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大鼠卵清蛋白IgE(OVA IgE)ELISA試劑盒
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2018-09-13 10:00 218閱讀次數(shù)
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大鼠卵清蛋白IgE(OVAIgE)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和生物體液內(nèi))原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠OVAIgE單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的OVAIgE與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠OVAIgE,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測(cè)OD值,OVAIgE濃度與OD值成正比,可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中OVAIgE濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):1000ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè),2-8℃保存48小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清、血漿作1:10稀釋(取20ul,加標(biāo)本稀釋液180ul,稀釋10倍)。細(xì)胞培養(yǎng)上清可以不做稀釋直接檢測(cè)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成2000ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入2000ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測(cè)程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品200、100、50、25、12.5、6.25、3.12、0ng/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)OVAIgE含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的OVAIgE檢測(cè)濃度小于2ng/ml。2.特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的大鼠OVAIgE。不與大鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見(jiàn)變異系數(shù)均小于10.6%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過(guò)程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開(kāi)封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷!
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大鼠卵清蛋白IgE(OVA IgE)ELISA試劑盒
- 大鼠卵清蛋白IgE(OVAIgE)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和生物體液內(nèi))原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠OVAIgE單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的OVAIgE與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠OVAIgE,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測(cè)OD值,OVAIgE濃度與OD值成正比,可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中OVAIgE濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):1000ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè),2-8℃保存48小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。血清、血漿作1:10稀釋(取20ul,加標(biāo)本稀釋液180ul,稀釋10倍)。細(xì)胞培養(yǎng)上清可以不做稀釋直接檢測(cè)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成2000ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,**管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在**管中加入2000ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul,移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七管中吸出500ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測(cè)程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品200、100、50、25、12.5、6.25、3.12、0ng/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)OVAIgE含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的OVAIgE檢測(cè)濃度小于2ng/ml。2.特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的大鼠OVAIgE。不與大鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見(jiàn)變異系數(shù)均小于10.6%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過(guò)程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開(kāi)封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA試劑盒
- 大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-10 00:00
專利
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大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA試劑盒
- 大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-28 13:12
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA試劑盒
- 人卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-06 00:00
操作手冊(cè)
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豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA試劑盒
- 豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-17 01:52
實(shí)驗(yàn)操作
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人卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA試劑盒
- 人卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-29 23:42
應(yīng)用文章
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人卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)檢測(cè)試劑盒
- 人卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]
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2015-03-11 00:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)酶聯(lián)免疫(Elisa)試劑盒說(shuō)明書(shū)
- 豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)酶聯(lián)免疫(Elisa)試劑盒說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]
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2016-09-02 00:00
其它
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豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)ELISA試劑盒
- 豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)上海喬羽生物科技詳細(xì)為您豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū),價(jià)格,品牌,型號(hào),特點(diǎn),用途等資訊,本司專業(yè)經(jīng)營(yíng):進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒,染色液,化學(xué)試劑,生化試劑,蛋白質(zhì),抗生素,微生物,生物分子,質(zhì)粒載體,動(dòng)物血清血漿,緩沖液,標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照品,細(xì)胞株,其他實(shí)驗(yàn)試劑,提供ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù),ELISA種屬包含:大鼠,小鼠,人,植物,豚鼠,馬,牛,雞,兔,猴,魚(yú),駱駝,豬,犬及其他動(dòng)物,了解更多種屬請(qǐng)來(lái)電!中文名:豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)ELISA試劑盒別名:豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)ELISAKit供應(yīng)商:上海喬羽規(guī)格:48t/96t保存:2-8℃低溫保存有效期:6個(gè)月標(biāo)本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。用途:科研實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域科學(xué)研究,不得用于臨床診斷。豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)ELISA檢測(cè)試劑盒特點(diǎn):1、適用于血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。2、可檢測(cè)動(dòng)物類型豐富:人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、雞、蝦、魚(yú)等。3、可檢測(cè)指標(biāo)齊全:白介素,干擾素,肺炎衣原體,血管緊張素,炎癥因子、血管生成素、動(dòng)脈粥樣硬化因子、趨化因子、生長(zhǎng)因子基質(zhì)金屬蛋白酶、脂肪因子等等指標(biāo)。豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)ELISA檢測(cè)試劑盒組成結(jié)構(gòu):1、血清:操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。5、保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)ELISA檢測(cè)試劑盒標(biāo)本的處理:(1)細(xì)胞培養(yǎng)上清液根據(jù)需要用試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)稀釋液稀釋樣品,然后按照說(shuō)明書(shū)所述方法檢測(cè)。推薦稀釋濃度是稀釋5倍。(2)腦脊液根據(jù)需要用試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)稀釋液稀釋樣品,然后按照說(shuō)明書(shū)所述方法檢測(cè)。推薦稀釋濃度是5倍。(3)血漿①用EDTA2K離心收集在真空血液收集管中的血液,5,000×g,15分鐘,4℃,分離血漿樣品,然后儲(chǔ)存在零下80℃直到使用。②用試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)稀釋液5倍稀釋血漿以避免血漿中的干擾物質(zhì)影響檢測(cè),按照說(shuō)明書(shū)指定方法檢測(cè)。豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)ELISA試劑盒操作步驟:1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品Z終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。7.溫育:操作同3。8.洗滌:操作同5。9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)ELISA試劑盒注意事項(xiàng):1、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2、濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3、各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4、請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)Z后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6、底物請(qǐng)避光保存。7、嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8、所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9、本試劑不同批號(hào)組分不得混用。豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)標(biāo)簽:豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)ELISA試劑盒豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)ELISA檢測(cè)試劑盒卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)ELISA試劑盒豚鼠ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2018-11-09 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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小鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA-sIgE)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)
