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小鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)檢測試劑盒
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本文由 上海信裕生物科技有限公司 整理匯編
2015-08-31 00:00 195閱讀次數(shù)
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小鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)檢測試劑盒
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小鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)檢測試劑盒
- 小鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)檢測試劑盒[詳細]
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2015-08-31 00:00
產(chǎn)品樣冊
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小鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒
- 小鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒[詳細]
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2013-12-09 00:00
專利
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人巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)檢測試劑盒
- 人巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)檢測試劑盒[詳細]
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2024-09-30 16:49
應用文章
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大鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)定量檢測試劑盒(ELISA)
- www.biokanu.com本試劑盒只能用于科學研究,不得用于醫(yī)學診斷。大鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)定量檢測試劑盒(ELISA)使用說明書【試劑盒名稱】大鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)試劑盒(ELISA)【試劑盒用途】定量檢測大鼠血清、血漿及相關液體樣本中巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)的含量。【檢測原理】本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。將標準品、待測樣本加入到預先包被大鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)抗體透明酶標包被板中,溫育足夠時間后,洗滌除去未結(jié)合的成分,再加入酶標工作液,溫育足夠時間后,洗滌除去未結(jié)合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下轉(zhuǎn)化為藍色產(chǎn)物,在酸的作用下變成黃色,顏色的深淺與樣品中大鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)濃度呈正相關,450nm波長下測定OD值,根據(jù)標準品和樣品的OD值,計算樣本中大鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)含量。【試劑盒組成】1酶標包被板12孔×8條7顯色劑A液6mL2標準品:80pg/mL0.6mL8顯色劑B液6mL320倍濃縮洗滌液25mL9終止液6mL4標準品稀釋液6mL10說明書1份5樣本稀釋液6mL11封板膜2張6酶標試劑6mL12密封袋1個備注:標準品用標準品稀釋液依次稀釋為:80、40、20、10、5、2.5pg/mL【需要而未提供的試劑和器材】1、37℃恒溫箱標準規(guī)格酶標儀精密移液器及一次性吸頭蒸餾水一次性試管吸水紙【操作步驟】1、準備:從冰箱取出試劑盒,室溫復溫平衡30分鐘。2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。3、加標準品和待測樣本:取足夠數(shù)量的酶標包被板,固定于框架上,分別設置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔,記錄各孔位置,在標準品孔中加入標準品50μL;待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);空白對照孔不加。4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。6、加酶標工作液:每孔加入酶標工作液50μL,空白對照孔不加。7、溫育:重復4的操作。8、洗板:重復5的操作。9、顯色:每孔先加入顯色劑A液50μL,再加入顯色劑B液50μL,37℃避光顯色15min。10、終止:取出酶標板,每孔加終止液50μL,終止反應(顏色由藍色立轉(zhuǎn)黃色)。11、測定:以空白孔調(diào)零,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。12、計算:根據(jù)標準品的濃度及對應的OD值,計算出標準曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,在回歸方程上計算出對應的樣品濃度,也可以使用各種應用軟件來計算。Z終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)。【樣本要求】1、樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因為疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的YZ劑。2、標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能立即試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。3、樣本應充分離心,不得有溶血及顆粒?!咀⒁馐马棥?、實驗嚴格按照說明書的操作進行,實驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。2、酶標包被板開封后如未用完,應立即裝入密封袋中加干燥劑保存。3、建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差。4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍,計算結(jié)果乘以5才是樣本實際濃度。5、本試劑盒定量范圍為2.5-80pg/mL,超過此范圍,為標準曲線延伸計算所得,不做為準確定量結(jié)果,請用標準品稀釋液稀釋后測定準確結(jié)果(2.5-80pg/mL范圍內(nèi)),乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本Z終濃度。6、若顯色過淺,可適當延長底物溫育時間。7、為避免交叉污染,標準品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭;酶標工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微孔;不得重復使用封板膜。8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用,不同批號的試劑不得混用。9、底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。【操作程序總結(jié)】準備試劑,樣品和標準品加入準備好的樣品和標準品,37℃反應30分鐘洗板4次,加入酶標試劑,37℃反應30分鐘洗板4次,加入顯色液A、B,37℃顯色15分鐘加入終止液15分鐘之內(nèi)讀OD值計算【檢測范圍】2.5-80pg/mL【規(guī)格】96人份/盒【貯藏】2-8℃,避光防潮保存?!居行凇?個月[詳細]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒
- 人巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒[詳細]
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2013-12-06 00:00
課件
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大鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒
- 大鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-18 19:25
選購指南
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人巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒
- 人巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒[詳細]
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2024-09-28 17:22
其它
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人巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒說明書
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com人巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人M-CSF單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的M-CSF與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人M-CSF,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,M-CSF濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中M-CSF濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):20ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。2.標準品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成20ng/ml的溶液。設標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應M-CSF含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的M-CSF檢測濃度小于16.5pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人M-CSF。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10.3%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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人巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒使用說明書
- 本試劑盒僅供研究使用。ELISA試劑盒檢測范圍:96T20ng/L-700ng/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)水平。用純化的人巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF),再與HRP標記的巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品(1280ng/L)0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。ELISA試劑盒操作步驟標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。640ng/L5號標準品150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液320ng/L4號標準品150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液160ng/L3號標準品150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液80ng/L2號標準品150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液40ng/L1號標準品150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結(jié):計算以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標準曲線,**做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。ELISA試劑盒保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細]
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2018-09-27 10:00
產(chǎn)品樣冊
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小鼠粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒說明書
- 小鼠粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗小鼠GM-CSF單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的GM-CSF與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗小鼠GM-CSF,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,GM-CSF濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中GM-CSF濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):20ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。2.標準品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成20ng/ml的溶液。設標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應GM-CSF含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的GM-CSF檢測濃度小于16.5pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的小鼠GM-CSF。不與小鼠其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10.3%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)檢測試劑盒
- 人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)檢測試劑盒[詳細]
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2024-09-28 22:09
安裝說明
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大鼠粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com大鼠粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠GM-CSF單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的GM-CSF與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠GM-CSF,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,GM-CSF濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中GM-CSF濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):80ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。2.標準品液配制:使用前加入4ml蒸餾水混勻,配成20ng/ml的溶液。設標準管8管,**管加標本稀釋液900ul,第二至第八管加入標本稀釋液500ul。在**管中加入20ng/ml的標準品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應GM-CSF含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的GM-CSF檢測濃度小于16.5pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的大鼠GM-CSF。不與大鼠其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10.3%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒
- 大鼠粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒[詳細]
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人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GMCSF)ELISA試劑盒
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小鼠Slit2 檢測試劑盒
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人粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子酶聯(lián)ELISA試劑盒
- 人粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子酶聯(lián)ELISA試劑盒[詳細]
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人粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒說明書
- 人粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人GM-CSF單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的GM-CSF與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人GM-CSF,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,GM-CSF濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中GM-CSF濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標板(CoatedWells)96孔酶標抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標準品(Standards):8ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準備試劑與收集血樣1.收集標本:血清、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復凍融。2.標準品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成8000pg/ml的溶液。設標準管8管,每管加入標本稀釋液300ul。在**管中加入8000pg/ml的標準品溶液300ul混勻后用加樣器吸出300ul,移至第二管。如此反復作對倍稀釋,從第七管中吸出300ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應減除空白值后再行計算。2.以標準品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應GM-CSF含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的GM-CSF檢測濃度小于32pg/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人GM-CSF。不與人其它細胞因子有交叉反應。3.重復性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10.3%。注意事項1.以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。2.洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細]
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2018-09-13 10:01
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2015-07-24 00:00
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