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大鼠環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒說明書
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2018-09-13 10:00 202閱讀次數(shù)
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電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com大鼠環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠cGMP單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的cGMP與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠cGMP,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,cGMP濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中cGMP濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):10nmol/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成20nmol/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入20nmol/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)標(biāo)本激活方法1.將450ul標(biāo)本稀釋液加入到一支1.5ml進(jìn)口聚丙烯管中,再加10ul血清或血漿標(biāo)本。2.加20ul1NHCI,蓋緊,上下混勻。2-8℃放置60±2分鐘。3.加20ul1NNaOH,蓋緊,上下混勻。4.即用,或放-20/-70℃保存3天。計算結(jié)果時乘以稀釋倍數(shù)50。(注意:不同的標(biāo)本cGMP的水平可能有較大差異,請根據(jù)實際情況靈活掌握稀釋度)5.細(xì)胞培養(yǎng)上清或組織勻漿10倍稀釋(410ul的標(biāo)本稀釋液+50ul樣本+20ul的1NHCI+20ul的1NNaOH)。檢測程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品(已激活)100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pmol/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)cGMP含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的cGMP檢測濃度小于15pmol/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的大鼠cGMP。不與大鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于8.9%。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷!
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大鼠環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒說明書
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com大鼠環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠cGMP單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的cGMP與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠cGMP,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,cGMP濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中cGMP濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):10nmol/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成20nmol/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入20nmol/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)標(biāo)本激活方法1.將450ul標(biāo)本稀釋液加入到一支1.5ml進(jìn)口聚丙烯管中,再加10ul血清或血漿標(biāo)本。2.加20ul1NHCI,蓋緊,上下混勻。2-8℃放置60±2分鐘。3.加20ul1NNaOH,蓋緊,上下混勻。4.即用,或放-20/-70℃保存3天。計算結(jié)果時乘以稀釋倍數(shù)50。(注意:不同的標(biāo)本cGMP的水平可能有較大差異,請根據(jù)實際情況靈活掌握稀釋度)5.細(xì)胞培養(yǎng)上清或組織勻漿10倍稀釋(410ul的標(biāo)本稀釋液+50ul樣本+20ul的1NHCI+20ul的1NNaOH)。檢測程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品(已激活)100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pmol/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)cGMP含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的cGMP檢測濃度小于15pmol/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的大鼠cGMP。不與大鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于8.9%。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒
- 大鼠環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-29 01:36
其它
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小鼠環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒說明書
- 小鼠環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗小鼠cGMP單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的cGMP與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗小鼠cGMP,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,cGMP濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中cGMP濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):1000pmol/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清或血漿需要先做預(yù)實驗以確定稀釋倍數(shù)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成2000pmol/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入2000pmol/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品200、100、50、25、12.5、6.25、3.12、0pmol/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)cGMP含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的cGMP檢測濃度小于1.5pmol/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的小鼠cGMP。不與小鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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人環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒說明書