- 小鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA-sIgE)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)[詳細(xì)]
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2024-09-16 11:43
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)ELISA試劑盒
- 人卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-28 01:08
選購(gòu)指南
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人卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)ELISA試劑盒
- 人卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-30 09:35
安裝說(shuō)明
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豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)ELISA試劑盒
- 豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-11 11:06
其它
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大鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒
- 大鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-11 00:00
選購(gòu)指南
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大鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒
- 電話:021-6533363955229872網(wǎng)址:http://www.westang.com大鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒(用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和生物體液內(nèi))原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗大鼠IgE單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的IgE與單抗結(jié)合,加入生物素化的抗大鼠IgE,形成免疫復(fù)合物連接在板上,辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合,加入底物工作液顯藍(lán)色,Z后加終止液硫酸,在450nm處測(cè)OD值,IgE濃度與OD值成正比,可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中IgE濃度。試劑盒組成(2-8℃保存)酶標(biāo)板(CoatedWells)96孔酶標(biāo)抗體工作液(EnzymeConjugate)12ml10×標(biāo)本稀釋液(SampleBuffer)12ml20×濃縮洗滌液(WashBuffer)50ml標(biāo)準(zhǔn)品(Standards):250ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗體工作液(BiotinylatedAntibody)12ml終止液(StopSolution)12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè),2-8℃保存48小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。所有標(biāo)本測(cè)定前用標(biāo)本稀釋液至少作1:20稀釋(取10ul,加標(biāo)本稀釋液190ul,稀釋20倍)。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成500ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,每管加入標(biāo)本稀釋液200ul。在**管中加入500ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液200ul混勻后用加樣器吸出200ul,移至第二管。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋,從第七管中吸出200ul棄去。第八管為空白對(duì)照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋(示例:1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水)。4.洗滌液:用重蒸水1:20稀釋(示例:1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水)檢測(cè)程序1.加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul,將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次,向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板:同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品250、125、62.5、31.2、15.6、7.8、3.9、0ng/ml為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上作圖,畫(huà)出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)IgE含量,再乘上稀釋倍數(shù)即可。試劑盒性能1.靈敏度:Z小的IgE檢測(cè)濃度小于2ng/ml。2.特異性:可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的大鼠IgE。不與大鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性:板內(nèi)、板見(jiàn)變異系數(shù)均小于10.6%。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測(cè)樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過(guò)程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯(cuò)誤地升高。3.板條開(kāi)封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷![詳細(xì)]
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2018-09-13 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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人卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)檢測(cè)試劑盒
- 人卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)檢測(cè)試劑盒[詳細(xì)]
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2024-09-28 07:02
報(bào)價(jià)單
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豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)酶聯(lián)免疫(Elisa)試劑盒說(shuō)明書(shū)
- 豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)酶聯(lián)免疫(Elisa)試劑盒說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]
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2016-09-07 00:00
標(biāo)準(zhǔn)
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豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)酶聯(lián)免疫(Elisa)試劑盒說(shuō)明書(shū)
- 豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)酶聯(lián)免疫(Elisa)試劑盒說(shuō)明書(shū)[詳細(xì)]
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2016-09-07 00:00
課件
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大鼠抗IgE受體抗體ELISA試劑盒
- 大鼠抗IgE受體抗體ELISA試劑盒[詳細(xì)]
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2013-12-10 00:00
實(shí)驗(yàn)操作
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大鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA檢測(cè)試劑盒
- www.biokanu.com本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷大鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)檢測(cè)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被大鼠免疫球蛋白E(IgE)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠免疫球蛋白E(IgE)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法1.血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2.血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。3.細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。5.保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。自備物品酶標(biāo)儀(450nm)高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒溫箱操作注意事項(xiàng)試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液即可視為陰性對(duì)照或者空白;預(yù)處理后的樣本無(wú)需稀釋,直接取10μL加樣即可。嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。所有液體組分使用前充分搖勻。試劑盒組成名稱96孔配置48孔配置備注微孔酶標(biāo)板12孔×8條12孔×4條無(wú)標(biāo)準(zhǔn)品(24μg/mL)0.6mL0.6mL按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液6mL3mL無(wú)樣本稀釋液6mL3mL無(wú)檢測(cè)抗體-HRP10mL5mL無(wú)20×洗滌緩沖液25mL15mL按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋底物A6mL3mL無(wú)底物B6mL3mL無(wú)終止液6mL3mL無(wú)封板膜2張2張無(wú)說(shuō)明書(shū)1份1份無(wú)自封袋1個(gè)1個(gè)無(wú)注:標(biāo)準(zhǔn)品用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液依次稀釋為:24、12、6、3、1.5、0.75μg/mL試劑的準(zhǔn)備20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。洗板方法手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。自動(dòng)洗板機(jī):每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。操作步驟從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;待測(cè)樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。結(jié)果判斷繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Excel工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。試劑盒性能1.準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。2.靈敏度:Zdi檢測(cè)濃度小于0.1μg/mL。3.特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。4.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。5.貯藏:2-8℃,避光防潮保存。6.有效期:6個(gè)月免責(zé)聲明1.試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或人體實(shí)驗(yàn),否則所產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān),本公司概不負(fù)責(zé)。2.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作,實(shí)驗(yàn)者違反說(shuō)明書(shū)操作,后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。[詳細(xì)]
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2018-09-22 10:00
產(chǎn)品樣冊(cè)
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