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輔酶Q10原料藥分析
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2016-03-29 00:00 360閱讀次數(shù)
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輔酶Q10原料藥分析
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輔酶Q10原料藥分析
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2016-03-29 00:00
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- 小鼠輔酶Q10(CoQ10)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T6U/L-220U/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定小鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中輔酶Q10(CoQ10)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠輔酶Q10(CoQ10)水平。用純化的小鼠輔酶Q10(CoQ10)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入輔酶Q10(CoQ10),再與HRP標(biāo)記的輔酶Q10(CoQ10)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的輔酶Q10(CoQ10)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠輔酶Q10(CoQ10)濃度。小鼠輔酶Q10(CoQ10)酶聯(lián)免疫分析試劑盒組成標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。小鼠輔酶Q10(CoQ10)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作程序總結(jié):計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。小鼠輔酶Q10(CoQ10)酶聯(lián)免疫分析試劑盒保存條件及有效期1.試劑盒保存:2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-09-14 10:00
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按ZG藥典方法,用GraceSmartHPLC柱分析輔酶Q10 (Coenzy
- 按ZG藥典方法,用GraceSmartHPLC柱分析輔酶Q10 (Coenzy[詳細(xì)]
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2012-06-06 00:00
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閥切換系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)食品中維生素D輔酶Q10的高靈敏度分析
- 閥切換系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)食品中維生素D輔酶Q10的高靈敏度分析[詳細(xì)]
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2024-09-29 05:28
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吡拉西坦原料藥分析
- 吡拉西坦原料藥分析[詳細(xì)]
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2016-03-29 00:00
操作手冊(cè)
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系統(tǒng)對(duì)原料藥中雜質(zhì)分析
- 原料藥(API)中雜質(zhì)的檢測(cè)通常使用HPLC-UV的方法。但是雜質(zhì)的定性和定量分析不僅僅需要將雜質(zhì)與主成分分離,而且需要雜質(zhì)之間互相分離。另外,雜質(zhì)的來(lái)源,無(wú)論是樣品本身或者相關(guān)的外部因素,都需要確定。本文,我們研究了使用具有二維LC/MS/MS特點(diǎn)的Co-SenseforImpurity系統(tǒng)分析一種原料藥中的雜質(zhì)。[詳細(xì)]
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2018-11-13 15:46
產(chǎn)品樣冊(cè)
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CAS:85-61-0,輔酶A,輔酶甲生產(chǎn)線
- 名稱:輔酶甲,4-氨基嘧啶并咪唑CAS號(hào):85-61-0C21H36N7O16P3SxH2O=767.53CAS:85-61-0,輔酶A,輔酶甲生產(chǎn)線級(jí)別:Cellculturetested來(lái)源:酵母含量:≥85%水分:≤10.5%CAS:85-61-0,輔酶A,輔酶甲生產(chǎn)線性狀:白色或微黃色粉末。易溶于水或生理鹽水,水溶度:50mg/ml,不溶于、乙醇。具特殊硫醇?xì)馕队猛荆荷芯?。調(diào)節(jié)糖、脂肪及蛋白質(zhì)代謝的重要因子保存:-20℃,保質(zhì)期2年[詳細(xì)]
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2018-10-23 10:30
產(chǎn)品樣冊(cè)
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原料藥的合成
- 原料藥的合成[詳細(xì)]
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2020-07-21 14:15
應(yīng)用文章
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HPTLC-化學(xué)原料藥分析中的問(wèn)題解決技術(shù)
- HPTLC-化學(xué)原料藥分析中的問(wèn)題解決技術(shù)[詳細(xì)]
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2024-09-29 00:31
實(shí)驗(yàn)操作
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斑馬魚酰基輔酶A(Acyl-Coa)酶聯(lián)免疫分析試劑盒