- 人環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人cGMP單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的cGMP與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人cGMP,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,cGMP濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中cGMP濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):60pmol/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。尿液、唾液、支氣管液、細(xì)胞培養(yǎng)上清1:5倍稀釋。血清、血漿至少1:20倍稀釋。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.3ml蒸餾水混勻,配成200pmol/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,每管加入標(biāo)本稀釋液300ul。在**管中加入200pmol/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液300ul混勻后用加樣器吸出300ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出300ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品100、50、25、12.5、6.2、3.1、1.56、0pmol/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)cGMP含量。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的cGMP檢測濃度小于0.8pmol/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人cGMP。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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小鼠環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒
- 小鼠環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-09 00:00
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- 人環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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豬環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)ELISA檢測試劑盒
- 豬環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)ELISA檢測試劑盒[詳細(xì)]
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大鼠環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用方法
- 檢測范圍:96T0-12nmol/L使用目的:本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)水平。用純化的大鼠環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入環(huán)磷酸鳥苷(cGMP),再與HRP標(biāo)記的環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中大鼠環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)濃度。試劑盒組成120倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液3ml×1瓶2酶標(biāo)試劑3ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(24nmol/L)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×4條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液3ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液3ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液3ml×1/瓶12密封袋1個標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。操作步驟標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。12nmol/L5號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液6nmol/L4號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液3nmol/L3號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5nmol/L2號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0.75nmol/L1號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。操作程序總結(jié):計算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6個月[詳細(xì)]
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2018-10-03 10:00
產(chǎn)品樣冊
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人環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明
- 本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T1.5ng/ml-48ng/ml使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)含量。實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)水平。用純化的人環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入環(huán)磷酸鳥苷(cGMP),再與HRP標(biāo)記的環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(96ng/ml)0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個標(biāo)本要求1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3YZ辣根過氧化物酶的(HRP)活性。[詳細(xì)]
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2018-10-03 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒說明書
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com大鼠環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠cAMP單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的cAMP與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠cAMP,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,cAMP濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中cAMP濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):2000pmol/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、尿液等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清、血漿至少作1:2稀釋(取50ul,加標(biāo)本稀釋液50ul,稀釋2倍)。細(xì)胞上清至少10倍稀釋。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入2ml蒸餾水混勻,配成1000pmol/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加1000pmol/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品100、50、25、12.5、6.25、3.12、1.56、0pmol/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)cAMP含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的cAMP檢測濃度小于1pmol/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的大鼠cAMP。不與大鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于8.9%。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊
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大鼠環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒
- 大鼠環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-14 07:13
