本文由 上海實驗科技股份有限公司ap 整理匯編

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• 安譜實驗助您安心吃火鍋，食品中成分快速檢測解決

  安譜實驗助您安心吃火鍋，食品中成分快速檢測解決[詳細]

  2016-01-25 00:00

  專利

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• 安譜助力食品中16種鄰苯二甲酸酯檢測食品中16種鄰苯二

  安譜助力食品中16種鄰苯二甲酸酯檢測食品中16種鄰苯二[詳細]

  2011-06-08 00:00

  期刊論文

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• ELISA實驗中常見問題的解決

  ELISA操作常見問題1．樣品稀釋酶聯(lián)免疫反應是一種敏感性很高的反應，如果血清不稀釋，不可避免會產生很強的非特異性反應，出現(xiàn)假陽性。因此，國外檢測血清抗體的試劑盒，均規(guī)定將血清稀釋至適當?shù)谋稊?shù)，以降低非特異性反應，使特異性的抗原抗體反應充分體現(xiàn)出來。一般產品的樣品稀釋倍數(shù)均通過大量試驗確定，以保證試驗的靈敏度和特異性。但是，有些用戶未能嚴格按使用說明書操作，如某些產品應取10μl樣品進行稀釋，個別用戶取5μl甚至1μl樣品進行稀釋，由于吸嘴上不可避免地沾有樣品以及微量移液器的精度不夠，因此造成樣品稀釋倍數(shù)不準確，檢測結果出現(xiàn)問題。2．試劑盒平衡試劑盒中所有試劑和板條均應在試驗前平衡至室溫（約25℃），一般需在室溫放置20～30分鐘以上。平衡時間太短會造成試劑混勻不夠，樣品孵育時間相對縮短，ELISA反應不夠充分。冬季室溫低，可將試劑盒置37℃溫箱20分鐘。3．樣品和試劑的混勻稀釋前、后的樣品必須充分混勻，所有試劑在加樣前也須搖勻，以保證試驗的均一性。4．加樣在現(xiàn)在的ELISA商品試劑盒中，必然有使用微量加樣器加入樣本的步驟。注意的關鍵點是：加樣不可太快，要避免加在孔壁上部，不可濺出和產生氣泡。加樣太快，無法保證微量加樣的準確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū)，易導致非特異吸附。濺出會對鄰近孔產生污染。出現(xiàn)氣泡則反應液界面有差異。所以，有時候一份標本用相同的試劑盒這次測定為陽性，下次測定為陰性，往往就是上述加樣及試劑的錯誤所致。5．溫育溫育是ELISA測定中影響測定成敗Z為關鍵的一個因素。ELISA作為一種固相免疫測定，抗原抗體的結合反應在固相上進行，要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原完全結合，必須在一定的溫度條件下反應一定的時間。溫育所需時間與溫度成反比，即溫度越高，則所需時間相對較短。Z為常用的溫育溫度有37℃和室溫，其次是43℃和2～8℃。一些操作者，擅自改變說明書操作，使用自己喜歡的溫育時間和溫育溫度，這樣造成一些不必要的麻煩。因為，不同試劑盒有不同的溫育時間和溫育溫度的選擇，隨意更改溫育時間或者溫育溫度將導致試驗結果出現(xiàn)偏差。6．洗板固相免疫測定技術是一種非均相免疫測定技術，需以洗滌操作將特異結合于固相的抗原或抗體與反應溫育過程中吸附的非特異成份分離開來，以保證ELISA測定的特異性。洗板對于ELISA測定來說，也是極其關鍵的一步。洗液盡量不要溢出孔外；加洗液后要靜置1分鐘，甩去板孔中洗液后，一定要大力拍干；及時更換吸水紙，尤其是拍過酶標記物的吸水紙一定要棄去，否則可能影響試驗結果。7．邊緣效應使用96孔板的ELISA測定中，常發(fā)現(xiàn)有“邊緣效應”，即外周孔顯色較ZX孔深。經研究證實在溫育中的熱力學梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身為不良熱導體，在實驗室的常規(guī)ELISA測定中，將板從室溫（通常在25℃左右）置于37℃溫箱，板也升溫時，在外周孔與ZX孔之間可能存在一熱力學梯度。