溶解,稍冷后,將工業(yè)品濃H2SO4所需體積數(shù)徐徐加入K2Cr2O7不溶液中(千萬不能將水或溶液加入H2SO4中),邊倒邊用玻璃棒攪拌,并注意不要濺出,混合均勻,俟冷卻后,裝入洗液瓶備用。新配制的洗液為紅褐色,氧化能力很強。當洗液用久后變?yōu)楹诰G色,即說明洗液無氧化洗滌力。例如,配制12%的洗液500mL。取60克工業(yè)品K2Cr2O7置于100mL水中(加水量不是固定不變的,以能溶解為度),加熱溶解,冷卻,徐徐加入濃H2SO4340mL,邊加邊攪拌,冷后裝瓶備用。這種洗液在使用時要切實注意不能濺到身上,以防“燒"破衣服和損傷皮膚。洗液倒入要洗的儀器中,應(yīng)使儀器周壁全浸洗后稍停一會再倒回洗液瓶。**次用少量水沖洗剛浸洗過的儀器后,廢水不要倒在水池里和下水道里,長久會腐蝕水池和下水道,應(yīng)倒在廢液缸中,缸滿后倒在垃圾里,如果無廢液缸,倒年紀素養(yǎng)人生觀不朽啊激素談話法入水池時,要邊倒邊用大量的水沖洗。四、堿性高錳酸鉀洗液用堿性高錳酸鉀作洗液,作用緩慢,適合用于洗滌有油污的器皿。配法:取高錳酸鉀(KMnO4)4克加少量水溶解后,再加入10%氫氧化鈉(NaOH)100mL。五、洗消液檢驗致癌性化學(xué)物質(zhì)的器皿,為了防止對人體的侵害,在洗刷之前應(yīng)使用對這些致癌性物質(zhì)有破壞分解作用的洗消液進行浸泡,然后再進行洗滌。在食品檢驗中經(jīng)常使用的洗消液有:1%或5%次氯酸鈉(NaOCL)溶液、20%HNO3和2%KMnO4溶液。1%或5%NaOCL溶液對在破壞作用。用1%NaOCL溶液對污染的玻璃儀器浸泡半天或用5%NaOCL溶液浸泡片刻后,即可達到破壞黃曲霉毒素的作用。配法:取漂100克,加水500mL,攪拌均勻,另將工業(yè)用Na2CO380克溶于溫水500mL中,再將兩液混合,攪拌,澄清后過濾,此濾液含NaOCL為2.5%;若用漂粉精配制,則NaCO3的重量應(yīng)加倍,所得溶液濃度約為5%。如需要1%NaOCL溶液,可將上述溶液按比例進行稀釋。20%HNO3溶液和2%KMnO4溶液對苯并(a)芘有破壞作用,被苯并(a)芘污染的玻璃儀器可用20%HNO3浸泡24小時,取出后用自來水沖去殘存酸液,再進行洗滌。被苯并(a)芘污染的乳膠手套及微量注射器等可用2%KMnO4溶液浸泡2小時后,再進行洗滌。五、堿性洗液堿性洗液用于洗滌有油污物的儀器,用此洗液是采用長時間(24小時以上)浸泡法,或者浸煮法。從堿洗液中撈取儀器時,要戴乳膠手套,以免燒傷皮膚。常用的堿洗液有:碳酸鈉液(Na2CO3,即純堿),碳酸氫鈉(Na2HCO3,小蘇打),磷酸鈉(Na3PO4,磷酸三鈉)液,磷酸氫二鈉(Na2HPO4)液等。[詳細]
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2018-11-16 10:02
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- 名稱:焦磷酸鈉分子量:265.9 CASNo.:7722-88-5理化性質(zhì) 白色粉狀或結(jié)晶。相對密度2.534,熔點880℃,沸點938℃。無色透明結(jié)晶或白色結(jié)晶粉末。易溶于水,20℃時100g水中的溶解度為6.23,其水溶液呈堿性;不溶于醇。水溶液在70℃以下尚穩(wěn)定,煮沸則水解成磷酸氫二鈉。在干燥空氣中風(fēng)化,在100℃失去結(jié)晶水。在空氣中易吸收水分而潮解。與堿土金屬離子能生成絡(luò)合物;與Ag+相遇時生成白色的焦磷酸銀。制備方法 由磷酸氫二鈉經(jīng)熔融脫水而成無水焦磷酸鈉,溶于水中結(jié)晶而制得。[詳細]
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2018-09-28 10:00
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2018-09-04 10:00
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2015-08-25 00:00
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