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玉米粉蛋白質(zhì)的測定方法
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本文由 步琦實驗室設(shè)備貿(mào)易(上海)有限公司 整理匯編
2024-09-20 03:51 482閱讀次數(shù)
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玉米粉蛋白質(zhì)的測定方法
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玉米粉蛋白質(zhì)的測定方法
- 玉米粉蛋白質(zhì)的測定方法[詳細(xì)]
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2024-09-20 03:51
選購指南
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蛋白質(zhì)溶液濃度測定方法
- 蛋白質(zhì)溶液濃度測定方法蛋白質(zhì)溶液濃度測定方法有多種,下述幾種方法可供選用。蛋白質(zhì)濃度的測定,往往用于計算純化方法的回收率的重要方法。一、雙縮脲法雙縮脲法是**個用比色法測定蛋白質(zhì)濃度的方法,至令仍廣泛采用。在需要快速,但不很準(zhǔn)確的測定中,常用此法。硫銨不干擾顯色,這對蛋白質(zhì)提純的早期價段是非常有利的。雙縮脲法的原理是Cu2+與蛋白質(zhì)的肽鍵,以及酪氨酸殘基絡(luò)合,形成紫藍(lán)色絡(luò)合物,此物在540nm波長處有Zda吸收。雙縮脲法常用于0.5g/L~10g/L含量的蛋白質(zhì)溶液測定。干擾物有硫醇,以及具有肽性質(zhì)緩沖液,如Tris、Good緩沖液等。可用沉淀法除去干擾物,即用等體積10%冷的三氯醋酸沉淀蛋白質(zhì),然后棄去上清液,再用已知體積的1mNaOH溶解沉淀的蛋白質(zhì)進(jìn)行定量測定。二、Lowry法此法是雙縮脲法的進(jìn)一步發(fā)展。他的**步就是雙縮脲反應(yīng),即Cu++與蛋白質(zhì)在堿性溶液中形成絡(luò)合物,然后這個絡(luò)合物還原磷鉬磷-磷鎢酸試劑(福林-酚試劑),結(jié)果得到深藍(lán)色物。此法比雙縮脲法靈敏得多,適合于測定20mg/L~400mg/L含量的蛋白質(zhì)溶液。其干擾物質(zhì)與雙縮脲法相同,而且受他們的影響更大,硫醇和許多其他物質(zhì)的存在會使結(jié)果嚴(yán)重偏差。另外要注意的是,加入福林試劑時要特別小心,試劑只在酸性pH環(huán)境中才穩(wěn)定,上述提到的還原反應(yīng)只有在pH10時才發(fā)生,因此,福林試劑加入到堿性的Cu2+-蛋白質(zhì)溶液中時,必須立刻攪拌,以使磷鉬酸-磷鎢酸試劑在未被破壞之前能有效地被Cu2+-蛋白質(zhì)絡(luò)合物所還原。三、紫外吸收法大多數(shù)蛋白質(zhì)在280nm波長處有特征的Zda吸收,這是由于蛋白質(zhì)中有酪氨酸,色氨酸和苯丙氨酸存在的緣故,因此,利用這個特異性吸收,可以計算蛋白質(zhì)的含量。如果沒有干擾物質(zhì)的存在,在280nm處的吸收可用于測定0.1~0.5mg/ml含量的蛋白質(zhì)溶液。部分純化的蛋白質(zhì)常含有核酸,核酸在260nm波長處有Zda吸收。有核酸時,所測得的蛋白質(zhì)濃度必須作適當(dāng)校正,一般按下述公式粗略計算:是蛋白質(zhì)溶液在280nm波長處(光程1厘米)測得的光密度值。是蛋白質(zhì)溶液在260nm小波長處(光程1厘米)處所測得的光密度值。此方程是從烯醇酶(在酵母核酸存在時)得出來的。因此,對其他蛋白質(zhì)和其他核酸不一定適用。由于各種蛋白質(zhì)所含芳香族氨基酸的量不同,因此,濃度為0.1%的各種蛋白質(zhì)在280nm處的消光系數(shù)()在0.5~2.5之間變化。所有的蛋白質(zhì)在230nm以下都有強吸收。例如,牛血清白蛋白的α0.1%在225nm和215nm處分別為5.0和11.7,而在280nm處測為0.58。在230nm以下的強吸收是由于肽鍵的存在,因此,此值對所有的蛋白質(zhì)都是一樣的。從215nm和225nm處的光密度之差可用于測定濃度為10μl/ml~100μl/ml的蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)濃度可以近似地由下式得到:光密度之差求得,這一公式是減去溶液中非蛋白質(zhì)成分產(chǎn)生的誤差。但是,蛋白質(zhì)之間的分子量差異比較大,因此,在比較幾種蛋白質(zhì)含量時,必須作適當(dāng)?shù)男U?。由于蛋白質(zhì)的吸收峰常因pH改變而變化,所以在制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時,必須與樣品條件一致。相關(guān)產(chǎn)品如下:聯(lián)系方式上海索萊寶生物科技有限公司電話:021-6485566518018609966傳真:021-54261506郵編:200233地址:上海市欽江路15號14層郵箱:solarbio@126.com網(wǎng)址:www.shsolarbio.com優(yōu)質(zhì)試劑質(zhì)量放心價格Zdi為ZG生物產(chǎn)業(yè)做貢獻(xiàn)蛋白濃度測定相關(guān)產(chǎn)品特價促銷索寶特價另有其他常用生化試劑歡迎詢問【021-54100800】[詳細(xì)]
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2018-09-02 10:00
產(chǎn)品樣冊
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食品中蛋白質(zhì)的測定方法
- 食品中蛋白質(zhì)的測定方法[詳細(xì)]
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2008-06-17 00:00
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牛奶蛋白質(zhì)的測定方法優(yōu)化
- 牛奶蛋白質(zhì)的測定方法優(yōu)化[詳細(xì)]
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2014-11-13 00:00
實驗操作
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提取蛋白質(zhì)的方法