因此使用水浴或在將反應溶液加入至板孔中時，將板和溶液均加熱至溫育溫度（如37℃），就可以很容易地排除“邊緣效應”，并且可提高測定的重復性。8．顯色顯色一定要控制時間,根據試劑盒說明操作即可。一般來說，顯色時間過短，結果偏低；顯色時間過長，空白或者非特異性顯色增加。9．比色比色要注意波長的選擇。以TMB為底物和以OPD為底物的試劑盒均有使用，而前者比色波長為450nm，后者為492nm，濾光片需根據要求隨時更換。因此，容易出現(xiàn)濾光片錯用的問題。其次，單波長或雙波長比色選擇的問題。所謂的單波長比色即是通常的以對顯色具有Zda吸收的波長如450nm或492nm進行比色測定；而雙波長雙色則酶標儀在敏感波長如450nm和非敏感波長如630nm下各測定一次，敏感波上下的吸光度測定值為樣本測定酶反應特異顯色的吸光度與板孔上指紋、刮痕、灰塵等臟物所致的吸光度之和；非敏感波長下測定即改變波長至一定值，使得樣本測定酶反應特異顯色的吸光度值為零，此時測得的吸光度即為臟物的吸光度值。Z后酶標儀給出的數(shù)值為敏感波長下的吸光度值與非常感波長下的吸光度值的差。因此，雙波長比色測定具有能排除由微滴板本身、板孔內標本的非特異吸收、指紋、刮痕、灰塵等對特異顯色測定吸光度的影響的優(yōu)點。由于ELISA測定中單個空白孔的非特異吸收上有一定程度的不確定性，也就是說每次測定或同次測定空白孔位置的不同均有可能得到不同吸光度測定值，故而在ELISA測定比色時，**是使用雙波長比色。綜上所述，盡管ELISA測定的操作步驟非常簡單，但有可能會影響測定結果的因素卻較多，分布在測定操作的各步之中，尤以加樣、溫育和洗板為甚。為幫助大家分析查找測定中出現(xiàn)問題的可能原因，特對常見問題及原因歸納總結于下表。操作過程中可能出現(xiàn)的問題和解決方法問題可能原因解決方法顯色淡，靈敏度偏低1、試劑盒在運輸途中時間太長，溫度太高盡量縮短運輸時間，夏季應放冰塊降溫2、試劑盒未充分平衡試劑盒從2～8℃冰箱取出后打開盒蓋，于室溫平衡至少20分鐘，確保所有試劑已平衡至室溫（約25℃）。3、培養(yǎng)箱溫度不足37℃注意培養(yǎng)箱溫度，放入反應板后盡量減少開啟次數(shù)以免影響溫度恒定，非隔水式培養(yǎng)箱尤其應注意4、保溫時間不足校正定時鐘準確定時5、洗滌時沖擊力太大、浸泡時間過長、洗滌次數(shù)增加按說明書要求保留洗滌時間，準確記住洗滌次數(shù)6、移液器吸液量不足，吸嘴內壁掛水太多或內壁不清潔校正移液器，吸嘴要配套，裝吸嘴時要緊密，吸嘴內壁要清潔，**一次性使用7、蒸餾水水質有問題使用新鮮合格的蒸餾水8、底物作用時間不足準確定時背景深，全部呈有色,1、洗滌不充分，洗后未拍干，樣品中其它成分殘留或酶標記物殘留濃縮洗液準確配制；10倍濃縮洗滌液如有結晶則應讓結晶于室溫全部溶解后再量取稀釋；充分洗滌，徹底拍干。加樣或加酶拍板的濾紙應棄去不用，不要反復使用，否則易造成污染2、樣品污染樣品應新鮮采集，或低溫保存，防止污染3、培養(yǎng)箱溫度超過37℃或反應時間過長調整培養(yǎng)箱溫度，準確定時4、吸嘴重復使用，未洗凈或消毒不徹底吸嘴盡可能一次性使用5、蒸餾水被污染使用新鮮蒸餾水6、酶等試劑混用不同批號試劑勿混用7、一次實驗的標本量過多，加樣時間太長，導致實際反應時間延長合理安排實驗，避免幾塊酶標板同時加樣重復性不佳1、樣品數(shù)量多少不一，加樣時間有長有短重復某一樣品時，加樣時間盡可能與**次接近2、保溫時間不一致，洗滌條件不一致，操作人員不一致重復測定標本，操作條件、人員等應盡可能與上次保持一致，以排除這些因素造成的不一致的可能性3、加樣量不一致樣品稀釋前應充分混勻，盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴出現(xiàn)白板，陽性對照不顯色顯色液變質更換新的顯色液洗滌液配制有誤請按說明書所示稀釋倍數(shù)配制未加酶結合物而認為已加入注意不要漏加終止液誤作洗滌液稀釋或當?shù)孜镆菏褂妹看渭右呵熬鶓辞鍢撕?a href="/doc/detail_dc731b5905660935.html" target="_blank">[詳細]

