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人皮質(zhì)類固醇結(jié)合球蛋白(CBG)ELISA Kit說明書
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本文由 上海希美化學(xué)有限公司 整理匯編
2014-08-21 00:00 335閱讀次數(shù)
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人皮質(zhì)類固醇結(jié)合球蛋白(CBG)ELISA Kit說明書
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人皮質(zhì)類固醇結(jié)合球蛋白(CBG)ELISA Kit說明書
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2014-08-21 00:00
選購指南
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豬皮質(zhì)類固醇結(jié)合球蛋白(SERPINA6)ELISA試劑盒
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操作手冊(cè)
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豬皮質(zhì)類固醇結(jié)合球蛋白(SERPINA6)ELISA檢測(cè)試劑盒
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人甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)ELISA Kit說明書
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2014-09-02 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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人17-酮皮質(zhì)類固醇(17-KS)ELISA說明書
- 人17-酮皮質(zhì)類固醇(17-KS)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿、組織等樣本中17-酮皮質(zhì)類固醇(17-KS)的含量。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人17-酮皮質(zhì)類固醇(17-KS)水平。用純化的人17-酮皮質(zhì)類固醇(17-KS)捕獲抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被的微孔中依次加入人17-酮皮質(zhì)類固醇(17-KS),再與HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人17-酮皮質(zhì)類固醇(17-KS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人17-酮皮質(zhì)類固醇(17-KS)含量。[詳細(xì)]
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2018-12-02 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人17-羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA
- 人17-羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿、組織等樣本中17-羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)的含量。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人17-羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)水平。用純化的人17-羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)捕獲抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被的微孔中依次加入人17-羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS),再與HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人17-羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人17-羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)含量。[詳細(xì)]
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2018-12-02 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒
- 人17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-06 00:00
實(shí)驗(yàn)操作
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人17酮皮質(zhì)類固醇elisa試劑盒使用方法
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T0.6μg/L-20μg/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中17-酮皮質(zhì)類固醇(17-KS)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人17-酮皮質(zhì)類固醇(17-KS)水平。用純化的人17-酮皮質(zhì)類固醇(17-KS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入17-酮皮質(zhì)類固醇(17-KS),再與HRP標(biāo)記的17-酮皮質(zhì)類固醇(17-KS)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的17-酮皮質(zhì)類固醇(17-KS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人17-酮皮質(zhì)類固醇(17-KS)濃度。[詳細(xì)]
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2018-12-30 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISA Kit說明書
- 人皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISA Kit說明書[詳細(xì)]
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2014-08-21 00:00
期刊論文
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人(Human)17-羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA 檢測(cè)試劑盒說明書
- 人(Human)17-羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA檢測(cè)試劑盒本試劑僅供研究使用標(biāo)本:尿液試驗(yàn)原理:17-OHCS試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知17-OHCS濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將17-OHCS和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中17-OHCS的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品:80umol/L1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按說明書進(jìn)行稀稀空白對(duì)照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素標(biāo)記的抗17-OHCS抗體1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型親和鏈酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗滌緩沖液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按說明書進(jìn)行稀釋底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型終止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型標(biāo)本稀釋液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。2.實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項(xiàng)1.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。2.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。9.按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液5、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備1.標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行:80umol/L(6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。