- 斑馬魚?;o酶A(Acyl-Coa)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T12U/L-550U/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定斑馬魚血清、血漿及相關(guān)液體樣本中?;o酶A(Acyl-Coa)活性。斑馬魚?;o酶A(Acyl-Coa)酶聯(lián)免疫分析試劑盒實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中斑馬魚?;o酶A(Acyl-Coa)水平。用純化的斑馬魚?;o酶A(Acyl-Coa)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入?;o酶A(Acyl-Coa),再與HRP標(biāo)記的酰基輔酶A(Acyl-Coa)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的?;o酶A(Acyl-Coa)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中斑馬魚?;o酶A(Acyl-Coa)活性濃度。試劑盒組成標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。操作程序總結(jié):計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。斑馬魚酰基輔酶A(Acyl-Coa)酶聯(lián)免疫分析試劑盒注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。保存條件及有效期1.試劑盒保存:2-8℃。[詳細(xì)]
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2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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乙酰輔酶 A羧化酶說(shuō)明
- 乙酰輔酶A羧化酶說(shuō)明實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中魚乙酰輔酶A羧化酶(ACC)水平。用純化的魚乙酰輔酶A羧化酶(ACC)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入乙酰輔酶A羧化酶(ACC),再與HRP標(biāo)記的乙酰輔酶A羧化酶(ACC)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的乙酰輔酶A羧化酶(ACC)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中魚乙酰輔酶A羧化酶(ACC)活性濃度。乙酰輔酶A羧化酶說(shuō)明人普通急性淋巴細(xì)胞白血病抗原(CALLA)ELISA試劑盒人上皮膜抗原(EMA)ELISA試劑盒2-氨基-4-吡啶羧酸甲酯,純度:98%人β2糖蛋白1抗體IgM(β2-GP1AbIgM)ELISA試劑盒大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA試劑盒大鼠雄烯二酮(ASD)ELISA試劑盒大鼠白介素1(IL-1)ELISA試劑盒人Ⅲ型膠原(ColⅢ)ELISA試劑盒人淋巴細(xì)胞因子ELISA試劑盒人腺苷脫氨酶(ADA)ELISA試劑盒小鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒大鼠粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒人腫瘤壞死因子相關(guān)激活誘導(dǎo)因子(TRANCE)ELISA試劑盒來(lái)氟米特,純度:AR人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白(angiostatin)ELISA試劑盒乙酰輔酶A羧化酶說(shuō)明魚乙酰輔酶A羧化酶(ACC)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說(shuō)明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測(cè)定魚血清,血漿及相關(guān)液體樣本中乙酰輔酶A羧化酶(ACC)的活性。乙酰輔酶A羧化酶說(shuō)明[詳細(xì)]
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2018-10-23 10:30
產(chǎn)品樣冊(cè)
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組織乙酰輔酶A羧化酶
- 主要用途組織乙酰輔酶A羧化酶(ACETYL-COACARBOXYLASE)活性光度法定量檢測(cè)試劑是一種旨在通過(guò)底物乙酰輔酶A和碳酸氫鹽受到乙酰輔酶A羧化酶的催化反應(yīng)后,進(jìn)而由丙酮酸激酶和乳酸脫氫酶連續(xù)循環(huán)法反應(yīng)系統(tǒng),測(cè)定產(chǎn)生ADP過(guò)程中,伴隨的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)的氧化反應(yīng),即采用光度法測(cè)定其氧化后峰值的變化,以分析組織裂解樣品中乙酰輔酶A羧化酶活性的權(quán)威而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種組織裂解萃取液樣品(動(dòng)物、人體)、部分或完全純化酶樣品中乙酰輔酶A羧化酶活性的定量檢測(cè),以及YZ劑和激活劑的篩選。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,高度敏感。技術(shù)背景乙酰輔酶A羧化酶(AcetylCoACarboxylase;ACC;EC6.4.1.2),又稱為乙酰輔酶A碳酸氫鹽連接酶(AcetylCoA:bicarbonateligase-ATP),是ATP依賴性含生物素酶,參與脂肪酸生物合成。哺乳動(dòng)物乙酰輔酶A羧化酶單體分子量為225-250Kd,含有許多磷酸化位點(diǎn),以及1個(gè)生物素輔基位點(diǎn)、2個(gè)催化位點(diǎn)和1個(gè)異構(gòu)(allosteric)位點(diǎn)。乙酰輔酶A羧化酶催化生物素輔基(prostheticgroup)的羧基化反應(yīng),然后將生物素上的羧基轉(zhuǎn)移到輔酶A上,產(chǎn)生丙二酰輔酶A(malonylCoA),成為長(zhǎng)鏈脂肪酸合成前的關(guān)鍵步驟。AMP活化蛋白激酶(AMP-ActivatedKinase;AMPK)調(diào)節(jié)該酶的活性,而十四烷基氧糠酸(5-(tetradecyloxy)-2-furoicacid;TOFA)YZ該酶的活性?;诘孜镆阴]o酶A(acetylCoA)和碳酸氫鹽,在ATP的存在下,受到乙酰輔酶A羧化酶的催化,獲得產(chǎn)物丙二酰輔酶A和ADP,進(jìn)而通過(guò)丙酮酸激酶(pyruvatekinase;PK)和乳酸脫氫酶(lactatedehydrogenase;LDH)反應(yīng)系統(tǒng)中,還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)轉(zhuǎn)化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(oxidizednicotinamideadeninedinucleotide;NAD),其吸光峰值的變化(340nm),來(lái)定量分析乙酰輔酶A羧化酶的活性。其反應(yīng)方式為:AcetylCoACarboxylaseAcetylCo-A+ATP+HCO3→MalonylCoA+ADP+PipyruvatekinasePhosphoenolpyruvate+ADP→pyruvate+ATPlactatedehydrogenasepyruvate+NADH→lactate+NAD+[詳細(xì)]
