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小鼠天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶,酶聯(lián)免疫分析,AST說明書

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2018-10-23 10:30 517閱讀次數(shù)

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小鼠天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶,酶聯(lián)免疫分析,AST說明書酶標(biāo)包被板1×481×96標(biāo)準(zhǔn)品:18IU/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶酶標(biāo)試劑3ml×1瓶6ml×1瓶本試劑盒用于測定小鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)含量。小鼠天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶,酶聯(lián)免疫分析,AST說明書實驗原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)水平。用純化的小鼠天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST),再與HRP標(biāo)記的天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中小鼠天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)濃度。小鼠天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶,酶聯(lián)免疫分析,AST說明書樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、者檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。小鼠天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶,酶聯(lián)免疫分析,AST說明書

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