應(yīng)用文章
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大鼠環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒性能
- 大鼠環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒用于測定大鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中環(huán)磷酸腺苷(cAMP)的含量。應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠環(huán)磷酸腺苷(cAMP)水平。用純化的大鼠環(huán)磷酸腺苷(cAMP)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入環(huán)磷酸腺苷(cAMP),再與HRP標(biāo)記的環(huán)磷酸腺苷(cAMP)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的環(huán)磷酸腺苷(cAMP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中大鼠環(huán)磷酸腺苷(cAMP)濃度。試劑盒保存:2-8℃。有效期:6個月上海華壹生物科技有限公司相關(guān)試劑盒產(chǎn)品介紹:大鼠鈣調(diào)素(CAM)elisa試劑盒大鼠鈣調(diào)素(CAM)酶聯(lián)免疫分析試劑盒Ratcalmodulin,CAMELISAKit大鼠載脂蛋白E(Apo-E)elisa試劑盒大鼠載脂蛋白E(Apo-E)酶聯(lián)免疫分析試劑盒RatApolipoproteinE,Apo-EELISAKit大鼠孤腓肽(OFQ/N)elisa試劑盒大鼠孤腓肽(OFQ/N)酶聯(lián)免疫分析試劑盒RatorphaninFQ/nociceptin,OFQ/NELISAKit大鼠蛋白磷酸酶(PP)elisa試劑盒大鼠蛋白磷酸酶(PP)酶聯(lián)免疫分析試劑盒RatProteinPhosphatase,PPELISAKit大鼠硫氧還蛋白還原酶(TrxR)elisa試劑盒大鼠硫氧還蛋白還原酶(TrxR)酶聯(lián)免疫分析試劑盒Ratthioredoxinreductase,TrxRELISAKit大鼠硫氧化還原蛋白(Trx)elisa試劑盒大鼠硫氧化還原蛋白(Trx)酶聯(lián)免疫分析試劑盒RatThioredoxin,TrxELISAKit大鼠膠原酶II(CollagenaseII)elisa試劑盒大鼠膠原酶II(CollagenaseII)酶聯(lián)免疫分析試劑盒RatCollagenaseTypeIIELISAKit大鼠髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)elisa試劑盒大鼠髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)酶聯(lián)免疫分析試劑盒RatTriggeringReceptorExpressesonMyeloidCells-1,TREM-1ELISAKit大鼠膠原酶I(CollagenaseI)elisa試劑盒大鼠膠原酶I(CollagenaseI)酶聯(lián)免疫分析試劑盒RatCollagenaseIELISAKit大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)elisa試劑盒大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)酶聯(lián)免疫分析試劑盒RatphosphoProteinKinaseC,P-PKCELISAKit大鼠組織蛋白酶K(cath-K)elisa試劑盒大鼠組織蛋白酶K(cath-K)酶聯(lián)免疫分析試劑盒RatCathepsinK,cath-KELISAKit大鼠巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)elisa試劑盒大鼠巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)酶聯(lián)免疫分析試劑盒RatAlternativemacrophageactivation-associatedCCchemokine1,AMAC-1ELISAKit大鼠骨形成蛋白(BMPs)elisa試劑盒大鼠骨形成蛋白(BMPs)酶聯(lián)免疫分析試劑盒Ratbonemorphogeneticproteins,BMPsELISAKit大鼠視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP-4)elisa試劑盒大鼠視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP-4)酶聯(lián)免疫分析試劑盒RatRetinolbindingprotein4,RBP-4ELISAKit大鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)elisa試劑盒大鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)酶聯(lián)免疫分析試劑盒Rat6-keto-prostaglandinF1a,6-K-PGF1aELISAKit大鼠戊糖素(Pentosidine)elisa試劑盒大鼠戊糖素(Pentosidine)酶聯(lián)免疫分析試劑盒RatPentosidineELISAKit大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)elisa試劑盒大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)酶聯(lián)免疫分析試劑盒Ratadvancedglycationendproducts,AGEsELISAKit大鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)elisa試劑盒大鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)酶聯(lián)免疫分析試劑盒Ratneutrophilgelatinase-associatedlipocalin,NGALELISAKit大鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)elisa試劑盒大鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)酶聯(lián)免疫分析試劑盒RatHelicobacterpyloriIgG,Hp-IgGELISAKit大鼠雌激素受體(ER)elisa試劑盒大鼠雌激素受體(ER)酶聯(lián)免疫分析試劑盒RatEstrogenReceptor,ERELISAKit大鼠β-防御素(β-Defensins)elisa試劑盒大鼠β-防御素(β-Defensins)酶聯(lián)免疫分析試劑盒Ratβ-DefensinsELISAKit大鼠多巴胺D1受體(D1R)elisa試劑盒大鼠多巴胺D1受體(D1R)酶聯(lián)免疫分析試劑盒RatDopamineD1receptor,D1RELISAKit大鼠腎上腺素能a1A受體(ADRA1A)elisa試劑盒大鼠腎上腺素能a1A受體(ADRA1A)酶聯(lián)免疫分析試劑盒Ratadrenergicalpha-1Areceptor,ADRA1AELISAKit大鼠鈣結(jié)合蛋白(CR)elisa試劑盒大鼠鈣結(jié)合蛋白(CR)酶聯(lián)免疫分析試劑盒RatCalretinin,CRELISAKit大鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)elisa試劑盒大鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)酶聯(lián)免疫分析試劑盒RatHya]uronatebindingprotein,HABPELISAKit大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)elisa試劑盒大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)酶聯(lián)免疫分析試劑盒RatBonemorphogeneticprotein6,BMP-6ELISAKit大鼠N-乙?;?絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸(AcSDKP)elisa試劑盒大鼠N-乙?;?絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸(AcSDKP)酶聯(lián)免疫分析試劑盒RatN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKPELISAKit大鼠Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)elisa試劑盒大鼠Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)酶聯(lián)免疫分析試劑盒RatcrosslinkedN-telopeptideoftypeⅠcollagen,NTXELISAKit大鼠熱休克蛋白27(HSP-27)elisa試劑盒大鼠熱休克蛋白27(HSP-27)酶聯(lián)免疫分析試劑盒Ratheatshockprotein27,HSP-27ELISAKit大鼠26S蛋白酶體(26SPSM)elisa試劑盒大鼠26S蛋白酶體(26SPSM)酶聯(lián)免疫分析試劑盒Rat26Sproteasome,26SPSMELISAKit大鼠TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)elisa試劑盒大鼠TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)酶聯(lián)免疫分析試劑盒RatTGF-beta-inducibleearlyresponsegene-1,TIEG1ELISAKit大鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)elisa試劑盒大鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)酶聯(lián)免疫分析試劑盒RatvisfatinELISAKit大鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)elisa試劑盒大鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)酶聯(lián)免疫分析試劑盒Rattrypsinogenactivationpeptide,TAPELISAKit大鼠膀胱腫瘤抗原(BTA)elisa試劑盒大鼠膀胱腫瘤抗原(BTA)酶聯(lián)免疫分析試劑盒RatBladdertumorantigen,BTAELISAKit大鼠胃蛋白酶(Pepsin)elisa試劑盒大鼠胃蛋白酶(Pepsin)酶聯(lián)免疫分析試劑盒RatPepsinELISAKit[詳細(xì)]