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2018-11-18 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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Nexera UC 系統(tǒng)在原料藥雜質(zhì)分析中的應(yīng)用
- 本實(shí)驗(yàn)使用島津NexeraUCSFC-UV系統(tǒng)對(duì)原料藥二乙酰鳥嘌呤及雜質(zhì)進(jìn)行分離,通過(guò)考察多種色譜柱和流動(dòng)相組合,DAICELDCpakSFC-A和乙醇為流動(dòng)相時(shí)可獲得主藥和雜質(zhì)的**分離效果。在此基礎(chǔ)上建立雜質(zhì)SFC分析方法,結(jié)果顯示雜質(zhì)在50~500mg/L線性良好,保留時(shí)間和峰面積重復(fù)性RSD在0.2%和1.5%以內(nèi)。[詳細(xì)]
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2018-08-26 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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Q10/Q30顯微硬度測(cè)試儀產(chǎn)品樣冊(cè)
- Q10/Q30顯微硬度測(cè)試儀產(chǎn)品樣冊(cè)[詳細(xì)]
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2016-10-20 10:14
應(yīng)用文章
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斑馬魚?;o酶氧化酶酶聯(lián)免疫分析詳細(xì)步驟
- 斑馬魚?;o酶氧化酶酶聯(lián)免疫分析詳細(xì)步驟[詳細(xì)]
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2016-08-01 00:00
實(shí)驗(yàn)操作
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斑馬魚酰基輔酶A(Acyl-Coa)酶聯(lián)免疫分析使用說(shuō)明書
- 斑馬魚?;o酶A(Acyl-Coa)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T12U/L-550U/L斑馬魚?;o酶A(Acyl-Coa)酶聯(lián)免疫分析使用目的:本試劑盒用于測(cè)定斑馬魚血清、血漿及相關(guān)液體樣本中?;o酶A(Acyl-Coa)活性。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中斑馬魚?;o酶A(Acyl-Coa)水平。用純化的斑馬魚?;o酶A(Acyl-Coa)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入酰基輔酶A(Acyl-Coa),再與HRP標(biāo)記的酰基輔酶A(Acyl-Coa)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的?;o酶A(Acyl-Coa)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中斑馬魚?;o酶A(Acyl-Coa)活性濃度。標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。斑馬魚酰基輔酶A(Acyl-Coa)酶聯(lián)免疫分析操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。斑馬魚?;o酶A(Acyl-Coa)酶聯(lián)免疫分析操作程序總結(jié):計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請(qǐng)避光保存。7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個(gè)月[詳細(xì)]
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2018-11-04 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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輔酶A(三鋰鹽) 使用說(shuō)明
- 供應(yīng)商:上海經(jīng)科化學(xué)科技有限公司服務(wù)熱線:400-0199-638QQ:472482400(上海經(jīng)科)微信號(hào):shjkchem活動(dòng):消費(fèi)積分可換充值卡!中文:輔酶A(三鋰鹽)英文:CoenzymeA(trilithiumsalt)貨號(hào):C-COA500規(guī)格:500mg價(jià)格:10304元類別:輔助因子簡(jiǎn)介:Megazymes高純輔助因子和染料用于生物化學(xué)酶法測(cè)定和分析。說(shuō)明書:點(diǎn)擊上面“”[詳細(xì)]
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2018-09-30 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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3-羥酰輔酶A脫氫酶(3HCD)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書
- 檢測(cè)范圍:96T0.4ng/L-20ng/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定微生物樣本中3-羥酰輔酶A脫氫酶(3HCD)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中3-羥酰輔酶A脫氫酶(3HCD)水平。用純化的3-羥酰輔酶A脫氫酶(3HCD)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入3-羥酰輔酶A脫氫酶(3HCD),再與HRP標(biāo)記的3-羥酰輔酶A脫氫酶(3HCD)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的3-羥酰輔酶A脫氫酶(3HCD)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中3-羥酰輔酶A脫氫酶(3HCD)濃度。[詳細(xì)]
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2018-10-03 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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