  2018-09-02 10:00

  產品樣冊

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• 安譜實驗DR.E標準品培訓報名表

  安譜實驗DR.E標準品培訓報名表[詳細]

  2016-04-25 00:00

  專利

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• 食品中過氧化氫殘留快速檢測試紙

  食品中過氧化氫殘留快速檢測試紙[詳細]

  2014-07-19 00:00

  產品樣冊

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• 食品中脫氫乙酸快速檢測解決方案

  食品中脫氫乙酸快速檢測解決方案[詳細]

  2024-09-12 18:28

  報價單

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• 使用糧食安全綜合檢測儀測定食品中抗生素成分的實驗方案

  　本實驗基于抗原-抗體特異性結合原理和間接競爭酶聯(lián)免疫吸附技術(ELISA)，結合糧食安全綜合檢測儀的光學檢測模塊實現(xiàn)抗生素成分的定量測定。首先，將抗生素抗原包被于酶標板微孔內，加入待測試樣提取液和特[詳細]

  2025-12-31 10:37

  應用文章

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• 安譜推出原料藥中的鉻檢測耗材整體解決方案

  安譜推出原料藥中的鉻檢測耗材整體解決方案[詳細]

  2024-09-12 18:29

  操作手冊

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• 安譜助力食品中16種鄰苯二甲酸酯檢測—食品中16種鄰苯二甲酸酯專用混標

  2011年5月23日，新聞報導臺灣公布大量飲料中由于添加了含有鄰苯二甲酸酯的起云劑，可能會對人體造成傷害。衛(wèi)生部于2011年6月1日發(fā)布緊急通知，《關于公布食品中可能違法添加的非食用物質和易濫用的食品添加劑名單（第六批）的公告（衛(wèi)生部公告2011年第16號）》，將17種鄰苯二甲酸酯列為第劉辟違法食品添加劑。鏈接如下：http://www.moh.gov.cn/publicfiles/business/htmlfiles/mohwsjdj/s7891/201106/51902.htm目前，我國檢測食品中鄰苯二甲酸酯的主要方法是《GB/T21911-2008食品中鄰苯二甲酸酯的測定的標準品》，其中檢測了16種鄰苯二甲酸酯，都包括在衛(wèi)生部的公告中。而公告中另外提及了DINP。關于DNP和DINP：DNP：應為鄰苯二甲酸二壬酯。GB/T21911-2008顯示峰為單峰，此峰應為鄰苯二甲酸二正壬酯（DNNP）。目前各個標準品供應商品牌提供的DNP，有的是異構體混合物，所出峰為多個峰，其中也包括DINP；也有部分提供的是DNNP，為單峰。兩者都屬于DNP。而在實際工業(yè)上使用的DNP塑化劑，應為異構體混合物。所以如果您購買的DNP為異構體混合物，并且沒有要求對DINP進行定量，則不需要再另外購買DINP標準品。[詳細]

  2018-08-10 10:58

  產品樣冊

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• 戴安應對食品中香精香料檢測的液相色譜技術

  戴安應對食品中香精香料檢測的液相色譜技術[詳細]

  2024-09-26 05:47

  報價單

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• Lonestar高效離子遷移譜用于食品中4-甲基咪唑的快速檢測

  LonestarGX離子遷移譜用于食品中4-甲基咪唑的快速檢測[詳細]

  2024-09-13 23:08

  課件

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• 靈芝活性成分的毛細管電泳快速檢測

  靈芝活性成分的毛細管電泳快速檢測[詳細]