40umol/L(5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液20umol/L(4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液10umol/L(3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液5.0umol/L(2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.5umol/L(1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)100ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0umol/L(空白對(duì)照)原始濃度不用稀釋直接加入50ul。2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。操作步驟1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。8.取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。9.在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。建議使用的實(shí)驗(yàn)方案標(biāo)準(zhǔn)品濃度(umol/L)A8080樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B4040樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C2020樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D1010樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E5.05.0樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F2.52.5樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與人其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的17-OHCS標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的17-OHCS含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出濃度。3、檢測(cè)值范圍:0-80umol/L4、敏感度:0.1umol/L[詳細(xì)]
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2018-09-14 10:01
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人17-羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒組成
- 人(human)17-羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒本試劑盒僅供研究使用標(biāo)本:尿液一、試劑組成精密度微孔板96孔(MicrotitrationStrips)1塊2~8℃干燥保存酶標(biāo)偶合液(Conjugate)1瓶12.0毫升2~8℃冷藏保存標(biāo)準(zhǔn)品(Standard)5瓶各1.0毫升2~8℃冷藏保存呈色劑A(SubstrateA)1瓶6.0毫升2~8℃避光冷藏保存呈色劑B(SubstrateB)1瓶6.0毫升2~8℃避光冷藏保存終止液(StoppingSolution)1瓶6.0毫升室溫保存20倍濃縮洗滌液(RinsingBufferx20)1瓶60.0毫升2~8℃冷藏保存5倍濃縮樣品稀釋液(Diluentx5)1瓶15.0ml2~8℃冷藏保存英文說明書,中文說明書各一份室溫保存二、人(human)17-羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)1.此試劑為體外檢測(cè)試劑,效期內(nèi)使用,試劑應(yīng)視為傳染物,不同總批號(hào)的試劑不能混用。2.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,3.濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘。4.濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘5.若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),標(biāo)本可存放于2~8℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn),標(biāo)本-20℃保存,避免反復(fù)凍融。6.在反復(fù)清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低極ng確度,造成吸光度偏離的假像。7.加樣完畢后,應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條,以便使孔中的液體充分混勻。8.試劑盒保存于2~8℃,請(qǐng)勿冷凍,有效期請(qǐng)見盒內(nèi)標(biāo)示。三、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備1.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。2.準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料,如微量移液器,吸頭,醫(yī)用蒸餾水等3.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水119倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液4.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水14倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液5.用應(yīng)用樣品稀釋液來稀釋樣品,按照1:100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,充分混勻待用。)四、人(human)17-羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒操作步驟1.取出酶標(biāo)板,設(shè)空白孔,依照次序?qū)?yīng)分別加入100μl的標(biāo)準(zhǔn)品于空白微孔中(空白孔視為0號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品,用醫(yī)用蒸餾水替代)2、分別標(biāo)記樣品編號(hào),加入100μl的稀釋樣品于空白微孔中(不同的樣本采用不同的吸頭)。3、將酶標(biāo)板置于37℃溫育30分鐘;4、將酶標(biāo)板板取出,將其中的液體甩去,每個(gè)孔中全部加滿應(yīng)用洗滌液后,立即甩去液體;5、每個(gè)孔中加滿應(yīng)用洗滌液后,輕微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的應(yīng)用洗滌液甩去,在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。6、重復(fù)第5個(gè)步驟5次,在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。7、在標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣品孔中加入100μl的酶標(biāo)偶合溶液。8、將96孔板置于37℃溫育30分鐘。9、將酶標(biāo)板取出,將其中的液體甩去,每個(gè)孔中全部加滿應(yīng)用洗滌液后,立即甩去液體。10、每個(gè)孔中再次加滿洗滌應(yīng)用液后,室溫輕微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的應(yīng)用洗滌液甩去,在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。11、重復(fù)第5個(gè)步驟5次,在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。12、在每個(gè)孔中加入底物A50μl后立即加入底物B50μl。輕輕振蕩混勻。(A液、B液采用不同的吸頭加樣)13、將酶標(biāo)板置于37℃避光溫育反應(yīng)15分鐘。14、每個(gè)微孔中加入50μl的終止液,輕輕振蕩混勻。15、在酶標(biāo)儀上,450nm處測(cè)定OD;顯色后,15分鐘內(nèi)進(jìn)行測(cè)定。16、根據(jù)制備的標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算樣本含量五、人(human)17-羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒結(jié)果判斷1.儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值;2、檢測(cè)值范圍:0-160umol/ml3、敏感度:0.5umol/ml[詳細(xì)]
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2018-09-19 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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現(xiàn)貨人17-羥皮質(zhì)類固醇ELISA檢測(cè)試劑盒