- 植物組織蛋白質(zhì)提取方法:1、根據(jù)樣品重量(1g樣品加入3.5ml提取液,可根據(jù)材料不同適當(dāng)加入),準(zhǔn)備提取液放在冰上。2、把樣品放在研缽中用液氮研磨,研磨后加入提取液中在冰上靜置(3-4小時)。3、用離心機離心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃4、提取上清夜,樣品制備完成。蛋白質(zhì)提取液:300ml1、1Mtris-HCl(PH8)45ml2、甘油(Glycerol)75ml3、聚乙烯吡咯烷酮(Polyvinylpolypyrrordone)6g這種方法針對SDS-PAGE,垂直板電泳!三氯醋酸丙酮沉淀法1、在液氮中研磨葉片2、加入樣品體積3倍的提取液在-20℃的條件下,然后離心(4℃8000rpm以上1小時)棄上清。3、加入等體積的冰浴丙酮(含0.07%的β-巰基乙醇),搖勻后離心(4℃8000rpm以上1小時),然后真空干燥沉淀,備用。4、上樣前加入裂解液,室溫放置30分鐘,使蛋白充分溶于裂解液中,然后離心(15℃8000rpm以上1小時或更長時間以沒有沉淀為標(biāo)準(zhǔn)),可臨時保存在4℃待用。5、用Brandford法定量蛋白,然后可分裝放入-80℃?zhèn)溆谩?a href="/doc/detail_87a108bac081a029.html" target="_blank">[詳細(xì)]
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2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊
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蛋白質(zhì)測定的國標(biāo)規(guī)定方法凱氏定氮法介紹
- 蛋白質(zhì)測定的國標(biāo)規(guī)定方法凱氏定氮法介紹[詳細(xì)]
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2024-09-20 04:02
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新鮮牛奶蛋白質(zhì)含量快速測定方法
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2024-09-29 13:15
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蛋白質(zhì)提取的方法總匯
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2011-12-08 00:00
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蛋白質(zhì)提取方法
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2018-08-15 10:57
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小麥粉和玉米粉中赭曲霉毒素的測定解決方案.
- 赭曲霉毒素是繼黃曲霉毒素后又一個引起世界廣泛關(guān)注的霉菌毒素。它是由曲霉屬的7種曲霉和青霉屬的6種青霉菌產(chǎn)生的一-組重要的、 污染食本應(yīng)用文章參考GB 5009.96-2016 《食品安全:國家標(biāo)準(zhǔn)食品中赭曲霉毒素A的測定》中第一法,采用免疫親和柱凈化,高效液相色譜聯(lián)用技術(shù)檢測。
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2024-01-30 14:53
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蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的推測與測定
- 蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的推測與測定[詳細(xì)]
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2013-04-09 00:00
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紫外分光光度計測定蛋白質(zhì)的含量
- 考馬斯亮蘭G250與蛋白質(zhì)結(jié)合,在0-1000ug/ml范圍內(nèi),于波長595nm處的吸光度與蛋白質(zhì)含量成正比,可用于蛋白質(zhì)含量的測定??捡R斯亮蘭G250與蛋白質(zhì)結(jié)合迅速,結(jié)合產(chǎn)物在室溫下10分鐘內(nèi)較為穩(wěn)定,是一種較好的蛋白質(zhì)定量測定方法。[詳細(xì)]
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2018-08-10 10:58
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食品中蛋白質(zhì)的測定 GB5009.52016
- 食品中蛋白質(zhì)的測定GB5009.52016[詳細(xì)]
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2018-08-23 10:00
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gb5009.5-2003食品中蛋白質(zhì)的測定
- ST115C全自動凱氏定氮儀采用國際標(biāo)準(zhǔn)凱氏定氮法顏色判斷終點,廣泛適用于多樣化樣品(食品,油料作物、飼料,肥料,種子、乳制品、飲料、土壤等)的含氮量分析,儀器采用四路獨立進(jìn)口計量泵,實現(xiàn)GX、準(zhǔn)確自動加液。蒸餾、分離、冷凝、滴定計算、結(jié)果打印一體完成。[詳細(xì)]
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2018-10-12 10:00
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蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的推測與測定
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2024-09-16 18:47
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2015-11-04 00:00
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玉米粉中玉米赤霉烯酮檢測的固相萃取方法
- 玉米粉中玉米赤霉烯酮檢測的固相萃取方法[詳細(xì)]
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2024-09-20 00:03
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瑞士步琪關(guān)于蛋白質(zhì)和三聚氰胺測定方法
- 瑞士步琪關(guān)于蛋白質(zhì)和三聚氰胺測定方法[詳細(xì)]
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