  2010-01-28 00:00

  專利

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• 安譜過濾產品

  安譜過濾產品[詳細]

  2015-06-24 00:00

  操作手冊

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• 安譜-液相色譜柱征文活動

  為了感謝您一直以來對CNW品牌的支持，上海安譜科學儀器有限公司現(xiàn)推出“CNW液相色譜柱使用體驗”征文活動，您只要寫出CNW液相色譜柱使用體驗，即可獲得精美獎品一份。[詳細]

  2018-08-10 10:58

  產品樣冊

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• 烘焙食品中安賽蜜和阿斯巴甜的檢測解決方案

  烘焙食品中安賽蜜和阿斯巴甜的檢測解決方案[詳細]

  2024-09-20 13:38

  選購指南

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• 小活絡丸中痕量毒性成分的快速限量檢測

  小活絡丸中痕量毒性成分的快速限量檢測[詳細]

  2024-09-27 23:58

  期刊論文

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• BSZYD-FZJ 重金屬檢測儀快速檢測食品中的重金屬

  BSZYD-FZJ重金屬檢測儀快速檢測食品中的重金屬BSZYD-FZJ重金屬檢測儀（12通道）用于快速檢測食品中的金屬鉛、砷、銅、鉻、鎘、汞，以下是產品的特點：*儀器全金屬機殼，堅固耐用。*5英寸大屏幕全中文液晶顯示屏。*光源采用超高亮發(fā)光二極管，具有低功耗、可靠性高，響應速度快等優(yōu)點。*采用閉環(huán)回路光源自動校準系統(tǒng)，避免了長時間使用，或者外部條件變化導致的光源過強或過弱等現(xiàn)象，保證光源始終工作在**狀態(tài)。*光源預熱及恒溫管理系統(tǒng)，有效避免漂移，保證長時間測量的穩(wěn)定性。*12組獨立檢測單元，每單元均由一組光源系統(tǒng)，一個樣品倉，一組檢測系統(tǒng)構成。*儀器自動校正0%及1**%，不需要人工進行此校正操作。*儀器具備自檢功能。能判斷故障并給予提示，幫助人員對儀器進行維護。*超大容量內存，可存儲上萬條數(shù)據。*可隨時進行數(shù)據查詢、打印、刪除等操作。*儀器配備USB接口，可將數(shù)據上傳到電腦。*配備大容量可充電電池，無外接電源時，可維持超過8小時工作。*配有汽車電源接口，方便用戶用于裝備流動檢測車。一、BSZYD-FZJ重金屬檢測儀（12通道）參數(shù)：*重金屬鉛：檢出下限：0.5mg；0.2mg/L檢測范圍：(0～50)mg；(0～20)mg/L*砷：檢出下限：0.04mg；0.02mg/L檢測范圍：(0～4)mg；(0～2)mg/L*銅：檢出下限：0.08mg/L；0.4mg；2mg檢測范圍：(0～5)mg/L；(0～20)mg；(0～100)mg*六價鉻：檢出下限：0.5mg；0.03mg/L檢測范圍：(0～50)mg；(0～3)mg/L*鎘：檢出下限：0.1mg；0.01mg/L檢測范圍：(0～10)mg；(0～1)mg/L*汞：檢出下限：0.02mg；0.02mg/L檢測范圍：(0～2)mg；(0～2)mg/L二、BSZYD-FZJ重金屬檢測儀（12通道）配置：*主機1臺*天平1臺*樣品處理器具及試劑1套*電熱杯1個*超聲波清洗機1個*USB線1根*安裝光盤1張*操作說明書1本*BSZYD-FZJ重金屬檢測儀（12通道）電源1套[詳細]

  2018-10-07 10:02

  產品樣冊

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• 智云達ZYD-F04 食品安 快速檢測儀產品樣冊

  智云達ZYD-F04 食品安 快速檢測儀產品樣冊[詳細]

  2016-10-19 17:46

  操作手冊

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• 快速檢測葡萄酒的香味成分-氣相色譜法

  快速檢測葡萄酒的香味成分-氣相色譜法[詳細]

  2024-10-01 10:17

  應用文章

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• 如何快速解決風淋室故障

  如何快速解決風淋室故障[詳細]

  2016-01-20 00:00

  期刊論文

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