- 人17-羥皮質(zhì)類固醇ELISA檢測(cè)試劑盒 本試劑僅供研究使用標(biāo)本:尿液試驗(yàn)原理: 17-OHCS試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知17-OHCS濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將17-OHCS和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中17-OHCS的濃度呈比例關(guān)系。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。人17-羥皮質(zhì)類固醇ELISA檢測(cè)試劑盒操作注意事項(xiàng)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。人17-羥皮質(zhì)類固醇ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性:不與人其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。人17-羥皮質(zhì)類固醇ELISA檢測(cè)試劑盒結(jié)果判斷與分析1、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的17-OHCS標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的17-OHCS含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出濃度。3、檢測(cè)值范圍:0-80umol/L4、敏感度:0.1umol/LPAX2(PAX2Pairedboxgene2)配對(duì)盒基因2抗體0.2mlPAX3(Pairedboxgene3)配對(duì)盒基因3抗體0.2mlPAX5(Pairedboxgene5)配對(duì)盒基因5抗體0.2mlRatIgM/FITC熒光素標(biāo)記大鼠IgM0.3mlrHIL-1Ra/FITC熒光素標(biāo)記重組人白介素-1受體拮抗劑0.3mlKLH/FITC熒光素標(biāo)記血藍(lán)蛋白0.3mlPAX7(Pairedboxgene7)配對(duì)盒基因7抗體0.2mlPAX8(Pairedboxgene8)配對(duì)盒基因8抗體0.2mlPAX9(Pairedboxgene9)配對(duì)盒基因9抗體0.2mlP-cadherin(placental)P-鈣粘附分子抗體0.1mlP-cadherin(placental)P-鈣粘附分子抗體0.2mlLI-cadherin(liver-intestinecadherin)肝腸鈣粘連蛋白抗體0.2mlPCNA(ProliferationCellNucleargen)origin:human,mouse,rat,rabbit,horse,bovine,dog,chickenandsheep增殖細(xì)胞核抗原抗體0.1mlPCNA(ProliferationCellNucleargen)origin:human,mouse,rat,rabbit,horse,bovine,dog,chickenandsheep增殖細(xì)胞核抗原抗體0.2mlhumanIgM/Cy3熒光素Cy3標(biāo)記人IgM0.1mlhumanIgA/Cy3熒光素Cy3標(biāo)記人IgA0.1mlPCNA(ProliferationCellNucleargen)增殖細(xì)胞核抗原抗體0.1mlPCNA(ProliferationCellNucleargen)增殖細(xì)胞核抗原抗體0.2ml[詳細(xì)]
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2018-09-19 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠17-羥基皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒說明書
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com大鼠17-羥基皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和尿液生物體液內(nèi))原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠17-OHCS單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的17-OHCS與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠17-OHCS,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測(cè)OD值,17-OHCS濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中17-OHCS濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):5μmol/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、尿液等盡早檢測(cè),2-8℃保存48小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清、血漿標(biāo)本測(cè)定前用標(biāo)本稀釋液作1:20稀釋(取10ul,加標(biāo)本稀釋液190ul,稀釋20倍)。尿液不做稀釋。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成10mmol的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入10mmol的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測(cè)程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6、0μmol為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)17-OHCS含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的17-OHCS檢測(cè)濃度小于8μmol。2.特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的大鼠17-OHCS。不與大鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10.6%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人皮質(zhì)抑素/皮質(zhì)醇穩(wěn)定蛋白(CORT)ELISA kit說明書
- 人皮質(zhì)抑素/皮質(zhì)醇穩(wěn)定蛋白(CORT)ELISA kit說明書[詳細(xì)]
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2014-08-21 00:00
選購指南
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小鼠17-羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)elisa試劑盒使用說明書
- 小鼠17-羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)elisa試劑盒使用說明書[詳細(xì)]
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2013-08-07 00:00
實(shí)驗(yàn)操作
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人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA Kit說明書
- 人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA Kit說明書[詳細(xì)]
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2014-09-02 00:00
應(yīng)用文章
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人皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISA Kit文獻(xiàn)
- 人皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISA Kit文獻(xiàn)[詳細(xì)]
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2014-08-21 00:00
操作手冊(cè)
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人17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)檢測(cè)試劑盒
- 人17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]
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2015-03-17 00:00
專利
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人17-羥皮質(zhì)類固醇17-OHCS試劑盒原裝
- 人17-羥皮質(zhì)類固醇17-OHCS試劑盒原裝[詳細(xì)]
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2015-04-14 00:00
實(shí)驗(yàn)操作
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小鼠17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒
- 小鼠17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-08 00:00
期刊論文
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