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2018-11-15 10:00
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5-鳥苷三磷酸二鈉鹽
- 5-鳥苷三磷酸二鈉鹽[詳細(xì)]
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2014-09-30 00:00
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5-鳥苷一磷酸二鈉鹽
- 5-鳥苷一磷酸二鈉鹽[詳細(xì)]
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2014-09-30 00:00
實驗操作
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5-鳥苷三磷酸三鈉鹽
- 5-鳥苷三磷酸三鈉鹽[詳細(xì)]
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2024-09-16 12:42
實驗操作
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小鼠環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒說明書
- 小鼠環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗小鼠cAMP單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的cAMP與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗小鼠cAMP,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,cAMP濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中cAMP濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):1000pmol/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、尿液等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清、血漿至少作1:2稀釋(取50ul,加標(biāo)本稀釋液50ul,稀釋2倍)。細(xì)胞上清至少10倍稀釋。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入1ml蒸餾水混勻,配成1000pmol/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入1000pmol/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品100、50、25、12.5、6.2、3.1、1.56、0pmol/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)cAMP含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的cAMP檢測濃度小于0.8pmol/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的小鼠cAMP。不與小鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于8.9%。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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人環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒說明書
- 人環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi))原理本實驗采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人cAMP單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的cAMP與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗人cAMP,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液,在450nm處測OD值,cAMP濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中cAMP濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):10pmol/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測,2-8℃保存48小時;更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清、血漿作1:100稀釋(取10ul,加標(biāo)本稀釋液990ul,稀釋100倍),尿液2倍稀釋(取100ul,加標(biāo)本稀釋液100ul,稀釋2倍)后檢測。細(xì)胞培養(yǎng)上清可以不做稀釋直接檢測。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成20pmol/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,每管加入標(biāo)本稀釋液300ul。在**管中加入20pmol/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液300ul混勻后用加樣器吸出300ul,移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋,從第七管中吸出300ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品10、5、2.5、1.25、0.625、0.312、0.156、0pmol/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)cAMP含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的cAMP檢測濃度小于0.8pmol/ml。2.特異性:可同時檢測重組或天然的人cAMP。不與人其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10%。注意事項1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔,每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:01
產(chǎn)品樣冊
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鳥苷
- 鳥苷[詳細(xì)]
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2024-09-19 03:54
應(yīng)用文章
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大鼠環(huán)磷酸腺苷酶聯(lián)elisa試劑盒操作步驟
- 操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。600pg/ml5號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液300pg/ml4號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液150pg/ml3號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液75pg/ml2號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液37.5pg/ml1號標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。[詳細(xì)]
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2018-10-08 10:01
產(chǎn)品樣冊
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